奶牛脂肪肝是圍產(chǎn)期發(fā)病率較高的營養(yǎng)代謝性疾病。奶牛脂肪肝常會造成奶牛產(chǎn)奶量下降,誘發(fā)皺胃變位、胎衣不下甚至產(chǎn)后癱瘓等疾病,而且該病治療成本較高。這嚴重影響我國奶牛養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。研究奶牛脂肪肝發(fā)病機制,為有效預防和治療脂肪肝病提供理論依據(jù)成為奶牛業(yè)當務之急。本研究通過油酸鈉誘導原代奶牛肝細胞建立脂肪肝細胞模型,并探討了甘草酸單銨鹽（Monoammonium glycyrrhizinate,MAG）對脂肪肝細胞模型和蛋雞肝臟脂肪沉積的影響。1、油酸鈉建立脂肪肝模型濃度和時間的篩選使用不同濃度的油酸鈉（0,0.1,0.25,0.5,1 m Mol/L）對原代培養(yǎng)的犢牛肝細胞作用12 h發(fā)現(xiàn),當油酸鈉濃度為0.25 m Mol/L時,即可出現(xiàn)肝細胞損傷;油紅O染色出現(xiàn)脂肪肝細胞標志性的指環(huán)狀細胞;通過透射電鏡觀察可見模型組中線粒體空泡化嚴重,糖原顆粒較少,說明油酸鈉在誘導刺激奶牛肝細胞12 h的情況下,采用0.25 m Mol/L濃度的油酸鈉為最佳建模濃度。采用0.25 m Mol/L濃度的油酸鈉對原代肝細胞作用不同時長（0、3、6、9、12、24 h）,發(fā)現(xiàn)在誘導9 h肝細胞可出現(xiàn)肝細胞... 

【文章來源】：河南科技大學河南省

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

培養(yǎng)4h的犢牛肝細胞（40×）

分別用*和**表示。2.3 結果2.3.1 犢牛肝細胞分離培養(yǎng)如圖可見：犢牛原代肝細胞在接種 4h 后，低倍鏡下可見（圖 2-1）：肝細胞貼壁狀態(tài)良好還未完全鋪開、細胞密度均勻、生長狀態(tài)良好符合實驗要求、有部分未貼壁的死細胞存在。在高倍鏡下可觀察：肝細胞已貼壁伸展、呈鋪路石狀、細胞邊緣清晰（圖 2-2）。肝細胞培養(yǎng) 24 h 后，低倍鏡下可見（圖 2-3）：經(jīng)過換液培養(yǎng)，死亡的肝細胞數(shù)量與 4h 時相比明顯減少，細胞完全鋪開，細胞間緊貼生長，生產(chǎn)狀態(tài)良好，細胞密度均勻；在高倍鏡下可見（圖 2-4）：細胞間緊密連接，邊緣清晰呈鋪路石樣。 肝細胞培養(yǎng) 48 h 后，低倍鏡可見（圖 2-5）：與 24 h 細胞狀態(tài)相比，細胞密度有所增大，細胞間更加緊湊，死亡細胞數(shù)量更少，細胞狀態(tài)良好；高倍鏡下可見（圖 2-6）：細胞間貼合度增加，形態(tài)、活力基本穩(wěn)定。

圖 2-3. 培養(yǎng) 24 h 的犢牛肝細胞（40×）Fig 2-3. Cultures of calf liver cells for 24hours (40 ×)圖 2-4. 培養(yǎng) 24 h 的犢牛肝細胞（200×）Fig 2-4. Cultures of calf liver cells for 24hours (200 ×)圖 2-5. 培養(yǎng) 48 h 的犢牛肝細胞（40×）Fig 2-5. Cultures of calf liver cells for 48hours (40 ×)圖 2-6. 培養(yǎng) 48 h 的犢牛肝細胞（200×）Fig 2-6. Cultures of calf liver cells for 48hours (200 ×)2.3.2 不同濃度油酸鈉對犢牛肝細胞細胞活性的影響


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