本試驗旨在研究不同濃度的組氨酸對體外培養(yǎng)奶牛乳腺上皮細(xì)胞β-酪蛋白及酪氨酸激酶2（JAK2）-信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活子5（STAT5）/哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（m TOR）信號通路相關(guān)磷酸化蛋白表達(dá)的影響。將原代奶牛乳腺上皮細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng),分為對照組和7個試驗組,采用無必需氨基酸的培養(yǎng)基,對照組不添加組氨酸,試驗組是在對照組基礎(chǔ)上分別添加0.15、0.60、1.20、2.40、4.80、9.60、19.20 mmol/L的組氨酸。采用噻唑藍(lán)比色法檢測原代奶牛乳腺上皮細(xì)胞12 h增殖情況;運用蛋白質(zhì)免疫印跡檢測β-酪蛋白和8個信號通路相關(guān)磷酸化蛋白表達(dá)。結(jié)果表明:1)當(dāng)組氨酸濃度為0.15⁹.60 mmol/L時,與對照組相比,奶牛乳腺上皮細(xì)胞數(shù)量均增加。2)β-酪蛋白表達(dá)量隨組氨酸濃度的增加出現(xiàn)先升高后降低的趨勢,但試驗組均極顯著高于對照組（P<0.01）。3)與對照組相比,組氨酸的添加可極顯著促進(jìn)各信號通路相關(guān)磷酸化蛋白的表達(dá)（P<0.01）;試驗組中,隨著組氨酸濃度的升高,磷酸化哺乳動物雷帕霉素靶蛋白[P-m TOR（Ser2481）]和磷酸化真核細(xì)... 

【文章來源】：動物營養(yǎng)學(xué)報. 2016,28(03)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：10 頁

【文章目錄】：
1材料與方法
    1. 1試驗材料
        1 . 1 . 1主要儀器
        1 . 1 . 2主要試劑
    1. 2試驗方法
        1 . 2 . 1原代奶牛乳腺上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)
        1 . 2 . 2M TT檢測細(xì)胞增殖
        1.2.3蛋白質(zhì)免疫印跡(W B)檢測
            1.2.3.1試驗處理
            1 . 2 . 3 . 2樣品總蛋白提取
            1 . 2 . 3 . 3蛋白質(zhì)免疫印跡檢測
    1. 3數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
2結(jié)果
    2. 1組氨酸對體外培養(yǎng)奶牛乳腺上皮細(xì)胞增殖的影響
    2. 2 組氨酸對體外培養(yǎng)奶牛乳腺上皮細(xì)胞 β - 酪蛋白表達(dá)的影響
    2.3組氨酸對體外培養(yǎng)奶牛乳腺上皮細(xì)胞JAK2-STAT5信號通路相關(guān)磷酸化蛋白表達(dá)的影響
    2. 4組氨酸對體外培養(yǎng)奶牛乳腺上皮細(xì)胞中m TOR信號通路相關(guān)磷酸化蛋白表達(dá)的影響
3 討論
    3. 1 組氨酸對體外培養(yǎng)奶牛乳腺上皮細(xì)胞增殖的影響
    3. 2 組氨酸對信號通路介導(dǎo) β - 酪蛋白合成相關(guān)磷酸化蛋白表達(dá)的影響
4 結(jié)論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]亮氨酸和組氨酸通過mTOR信號通路調(diào)控奶牛腺上皮細(xì)胞中酪蛋白的合成（英文）[J]. Hai-na GAO,Han HU,Nan ZHENG,Jia-qi WANG.  Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2015(06)
[2]亮氨酸或組氨酸通過哺乳動物雷帕霉素靶蛋白信號通路影響奶牛乳腺上皮細(xì)胞中酪蛋白的合成[J]. 高海娜,胡菡,王加啟,鄭楠.  動物營養(yǎng)學(xué)報. 2015(04)
[3]eIF2α激酶和eIF2α磷酸化對特異的蛋白質(zhì)合成的激活作用研究進(jìn)展[J]. 韓欽.  國外醫(yī)學(xué)(分子生物學(xué)分冊). 2002(06)

碩士論文
[1]奶牛乳腺上皮細(xì)胞JAK2-STAT5和mTOR信號通路協(xié)同調(diào)控乳蛋白合成[D]. 史琳琳.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[2]精氨酸對乳腺上皮細(xì)胞中酪蛋白合成的影響及其調(diào)控機制[D]. 徐柏林.揚州大學(xué) 2012
[3]奶牛乳腺上皮細(xì)胞中賴氨酸蛋氨酸配比模式對酪蛋白合成的影響及機理研究[D]. 李喜艷.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2011



本文編號：3449481