發(fā)布時(shí)間：2021-10-10 16:45

　　氨基糖苷類抗生素衍生自各種鏈霉菌屬和小單孢菌屬,也有部分半合成產(chǎn)品,是一種高效的廣譜抗生素,廣泛應(yīng)用于我國畜牧業(yè)、農(nóng)業(yè)和水產(chǎn)業(yè)中,可引起耳毒性和腎毒性。地昔尼爾是一種較新型的昆蟲生長調(diào)節(jié)劑,對大鼠有氧化應(yīng)激和致癌作用。飼料產(chǎn)品質(zhì)量安全直接關(guān)系到動(dòng)物性食品安全,為了有效監(jiān)控氨基糖苷類抗生素和地昔尼爾,有必要建立飼料中氨基糖苷類抗生素及地昔尼爾的監(jiān)控技術(shù)。本研究以鏈霉素、雙氫鏈霉素、卡那霉素、新霉素、妥布霉素、安普霉素、慶大霉素、潮霉素B、丁胺卡那霉素和壯觀霉素為對象,研究并建立了飼料中10種常見氨基糖苷類抗生素的超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（UPLC-MS/MS）檢測方法。采用10 mM磷酸二氫鉀（含0.04 mM乙二胺四乙酸二鈉,2%三氯乙酸）作為提取液,酶探針超聲提取,離心后取一定量上清液直接過PCX柱凈化,另取經(jīng)氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH=7.5±0.1的上清液過WCX柱凈化,洗脫液氮吹至低于1 mL,加入10μL七氟丁酸（HFBA）后用純水定容至1 mL,UPLC-MS/MS進(jìn)行檢測。采用C8色譜柱,流動(dòng)相為0.1%甲酸（含0.5 mM乙酸銨）-乙腈,梯度洗脫。經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證,方法的檢出限為5... 

【文章來源】：煙臺(tái)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

空白飼料樣品色譜圖（A）及添加飼料樣品色譜圖（B，1mg/kg）

本研究首先考察了試驗(yàn)室常用的 C18 色譜柱 Phenomenex LC Column250 mm 4.6 mm，5 μm），流動(dòng)相選擇試驗(yàn)室常用的乙腈/甲酸水，結(jié)由于地昔尼爾的強(qiáng)極性，其在普通的 C18 色譜柱上難以保留，出峰時(shí) min 以內(nèi)，調(diào)整流動(dòng)相組成及比例對地昔尼爾出峰時(shí)間基本沒有影響拖尾嚴(yán)重，如圖 3-3。查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，高麗麗[73]等使用 NH2柱建立了色譜法測定地昔尼爾，因此，實(shí)驗(yàn)選擇 Agilent ZORBAX NH2色譜柱（ 4.6 mm，5 μm）和 Hypersil NH2色譜柱（250 mm 4.6 mm，5 μm）對地昔尼爾的分離效果，流動(dòng)相選擇乙腈/0.1%甲酸水（98:2，v/v），。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，地昔尼爾純品在兩種 NH2柱上的保留效果均較好，但后果表明，Hypersil NH2色譜柱不適用于飼料中地昔尼爾的測定。相比其在 ZORBAX NH2色譜柱上保留較好，峰型對稱且尖銳，如圖 3-4，究選擇 ZORBAX NH2柱（250 mm 4.6 mm，5 μm）用于地昔尼爾的。

圖 3-4 地昔尼爾(1 mg/L )在 NH2色譜柱保留色譜圖Fig. 3-4 Retained the chromatogram on the NH2column of dicyclanil (1 mg/L )2 前處理的優(yōu)化吳海霞等[68]建立的高效液相色譜法測動(dòng)物性食品中地昔尼爾采用乙腈作劑。飼料中藥物的提取多用甲醇和乙腈，由于飼料中含有大量的蛋白質(zhì)到乙腈有較好的沉淀蛋白質(zhì)的效果，因此該實(shí)驗(yàn)最終選擇乙腈作為提取飼料基質(zhì)較為復(fù)雜，添加有大量的蛋白質(zhì)、氨基酸、礦物質(zhì)、維生素等因此樣品的凈化在檢測過程中顯得尤為重要，凈化方法主要有固相萃取超臨界流體萃取兩種[96]。方忠意等[86]和吳海霞等[68]在樣品凈化過程中分 MCX 固相萃取柱和 HLB 固相萃取柱。實(shí)驗(yàn)過程中比較了 C18、堿性氧中性氧化鋁、Oasis HLB、Oasis PRiME HLB 等五種不同類型的固相萃取

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定飼料中的二氫吡啶[J]. 肖志明,王峻,索德成,魏書林,賈錚,劉成新,樊霞.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2018(09)
[2]親水性O(shè)belisc R液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定豬肉樣品中氨基糖苷類藥物殘留[J]. 趙鳳娟,方恩華,韓瑞陽,彭毅候,羅耀,熊貝貝,蔡伊娜,李麗蘇.  質(zhì)譜學(xué)報(bào). 2018(01)
[3]新時(shí)代畜牧飼料業(yè)發(fā)展的新趨勢[J]. 閆奎友.  中國飼料. 2017(24)
[4]UPLC-MS/MS方法同時(shí)檢測豬肉中67種禁限用藥物殘留[J]. 劉洪斌,李穎,李艷華,雷春娟,姜艷彬,蔡英華.  農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量與安全. 2017(05)
[5]國內(nèi)飼料行業(yè)發(fā)展現(xiàn)狀分析[J]. 衣曉巖.  山東畜牧獸醫(yī). 2017(08)
[6]HPLC-MS/MS法測定飼料中硫酸新霉素的含量[J]. 張靜,趙立軍,李云.  飼料研究. 2017(11)
[7]分子印跡固相萃取LC-MS/MS法同時(shí)測定蜂蜜中11種氨基糖苷類抗生素[J]. 楊碧霞,王煉,駱春迎,王希希,孫成均.  現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué). 2017(07)
[8]食品中氨基糖苷類殘留前處理及分析方法研究進(jìn)展[J]. 張?jiān)?周昱,周偉娥,李紹輝,鄭陽,張峰.  食品工業(yè). 2016(04)
[9]液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測定牛奶和奶粉中5種非蛋白含氮化合物[J]. 侯建波,謝文,李杰,陸順,祝澤龍,姚濱濱.  質(zhì)譜學(xué)報(bào). 2016(04)
[10]超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法檢測雞蛋中殘留的氨基糖苷類藥物[J]. 徐麗佳,劉笑,張秀芹,劉敬先,苗翠.  藥物分析雜志. 2016(02)

博士論文
[1]氨基糖苷類藥物殘留檢測篩選和確證方法的研究[D]. 徐飛.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[2]液相色譜—電化學(xué)法測定氨基糖苷類抗生素藥物分析方法的研究[D]. 習(xí)玲玲.浙江大學(xué) 2008

碩士論文
[1]氨基糖苷類抗生素特異性單鏈DNA適配體的篩選及其應(yīng)用研究[D]. 韓旭艷.江南大學(xué) 2018
[2]動(dòng)物性食品中三聚氰胺、地昔尼爾、環(huán)丙氨嗪檢測方法的研究[D]. 張紹偉.北京農(nóng)學(xué)院 2018
[3]水產(chǎn)品及漁用飼料中11種氨基糖苷類藥物超高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜檢測方法的建立及應(yīng)用[D]. 黃原飛.上海海洋大學(xué) 2018
[4]含乳食品接觸材料中塑化劑的檢測及遷移規(guī)律研究[D]. 杜珍妮.武漢輕工大學(xué) 2016
[5]地昔尼爾乳劑的初步研究[D]. 劉鑫瑩.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[6]高效液相色譜柱前衍生測定及研究幾種氨基糖苷類抗生素的藥代動(dòng)力學(xué)[D]. 常曉娟.西南大學(xué) 2010



本文編號(hào)：3428764