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檢測牛傳染性胸膜肺炎血清抗體間接ELISA方法的建立及初步應(yīng)用

發(fā)布時間:2021-10-08 14:14
  絲狀支原體絲狀亞種(Mycoplasma mycoides subsp Mycoides,Mmm)作為牛傳染性胸膜肺炎(Contagious Bovine Pleuropneumonia,CBPP)的病原,具有極高傳染力。感染牛主要表現(xiàn)為體溫升高呈稽留熱,呼吸困難等癥狀,曾給我國造成巨大經(jīng)濟損失。我國雖已消滅CBPP,但該病還在周邊國家流行.根據(jù)OIE要求,我國每年進行全國范圍的血清學(xué)監(jiān)測。競爭性酶聯(lián)免疫吸附試驗(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay,ELISA,ciELISA)是全球唯一的檢測CBPP商品化試劑盒。因檢測樣本量大,商品試劑盒昂貴且完全依賴進口,這些因素阻礙了我國對CBPP的防控。因此,研制國產(chǎn)CBPP血清抗體試劑盒具有重大意義。在本研究中根據(jù)Mmm的基因組序列利用生物信息學(xué)軟件對進其行了對比分析,選定5種膜相關(guān)脂質(zhì)蛋白即P35、P42、P46、P47、P50。利用原核表達系統(tǒng)表達這五種蛋白并純化,然后對其特異性與反應(yīng)原性進行研究。特異性研究顯示重組蛋白P35(rP35)蛋白能明顯區(qū)分CBPP陽性血清與牛支原體、牛鼻支原體、牛無乳支原體的陽... 

【文章來源】:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】:45 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

檢測牛傳染性胸膜肺炎血清抗體間接ELISA方法的建立及初步應(yīng)用


584的PCR擴增

重組質(zhì)粒,質(zhì)粒,條帶


圖 1.10584 的 PCR 擴增 Negative control; 2 and 3: Th.1.1 The PCR amplication of584 雙酶切鑒定-32a 中構(gòu)建重組質(zhì)粒,條帶,表明重組質(zhì)粒構(gòu)

誘導(dǎo)菌,冰浴,部分和


rP35可溶性表達鑒定

【參考文獻】:
期刊論文
[1]綿羊肺炎支原體P130蛋白主要抗原域原核表達及其間接ELISA檢測方法的建立[J]. 王旭,張曉宇,張建華,黃海碧,王曉暉,史曉娜,郝永清.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2018(03)
[2]牛傳染性胸膜肺炎的預(yù)防[J]. 米寶元.  中國畜牧獸醫(yī)文摘. 2017(06)
[3]淺述牛傳染性胸膜肺炎的防治措施[J]. 楊東生.  現(xiàn)代畜牧科技. 2016(06)
[4]牛傳染性胸膜肺炎的防治體會[J]. 吳學(xué)能,康蓮.  中獸醫(yī)學(xué)雜志. 2014(06)
[5]牛支原體免疫相關(guān)性蛋白硫鋅酰胺脫氫酶的篩選與鑒定[J]. 孫文靜,李媛,宋志強,鄒曉輝,劉洋,陳維,周玉梅,張秀英,辛九慶.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2012(10)
[6]以重組PvpA蛋白作為抗原的雞毒支原體抗體間接ELISA檢測方法的建立[J]. 周云雷,李健,魏飛龍,張小華,蔣紅霞.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2011(09)
[7]應(yīng)用重組抗原建立檢測牛傳染性胸膜肺炎的間接ELISA方法[J]. 辛九慶,高玉龍,李媛,王硯范,錢愛東.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2006(01)
[8]我國部分省區(qū)牛傳染性胸膜肺炎流行病學(xué)調(diào)查[J]. 辛九慶,李媛,高玉龍,王硯范.  畜牧獸醫(yī)科技信息. 2005(09)

博士論文
[1]牛傳染性胸膜肺炎診斷技術(shù)與分子流行病學(xué)研究[D]. 辛九慶.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007

碩士論文
[1]絲狀支原體絲狀亞種P19蛋白粘附特性的研究[D]. 周玉梅.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2014



本文編號:3424325

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