豬瘟是由豬瘟病毒（CSFV）引起的一種嚴重危害養(yǎng)豬業(yè)的烈性動物傳染病。天然免疫系統(tǒng)是機體抵抗病毒感染的第一道防線,其中干擾素（IFN）和干擾素刺激基因（ISGs）在宿主抗病毒防御過程中發(fā)揮著關鍵作用。豬瘟病毒（CSFV）感染宿主后,激活I型IFN信號通路,誘導其下游的ISGs轉錄表達,進而發(fā)揮抗CSFV作用。實驗室前期實驗篩選到豬源2’-5’寡腺苷酸合成酶樣蛋白（pOASL）為潛在的抗CSFV ISG分子,但其抗病毒分子機制尚不清楚。本研究旨在證實pOASL的抗CSFV活性,并解析其抑制CSFV復制的分子機制。我們構建了過表達pOASL的PK-15細胞系（PK-pOASL）和對照細胞系PK-EGFP,將CSFVShimen株感染過表達細胞系,從CSFV滴度、基因組拷貝數(shù)及非結構蛋白Npro表達水平三個方面評價CSFV的復制水平,結果表明過表達pOASL抑制CSFV復制;相反,利用siRNA下調PK-15細胞中的內源性OASL蛋白后,感染rCSFV-Fluc或CSFV-SM株,證實下調內源性OASL促進CSFV復制。過表達及下調pOASL試驗均證實pOASL是一種抗CSFV ISG分子。... 

【文章來源】：中國農業(yè)科學院北京市

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

干擾索信號轉導通路(改編自Scttneideretal.,2014)

２００９）。人源ＯＡＳＬ?（ｈＯＡＳＬ）發(fā)揮抗病毒作用依賴于其Ｃ末端泛素樣區(qū)域（與泛??素同源），而不依賴ＲＮａｓｅＬ系統(tǒng)。ｈＯＡＳＬ利用其泛素樣區(qū)域與ＲＩＧ－Ｉ相互作用，??進而激活Ｉ型ＩＦＮ信號發(fā)揮抗病毒效應（圖３）。例如，ｈＯＡＳＬ能夠抑制腦心肌炎??病毒（ＥＭＣＶ）的復制（Ｍａｒｑｕｅｓｅｔａｌ．，２００８）。然而豬源?ＯＡＳＬ?（ｐＯＡＳＬ）基因存??在一個提前終止密碼子，表達缺少Ｃ末端泛素樣區(qū)域的截短型ＯＡＳＬ蛋白。???ｍ???ｒ??ｎ－??＾?＾?＆?｜?ＲＩＧ－Ｉ?ｉｎａｃｔｉｖｅ??．，?ＲＮａｓｅ?Ｌ??ｉｎａｃｔｉｖｅ?１ＭＤＡ５?ＲＩＣ－Ｉ?ｈＯＡＳＬ??ＡＴＰ?２’－５’??ＲＮａＳｅ?Ｌ?Ｃ?ｌｅｗｅｄ??ｄｓＫＮＡ??ａｃｌｉ＇ｃ?．?ｉ??＾?ＩＲＦ７?ＩＲＦ３??Ｊｎ０ＡＳＬ，?Ｊ?１ＲＦ７??ＩＲＦ７ｍＫＮＡ?Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ??一匕￣；?「＂、??＞－Ｐ，ＲＦ７?．ＲＦ７?，ＫＫ３?）??ｌ，Ｙ＇?，Ｖ、?，Ｙ、??＾?＾?ｗ??ｙ?ｙ?、人?乂?、人?＞／?ｖ?ｖ??圖３?ＯＡＳ家族蛋白抗病毒通路（改編自Ｃｈｏｉ?ｅｔａｌ．

Ｆｉｇ．?４?Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ?ｏｆ?ｔｈｅ?ａｎｔｉ－ＣＳＦＶ?ＩＳＧｓ．?（Ｌｉ?ｅｔ?ａｌ．，?２０１６）??１．３研宄目的及意義??豬瘟嚴重危害我國養(yǎng)豬業(yè)，目前對豬瘟的防控以接種疫苗為主。先天免疫是宿??主防御病毒入侵的第一道防線，ＩＳＧｓ是［ＦＮ誘導宿主產生的發(fā)揮抗病毒作用的效應??分子，因此，研究宿主ＩＳＧｓ分子抗豬瘟病毒機制具有重要的現(xiàn)實意義和應用價值。??在前期篩選抗ＣＳＦＶ特異性ＩＳＧｓ分子研宄中，發(fā)現(xiàn)ｐＯＡＳＬ為潛在的抗ＣＳＦＶ??ＩＳＧｓ分子（Ｌｉｅｔａｌ．，２０１６）。本研究旨在鑒定ｐＯＡＳＬ的抗ＣＳＦＶ活性，并深入解??析ｐＯＡＳＬ抗ＣＳＦＶ的分子機制，為抗ＣＳＦＶ制劑的研發(fā)提供可能，為黃病毒科其??他成員的抗病毒ＩＳＧｓ研究提供參考。此外，闡明ｐＯＡＳＬ的抗病毒機制，為豐富不??同物種ＯＡＳＬ的抗病毒機制提供參考，因此，本研究既具有突出的科學意義，又具??有潛在的應用價值。??


本文編號：3408849