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禽流感和豬流感病毒的分離鑒定、遺傳進化分析和致病性研究

發(fā)布時間:2021-10-05 04:15
  為了解湖北地區(qū)禽流感(avian influenza,AI)和豬流感(swine influenza,SI)的流行情況,我們對2016年湖北地區(qū)養(yǎng)雞場、養(yǎng)豬場開展病原的分離鑒定。對分離到的流感病毒進行全基因組序列的測定及遺傳進化分析,并初步探究了豬流感病毒的生物學(xué)特性及其對小鼠的致病性。對中國豬流感的分布及遺傳進化、流行情況做了初步的統(tǒng)計分析,為有效防控流感的暴發(fā)提供理論依據(jù)。本研究的主要內(nèi)容如下:1、禽流感病毒的分離鑒定、基因組測序及遺傳進化分析從雞群中分離出2株禽流感病毒(avian influenza virus,AIV),對2株病毒用RT-PCR擴增基因組片段,病毒的HA、NA基因測序結(jié)果Blast分析發(fā)現(xiàn)2株病毒為H9N2亞型禽流感病毒。構(gòu)建了2株H9N2亞型禽流感病毒的HA、NA、PB2、PB1、PA、NP、M和NS基因的系統(tǒng)發(fā)育進化樹,發(fā)現(xiàn)HA和NA基因?qū)儆赮280譜系,PB1、PA、NP和NS基因?qū)儆赟HF98-like譜系,PB2和M基因?qū)儆贕1-like譜系。2株病毒的HA裂解位點均為-RSSR↓GLF-,具有低致病性流感病毒的分子特征。2株病毒在HA蛋白上比當(dāng)前流... 

【文章來源】:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:80 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

禽流感和豬流感病毒的分離鑒定、遺傳進化分析和致病性研究


流感病毒結(jié)構(gòu)模式圖(KrugandAramini2009)

禽流感病毒,全基因組,PCR擴增


腔分泌物增加、眼結(jié)膜充血、流淚。本研究中測序的 2 株禽流感表:表 3-1 2 株湖北地區(qū) AIV 分離株背景資料Table 3-1 Background of 2 AIV isolates isolated in Hubei 病毒命名 病毒亞型 宿主 分離地點 采樣A/Chicken/Hubei/32/2016 H9N2 雞 湖北 20A/Chicken/Hubei/115/2016 H9N2 雞 湖北 20 株禽流感病毒基因組片段重組質(zhì)粒的 PCR 鑒定禽流感病毒基因組片段克隆于 pMD18-T 載體上,對重組質(zhì)粒進R 產(chǎn)物在 1%瓊脂糖凝膠上電泳檢測,擴增出與預(yù)期相符病毒基因組icken/Hubei/115/2016 毒株的基因組片段重組質(zhì)粒跑膠鑒定,跑膠鑒

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禽流感和豬流感病毒的分離鑒定、遺傳進化分析和致病性研究出現(xiàn)歐亞禽系 H1N1 亞型 SIV 以來,歐亞禽系 H1N1 亞型 SIV 出現(xiàn)地越來越多,一年份分離的所有 SIV 中占據(jù)了較大的比例。2012 年及以后,豬流感毒株數(shù)量,這可能與豬流感的預(yù)防和控制有關(guān),也可能是因為近年來分離的豬流感病毒在數(shù)據(jù)庫公開。簡言之,歐亞禽系 H1N1 亞型 SIV 越來越成為 SIV 的重要組成。

【參考文獻】:
期刊論文
[1]利用假病毒技術(shù)篩選H5N1亞型禽流感病毒中和活性單克隆抗體[J]. 張卓,劉明,鄭世民.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2015(07)
[2]新甲型H1N1流感病毒小鼠致死模型的建立[J]. 朱云,劉麗琦,周劍芳,朱聞斐,秦堃,于在江,王大燕,趙翔,李希妍,藍雨,舒躍龍.  病毒學(xué)報. 2011(02)
[3]豬源H9N2亞型流感病毒的分離鑒定和遺傳進化分析[J]. 趙國,趙明軍,鹿欣倫,鐘蕾,劉曉文,劉秀梵.  中國動物傳染病學(xué)報. 2010(04)
[4]H5N1亞型禽流感病毒NS第263277位核苷酸缺失提高病毒對雞的致病力[J]. 龍進學(xué),薛峰,彭宜,顧敏,劉秀梵.  微生物學(xué)報. 2006(02)
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[7]禽流感病毒分子生物學(xué)研究進展[J]. 金元昌,李景鵬,張龍,孫岳,于敏,楊甲芳.  動物醫(yī)學(xué)進展. 2003(01)
[8]禽流感病毒核蛋白研究進展[J]. 朱建國,陸蘋.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2003(01)
[9]禽H9N2亞型流感病毒能感染人的發(fā)現(xiàn)[J]. 郭元吉,李建國,程小雯,王敏,鄒毅,李釧華,蔡訪潺,廖華樂,張燁,郭俊峰,黃瑞敏,貝東.  中華實驗和臨床病毒學(xué)雜志. 1999(02)
[10]禽流感A/雞/北京/1/96(H9N2)株核蛋白基因克隆和序列分析[J]. 陳福勇,夏春.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 1999(02)

碩士論文
[1]2013-2015年華東地區(qū)H9N2禽流感病毒的流行病學(xué)調(diào)查及單克隆抗體的研制[D]. 鞠勇.揚州大學(xué) 2016
[2]H9N2亞型禽流感病毒的分離及其HA基因的遺傳變異分析[D]. 任義品.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2014
[3]H7亞型和H10亞型禽流感病毒的遺傳進化分析及鴨坦布蘇病毒的生物學(xué)特性研究[D]. 張月娥.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2013
[4]神經(jīng)氨酸酶莖部氨基酸缺失對H5N1亞型禽流感病毒生物學(xué)特性的影響[D]. 王曲直.揚州大學(xué) 2006



本文編號:3418980

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