KISS1（蛋白為Kisspeptin）及其G蛋白偶聯(lián)受體54系統(tǒng)（G Protin-coupled Receptor 54,GPR54）通過下丘腦-垂體-性腺軸對(duì)動(dòng)物繁殖的重要調(diào)控作用。我們前期研究表明,KISS1基因作為免疫去勢(shì)的新靶標(biāo)免疫公羔后能夠顯著降低睪酮含量和阻滯睪丸發(fā)育,然而,仍不清楚其機(jī)制。激素類免疫主要通過抗體中和作用進(jìn)而影響下丘腦-垂體中樞軸這個(gè)內(nèi)分泌途徑發(fā)揮作用。然而,KISS1在睪丸組織表達(dá)量較其它組織高,睪丸組織間質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生和分泌的睪酮對(duì)睪丸發(fā)育發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。因此,KISS1基因免疫除了通過內(nèi)分泌途徑發(fā)揮作用外,能否通過睪丸間質(zhì)細(xì)胞自分泌途徑達(dá)到去勢(shì)的目的尚不明晰。本研究以大足黑山羊?yàn)檠芯繉?duì)象,利用免疫組化、定量PCR、Western Blotting和酶免測(cè)定等技術(shù),分析KISS1/GPR54在山羊睪丸間質(zhì)細(xì)胞的表達(dá),進(jìn)一步分析Kisspeptin過表達(dá)處理對(duì)睪丸間質(zhì)細(xì)胞Kisspeptin自分泌及功能的影響,闡明KISS基因免疫通過間質(zhì)細(xì)胞自分泌途徑去勢(shì)的機(jī)制。本研究有望進(jìn)一步提高KISS1基因疫苗免疫去勢(shì)的效果,為激素免疫調(diào)控技術(shù)在動(dòng)物上的廣泛應(yīng)... 

【文章來源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮略詞一覽表
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 kiss/gpr54研究進(jìn)展
        1.1.1 kiss1簡(jiǎn)介
        1.1.2 gpr54簡(jiǎn)介
    1.2 kiss1/gpr54系統(tǒng)與生殖功能的關(guān)系
        1.2.1 kiss1/gpr54系統(tǒng)調(diào)控青春期的起始
        1.2.2 kiss1/gpr54系統(tǒng)刺激促性腺激素的釋放
    1.3 影響kiss1/gpr54表達(dá)的因素
        1.3.1 性腺類固醇激素對(duì)kiss1基因表達(dá)的影響
        1.3.2 季節(jié)變化對(duì)kiss1、gpr54表達(dá)的影響
        1.3.3 營(yíng)養(yǎng)水平對(duì)kiss1、gpr54表達(dá)的影響
    1.4 睪丸間質(zhì)細(xì)胞
        1.4.1 睪丸間質(zhì)細(xì)胞形態(tài)
        1.4.2 睪丸間質(zhì)細(xì)胞功能
        1.4.3 睪丸間質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育的調(diào)控
    1.5 免疫去勢(shì)
        1.5.1 免疫去勢(shì)簡(jiǎn)介
        1.5.2 免疫去勢(shì)機(jī)制的研究
        1.5.3 免疫去勢(shì)的應(yīng)用
        1.5.4 免疫去勢(shì)存在的問題
    1.6 研究目的和意義
2 引言
3 材料與方法
    3.1 材料
        3.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
        3.1.2 主要儀器設(shè)備
        3.1.3 主要試劑
        3.1.4 溶液配制
    3.2 試驗(yàn)方法
        3.2.1 山羊各組織kiss1及gpr54基因定量pcr
        3.2.2 免疫組化檢測(cè)kisspeptin及gpr54在睪丸組織中表達(dá)
        3.2.3 山羊睪丸間質(zhì)細(xì)胞的分離培養(yǎng)
        3.2.4 rt-pcr檢測(cè)kiss1和gpr54基因在睪丸間質(zhì)細(xì)胞中的表達(dá)
        3.2.5 western blotting檢測(cè)kiss1和gpr54基因及蛋白在間質(zhì)細(xì)胞的表達(dá)
        3.2.6 kisspeptin過表達(dá)處理睪丸間質(zhì)細(xì)胞
        3.2.7 qrt-pcr檢測(cè)kisspeptin過表達(dá)處理對(duì)睪丸間質(zhì)細(xì)胞kiss1和gpr54的mrna表達(dá)的影響
        3.2.8 elisa檢測(cè)kisspeptin過表達(dá)處理對(duì)睪丸間質(zhì)細(xì)胞睪酮分泌的影響
    3.3 數(shù)據(jù)分析
4 結(jié)果與分析
    4.1 kiss1及gpr54基因在山羊不同組織的表達(dá)變化
    4.2 kisspeptin和gpr54蛋白在山羊睪丸組織的表達(dá)
    4.3 睪丸間質(zhì)細(xì)胞中kiss1和gpr54表達(dá)情況
        4.3.1 山羊睪丸間質(zhì)細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察
        4.3.2 睪丸間質(zhì)細(xì)胞總rna提取純度檢測(cè)
        4.3.3 kiss1及gpr54基因在山羊睪丸間質(zhì)細(xì)胞的表達(dá)
        4.3.4 kisspeptin及gpr54蛋白在山羊睪丸間質(zhì)細(xì)胞中的表達(dá)
    4.4 kisspeptin不同濃度處理對(duì)間質(zhì)細(xì)胞睪酮分泌的影響
    4.5 kisspeptin處理對(duì)間質(zhì)細(xì)胞kiss1合成和gpr54表達(dá)的影響
    4.6 kisspeptin處理對(duì)間質(zhì)細(xì)胞睪酮分泌的影響
5 討論
    5.1 山羊不同組織中kiss1及gpr54的表達(dá)差異
    5.2 kiss1及gpr54在睪丸間質(zhì)細(xì)胞的合成及kisspeptin的分泌
    5.3 kisspeptin54過表達(dá)處理對(duì)山羊睪丸間質(zhì)細(xì)胞kisspeptin自分泌的影響
    5.4 kisspeptin54過表達(dá)處理對(duì)山羊睪丸間質(zhì)細(xì)胞睪酮分泌的影響
    5.5 kiss1/gpr54在睪丸間質(zhì)細(xì)胞的自分泌對(duì)kiss1免疫去勢(shì)機(jī)制研究的影響
6 結(jié)論
    6.1 全文主要結(jié)果
    6.2 創(chuàng)新性結(jié)論
    6.3 進(jìn)一步研究建議
參考文獻(xiàn)
致謝
參加課題及發(fā)表論文情況


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞中促性腺激素釋放激素激動(dòng)劑調(diào)控睪酮合成的機(jī)制[J]. 柳海燕,陶曉倩,時(shí)姍姍,張艷梅,盧坤剛,韓雪峰,崔英霞,戈一峰,黃宇烽,李曉軍,姚兵.  南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2009(10)
[2]KISS-1/GPR54基因及其在生殖中的作用[J]. 馮濤,儲(chǔ)明星,張英杰.  遺傳. 2008(04)

博士論文
[1]KISS1基因免疫去勢(shì)效果及機(jī)制的研究[D]. 韓燕國(guó).華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015



本文編號(hào)：3443315