大腸桿菌（Escherichia coli, E.coli）是一類在自然界中存在范圍廣,血清型復雜,致病性多樣的重要的人畜共患病原菌。根據遺傳和致病特點,可將大腸桿菌分為以下3種類群：共生菌群,致腹瀉型菌群和腸外致病性菌群。腸外致病性大腸桿菌（Extraintestinal Pathogenic Escherichia coli, ExPEC）是指一群能在腸道中定殖不引起腹瀉但能引起腸外組織感染的一類大腸桿菌。ExPEC因其特異性的毒力因子而引起人和動物特定的疾病,包括：人新生兒腦膜炎,泌尿道感染,豬的肺炎、腎炎、腦膜炎、敗血癥等,禽的氣囊炎、滑膜炎、腹膜炎、敗血癥等。鐵是大腸桿菌生存必需的一種重要的營養(yǎng)元素,許多代謝活動都需要鐵的參與。血紅素（heme）是大腸桿菌主要的鐵源之一,heme的攝取能力直接關系到大腸桿菌在宿主體內生存代謝的能力。由heme載體介導的heme攝取途徑是heme的一種重要吸收方式,hmuU基因和hmuV基因是參與該途徑的重要基因,而通過比較本實驗室已經測序的5株豬源腸外致病性大腸桿菌強弱毒株間heme攝取系統(tǒng)的差異基因發(fā)現hmuU基因和hmuV基因在強弱毒株間... 

【文章來源】：華中農業(yè)大學湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數】：48 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
目錄
摘要
Abstract
縮略詞（Abbreviation)
1 文獻綜述
    1.1 大腸桿菌概述
    1.2 腸外致病性大腸桿菌的研究進展
        1.2.1 腸外致病性大腸桿菌的毒力因子
        1.2.2 腸外致病性大腸桿菌的耐藥性
        1.2.3 腸外致病性大腸桿菌的流行病學
        1.2.4 腸外致病性大腸桿菌病的防控與治療
    1.3 大腸桿菌鐵攝取機制
        1.3.1 轉鐵蛋白或乳鐵蛋白
        1.3.2 鐵載體
        1.3.3 血紅素
2 研究的目的與意義
3 材料與方法
    3.1 材料
        3.1.1 菌株、細胞與質粒
        3.1.2 酶和相關試劑
        3.1.3 試驗動物
        3.1.4 PCR引物
    3.2 方法
        3.2.1 培養(yǎng)基和試劑的配制
        3.2.2 細菌培養(yǎng)和分子生物學基本操作方法
        3.2.3 重組質粒pRE△hmuU、pRE△hmuV與pRE△hmu的構建與鑒定
        3.2.4 腸外致病性大腸桿菌PCN033株基因缺失突變株△hmuU、△hmuV和AhmuU/AhmuV的構建與鑒定
        3.2.5 基因缺失突變株AhmuU、△hmuV和△hmuU/△hmuV的生物學特性研究
        3.2.6 基因缺失突變株AhmuU、△hmuV和△hmuU/AhmuV的細胞抗吞噬能力及細胞粘附與侵入能力試驗
        3.2.7 基因缺失突變株△hmuU、△hmuV和△hmuU/△hmuV的小鼠感染試驗
4 結果與分析
    4.1 重組質粒pRE△hmuU、pRE△hmuV與pRE△hmu的構建與鑒定
        4.1.1 目的基因的克隆
        4.1.2 中間轉移質粒pSK△hmuU、pSK△hmuV和pSK△hmu的構建與鑒定
        4.1.3 重組質粒pRE△hmuU、pRE△hmuV與pRE△hmu的構建與鑒定
    4.2 基因缺失突變株△hmuU、AhmuV和△hmuU/△hmuV的構建與鑒定
        4.2.1 單基因缺失突變株△hmuU和△hmuV的構建與鑒定
        4.2.2 雙基因缺失突變株△hmuU/△hmuV的構建與鑒定
    4.3 基因缺失突變株△hmuU、△hmuV和△hmuU/△hmuV的生物學特性研究
        4.3.1 基因缺失突變株△hmuU、△hmuV和△hmuU/△hmuV的遺傳穩(wěn)定性
        4.3.2 基因缺失突變株△hmuU、△hmuV和△hmuU/△hmuV的生長特性
    4.4 基因缺失突變株△hmuU、△hmuV和△hmuU/△hmuV細胞抗吞噬能力及細胞粘附與侵入能力試驗
        4.4.1 基因缺失突變株△hmuU、△hmuV和△hmuU/△hmuV抗吞噬能力的比較
        4.4.2 基因缺失突變株△hmuU、△hmuV和△hmuU/△hmuV細胞粘附與侵入能力的比較
    4.5 基因缺失突變株△hmuU、△hmuV和△hmuU/△hmuV小鼠感染試驗
        4.5.1 基因缺失突變株△hmuU、△hmuV和△hmuU/△hmuV的小鼠毒力試驗
        4.5.2 攻毒后急性期死亡小鼠組織載菌量比較
5 討論
6 結論
參考文獻
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]腸外致病性大腸埃希菌多重耐藥性及氨基糖苷類耐藥基因分析[J]. 張璇,湯細彪,吳斌,陳石,夏欣,滿曉營,陳煥春.  中國抗生素雜志. 2009(08)



本文編號：3432429