乳酸菌是人和動(dòng)物腸道內(nèi)的主要益生菌,是公認(rèn)的安全級(jí)（GRAS）微生物,其不僅具有維持正常腸道功能的重要益生作用,而且具有十分重要的免疫調(diào)節(jié)功能。憑借其天然優(yōu)勢(shì),乳酸菌成為黏膜疫苗遞送載體的最佳候選者之一。乳酸菌黏膜疫苗遞送策略因其可以直接向樹(shù)狀突細(xì)胞（DC）遞呈抗原而成為最有效的黏膜免疫遞送方式。本研究克隆4種表面蛋白錨定結(jié)構(gòu)域的基因字列,經(jīng)篩選確立了以Slap和AcmA為錨定結(jié)構(gòu)域的嗜酸乳桿菌表面錨定展示方法,并分別將原核表達(dá)和真核表達(dá)的禽流感病毒（AIV） H5N1亞型的血凝素HA1蛋白穩(wěn)定錨定展示到了嗜酸乳桿菌的細(xì)胞壁表面。本研究首先克隆了4種不同的表面蛋白錨定結(jié)構(gòu)域（AcmA、Slap、PuP、Mub）基因,分別將其連接到綠色熒光報(bào)告蛋白（EGFP）的C-末端進(jìn)行融合原核表達(dá),將含有4種錨定結(jié)構(gòu)域的EGFP融合蛋白（EGFP-AcmA、 EGFP-Slap、EGFP-PrtP、EGFP-Mub）和不含有錨定結(jié)構(gòu)域的EGFP蛋白的細(xì)胞裂解上清與經(jīng)不同方式處理的嗜酸乳桿菌混合孵育,經(jīng)反復(fù)洗劑,用熒光顯微鏡觀察菌體,結(jié)果顯示只有融合蛋白EGFP-AcmA和EGFP-Slap可高效穩(wěn)定... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁(yè)數(shù)】：55 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

乳酸菌黏膜疫苗誘導(dǎo)黏膜免疫應(yīng)答的過(guò)程(JeiryM.Wells,2008)

新型非遺傳修飾革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌的表面展示外源蛋白的方法(MaartenL.van，2005)

細(xì)胞裂解上清SAS-FAGS分析


本文編號(hào)：3438898