不同日齡仔豬胃腸道Obestatin蛋白含量及GHRL基因轉(zhuǎn)錄水平測(cè)定
發(fā)布時(shí)間:2021-09-27 23:11
Obestatin是一種Ghrelin相關(guān)肽,來源于胃生長素前體肽(GHRL)基因。Obestatin的分子量為2516.3Da,有23個(gè)氨基酸殘基,位于GHRL的76-98多肽片段。Obestatin的氨基酸區(qū)域具有高度保守性,其生物活性依賴于C端的酞胺化修飾。Obestatin在鼠胃腸道、胰腺、睪丸間質(zhì)細(xì)胞、下丘腦、腦垂體等部位均有表達(dá),可以和(G-蛋白偶聯(lián)受體39)GPR39結(jié)合,能夠抑制動(dòng)物饑餓感、食物攝取、胃排空、空腸的蠕動(dòng)及體重的增加。此外,Obestatin還能夠抑制飲水、保護(hù)心肌細(xì)胞、調(diào)節(jié)胰島素抵抗、緩解焦慮、促進(jìn)睡眠、提高學(xué)習(xí)及空間記憶能力等。Obestatin與Ghrelin是由相同的基因、mRNA和相同的前體多肽衍生的,但兩者的生物學(xué)效應(yīng)表現(xiàn)出相互拮抗的作用,因此Obestatin稱認(rèn)為是Ghrelin的陰陽活性多肽或生物學(xué)拮抗劑。Obestatin的發(fā)現(xiàn)豐富了翻譯后修飾在基因表達(dá)調(diào)控過程中的作用,具有很重要的研究意義。Obestatin已經(jīng)被證明在能量穩(wěn)態(tài)和體質(zhì)量控制的復(fù)雜機(jī)制中起著很重要的生物學(xué)效應(yīng),而Obestatin在豬消化系統(tǒng)中的作用研究以及表達(dá)差異還很...
【文章來源】:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:56 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略詞表
第一部分 文獻(xiàn)綜述
1 Obestatin研究進(jìn)展
1.1 Obestatin的發(fā)現(xiàn)
1.2 Obestatin的生物學(xué)特征
1.3 Obestatin的受體
1.4 Obestatin的分布
1.5 Obestatin的生物學(xué)功能
1.5.1 Obestatin對(duì)消化系統(tǒng)的影響
1.5.2 Obestatin對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的影響
1.5.3 Obestatin對(duì)內(nèi)分泌系統(tǒng)的影響
1.5.4 Obestatin對(duì)細(xì)胞功能的影響
1.5.5 Obestatin與疾病
2 Obestatin的研究展望
第二部分 實(shí)驗(yàn)研究部分
1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.2 實(shí)驗(yàn)試劑及耗材
1.3 主要儀器設(shè)備
1.4 主要溶液及配制
1.4.1 ELISA實(shí)驗(yàn)試劑準(zhǔn)備
1.4.2 熒光定量實(shí)驗(yàn)試劑準(zhǔn)備
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 實(shí)驗(yàn)器具的準(zhǔn)備
2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的準(zhǔn)備
2.3 采取組織
2.4 ELISA實(shí)驗(yàn)
2.4.1 蛋白樣品制備
2.4.2 二辛可酸法(BCA)法測(cè)定總蛋白濃度
2.4.3 ELISA實(shí)驗(yàn)步驟
2.5 熒光定量
2.5.1 引物設(shè)計(jì)與合成
2.5.2 組織總RNA提取
2.5.3 反轉(zhuǎn)錄PCR
2.5.4 熒光定量PCR
2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果與分析
3.1 Obestatin蛋白表達(dá)濃度測(cè)定
3.1.1 BCA總蛋白濃度的測(cè)定
3.1.2 ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.2 相對(duì)熒光定量Q-PCR結(jié)果
3.2.1 組織總RNA提取效果
3.2.2 引物設(shè)計(jì)可靠性檢測(cè)
3.2.3 Q-PCR結(jié)果
4 討論
4.1 不同日齡仔豬胃腸道Obestatin濃度的比較
4.2 仔豬不同胃腸道組織Obestatin濃度的比較
4.3 不同日齡仔豬胃腸道GHRL mRNA表達(dá)水平的比較
4.4 仔豬不同胃腸道組織GHRL mRNA表達(dá)水平的比較
4.5 Obestatin蛋白與GHRL基因的表達(dá)分析
4.6 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選取以及實(shí)驗(yàn)技術(shù)
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
本文編號(hào):3410790
【文章來源】:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:56 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略詞表
第一部分 文獻(xiàn)綜述
1 Obestatin研究進(jìn)展
1.1 Obestatin的發(fā)現(xiàn)
1.2 Obestatin的生物學(xué)特征
1.3 Obestatin的受體
1.4 Obestatin的分布
1.5 Obestatin的生物學(xué)功能
1.5.1 Obestatin對(duì)消化系統(tǒng)的影響
1.5.2 Obestatin對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的影響
1.5.3 Obestatin對(duì)內(nèi)分泌系統(tǒng)的影響
1.5.4 Obestatin對(duì)細(xì)胞功能的影響
1.5.5 Obestatin與疾病
2 Obestatin的研究展望
第二部分 實(shí)驗(yàn)研究部分
1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.2 實(shí)驗(yàn)試劑及耗材
1.3 主要儀器設(shè)備
1.4 主要溶液及配制
1.4.1 ELISA實(shí)驗(yàn)試劑準(zhǔn)備
1.4.2 熒光定量實(shí)驗(yàn)試劑準(zhǔn)備
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 實(shí)驗(yàn)器具的準(zhǔn)備
2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的準(zhǔn)備
2.3 采取組織
2.4 ELISA實(shí)驗(yàn)
2.4.1 蛋白樣品制備
2.4.2 二辛可酸法(BCA)法測(cè)定總蛋白濃度
2.4.3 ELISA實(shí)驗(yàn)步驟
2.5 熒光定量
2.5.1 引物設(shè)計(jì)與合成
2.5.2 組織總RNA提取
2.5.3 反轉(zhuǎn)錄PCR
2.5.4 熒光定量PCR
2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果與分析
3.1 Obestatin蛋白表達(dá)濃度測(cè)定
3.1.1 BCA總蛋白濃度的測(cè)定
3.1.2 ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.2 相對(duì)熒光定量Q-PCR結(jié)果
3.2.1 組織總RNA提取效果
3.2.2 引物設(shè)計(jì)可靠性檢測(cè)
3.2.3 Q-PCR結(jié)果
4 討論
4.1 不同日齡仔豬胃腸道Obestatin濃度的比較
4.2 仔豬不同胃腸道組織Obestatin濃度的比較
4.3 不同日齡仔豬胃腸道GHRL mRNA表達(dá)水平的比較
4.4 仔豬不同胃腸道組織GHRL mRNA表達(dá)水平的比較
4.5 Obestatin蛋白與GHRL基因的表達(dá)分析
4.6 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選取以及實(shí)驗(yàn)技術(shù)
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
本文編號(hào):3410790
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