豬鼻支原體（Mycoplasma hyorhinis,Mhr）和豬肺炎支原體（Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp）是引起豬支原體肺炎的重要病原體,能與多種病原體及環(huán)境因素協(xié)同作用,引起豬呼吸道疾病綜合征（Porcine respiratory disease complex,PRDC）,導(dǎo)致病死率升高,給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。由Mhr和Mhp感染引起的疾病診斷,一般通過該病的流行特點(diǎn)、臨床癥狀和剖檢病理作出初診,確診需進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢查。鑒于對(duì)Mhr與Mhp感染引起的疾病尚未研制出有效的鑒別診斷技術(shù),此外兩種病原感染豬后導(dǎo)致的致病性差異也未見比較性研究。本研究旨在建立一種能夠鑒別這兩種病原體的實(shí)驗(yàn)室診斷方法,同時(shí)對(duì)其致病性差異進(jìn)行比較研究,為有效防控這兩種病原引起的疾病提供技術(shù)手段。第一、以Mhr全菌體作為免疫原,采用雜交瘤技術(shù)獲得了1株能穩(wěn)定分泌抗Mhr菌體的特異性單克隆抗體（mAb）1C4,腹水經(jīng)親和層析純化后標(biāo)記辣根過氧化物酶（HRP）,建立了一種能夠檢測(cè)Mhr抗原的ELISA方法,該方法批內(nèi)、批間變異系數(shù)均小于6%,抗原最低檢出量為25 ng。第二、P37蛋... 

【文章來源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

對(duì)純化的腹水進(jìn)行SDS-PAGE分析

mAb-1C4的Westernblot特異性鑒定

t批間重復(fù)試驗(yàn)Interbatchexperiment平均數(shù)X±SD變異系數(shù)CV（%）平均數(shù)X±SD變異系數(shù)CV（%）32003.306±0.0651.9533.229±0.0702.16816002.941±0.0481.6192.822±0.1033.65700.511.522.533.5320016008004002001005025OD405nmValueTheconcentrationofMhr（ng）Mhr-DLMhp-JLPCV2Mocky=0.0095e1.7389xR2=0.98760.0000.5001.0001.5002.0002.5003.0003.5004.0004.5000.0001.0002.0003.0004.000OD405nmValueThelogarithmofMhrconcentration（ng）圖2-4ELISA敏感性試驗(yàn)結(jié)果Fig.2-4TheresultsofELISAsensitivitytest圖2-3ELISA特異性試驗(yàn)結(jié)果Fig.2-3TheresultsofELISAspecificitytest

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]綿羊肺炎支原體TaqMan熒光定量PCR檢測(cè)方法的建立[J]. 林裕勝,江錦秀,張靖鵬,游偉,胡奇林.  中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2018(04)
[2]豬鼻支原體抗體間接ELISA檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用[J]. 陳冬杰,危艷武,張志慧,黃立平,吳洪麗,王一平,孫建慧,劉長(zhǎng)明.  中國(guó)獸醫(yī)科學(xué). 2014(11)
[3]巢式PCR檢測(cè)豬鼻支原體方法的建立及應(yīng)用[J]. 白方方,武昱孜,靳蒙蒙,劉茂軍,馮志新,熊祺琰,邵國(guó)青.  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2013(07)
[4]豬鼻支原體間接血凝及ELISA檢測(cè)方法的初步建立[J]. 王濤,趙滿麗,孫衛(wèi)東.  中國(guó)畜禽種業(yè). 2012(11)
[5]豬肺炎支原體和豬鼻支原體雙重PCR檢測(cè)方法的建立與應(yīng)用[J]. 劉茂軍,王占偉,韋艷娜,馬慶紅,楊莉莉,周勇岐,邵國(guó)青.  中國(guó)獸藥雜志. 2012(09)
[6]抗豬圓環(huán)病毒2型Cap蛋白中和性單克隆抗體的制備及鑒定[J]. 黃立平,劉長(zhǎng)明,危艷武,張朝霞,陸月華,郭龍軍.  中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2009(02)
[7]豬圓環(huán)病毒2型ELISA抗體檢測(cè)試劑盒的研制及應(yīng)用[J]. 張朝霞,劉長(zhǎng)明,危艷武,袁婧,黃立平.  中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2008(07)

博士論文
[1]豬肺炎支原體和豬鼻支原體的基因組測(cè)序與比較基因組學(xué)分析[D]. 劉威.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014

碩士論文
[1]豬圓環(huán)病毒2型與豬鼻支原體共感染協(xié)同致病性研究[D]. 陳冬杰.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2015



本文編號(hào)：3411970