豬圓環(huán)病毒2型Cap蛋白基因重組腺病毒的構(gòu)建及實(shí)驗(yàn)免疫研究
發(fā)布時(shí)間:2021-09-19 13:20
豬圓環(huán)病毒2型(Porcine circovirus-2, PCV-2)是迄今發(fā)現(xiàn)的一種最小的致病性動(dòng)物病毒,是引起斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征(PMWS)的主要病原,此外還能夠引起豬的皮炎和腎病綜合征(PDNS)、增生性和壞死性肺炎、胎兒心肌炎、母豬繁殖障礙、腸炎、斷奶仔豬與育肥豬的呼吸道疾病以及仔豬先天性震顫(CT)等,這些疾病統(tǒng)稱為豬圓環(huán)病毒相關(guān)疾。≒CVAD)。該病目前已遍布各養(yǎng)豬國(guó)家,成為危害世界養(yǎng)豬業(yè)的重要疫病之一。衣殼蛋白是PCV-2主要的免疫原蛋白,是疫苗研發(fā)和PCV-2特異性血清學(xué)診斷的重要靶蛋白。本研究將編碼PCV-2Cap蛋白的ORF2克隆到腺病毒表達(dá)系統(tǒng)穿梭質(zhì)粒,構(gòu)建了重組穿梭質(zhì)粒pacAd5CMV-Cap,將被限制性內(nèi)切酶Pad線性化后的骨架質(zhì)粒和重組穿梭質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染HEK293AD細(xì)胞,兩者在真核細(xì)胞內(nèi)同源重組并包裝出攜帶PCV2-Cap基因的復(fù)制缺陷型重組人5型腺病毒,命名為rAd5-Cap;以同樣方法重組獲得了不含任何靶基因的野生型重組腺病毒wt-rAd5。病毒增殖穩(wěn)定后,]Ad5-Cap與wt-rAd5滴度可達(dá)到1085TCID50/mL左右;一步增殖實(shí)驗(yàn)...
【文章來(lái)源】:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省
【文章頁(yè)數(shù)】:63 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
第一章 豬圓環(huán)病毒2型研究進(jìn)展
1.1 PCV-2分子生物學(xué)
1.2 PCV-2流行病學(xué)
1.3 PCV-2感染相關(guān)疾病(PCVAD)
1.4 PCV-2診斷技術(shù)
1.5 PCV-2疫苗研究
第二章 腺病毒載體的研究進(jìn)展
2.1 腺病毒載體的種類及構(gòu)建策略
2.2 腺病毒載體的應(yīng)用
第三章 研究的目的和意義
第二篇 研究?jī)?nèi)容
第一章 PCV-2 Cap蛋白重組復(fù)制缺陷型人5型腺病毒的構(gòu)建
1.1 材料與方法
1.2 結(jié)果
1.3 討論
1.4 小結(jié)
第二章 重組腺病毒rAd5-Cap的生物學(xué)特性鑒定
2.1 材料與方法
2.2 結(jié)果
2.3 討論
2.4 小結(jié)
第三章 重組腺病毒rAd5-Cap的免疫原性分析
3.1 材料與方法
3.2 結(jié)果
3.3 討論
3.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]狂犬病病毒SRV9株糖蛋白333位氨基酸變異對(duì)其免疫原性的影響[J]. 孫程龍,楊洋,王穎,宮婷,劉祥義,陳奇,王景龍,劉曄,張守峰,扈榮良. 中國(guó)生物制品學(xué)雜志. 2012(05)
[2]狂犬病病毒糖蛋白重組人腺病毒的構(gòu)建及免疫效果的初步研究[J]. 王穎,張守峰,劉曄,張菲,張錦霞,扈榮良. 病毒學(xué)報(bào). 2011(05)
[3]我國(guó)部分地區(qū)豬圓環(huán)病毒2型分離株的遺傳變異分析[J]. 郭龍軍,陸月華,危艷武,黃立平,劉長(zhǎng)明. 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2009(11)
[4]豬圓環(huán)病毒感染診斷方法研究進(jìn)展[J]. 張琦,李書華,王淑杰,蔡雪輝. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2008(06)
[5]豬圓環(huán)病毒病實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 慕澤鑫,劉珊,張社民,高英杰,劉國(guó)文,趙建增,仝利劍. 中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2008(06)
[6]腺病毒表達(dá)載體研究進(jìn)展[J]. 丁長(zhǎng)根,劉惠莉. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2007(10)
[7]豬圓環(huán)病毒2型免疫過(guò)氧化物酶單層細(xì)胞試驗(yàn)抗體檢測(cè)試劑盒的研制及應(yīng)用[J]. 劉長(zhǎng)明,張超范,危艷武,張朝霞,袁婧. 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2007(08)
[8]第三代腺病毒載體的研究進(jìn)展[J]. 徐學(xué)武,俞衛(wèi)鋒. 生物技術(shù). 2005(03)
本文編號(hào):3401688
【文章來(lái)源】:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省
【文章頁(yè)數(shù)】:63 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
第一章 豬圓環(huán)病毒2型研究進(jìn)展
1.1 PCV-2分子生物學(xué)
1.2 PCV-2流行病學(xué)
1.3 PCV-2感染相關(guān)疾病(PCVAD)
1.4 PCV-2診斷技術(shù)
1.5 PCV-2疫苗研究
第二章 腺病毒載體的研究進(jìn)展
2.1 腺病毒載體的種類及構(gòu)建策略
2.2 腺病毒載體的應(yīng)用
第三章 研究的目的和意義
第二篇 研究?jī)?nèi)容
第一章 PCV-2 Cap蛋白重組復(fù)制缺陷型人5型腺病毒的構(gòu)建
1.1 材料與方法
1.2 結(jié)果
1.3 討論
1.4 小結(jié)
第二章 重組腺病毒rAd5-Cap的生物學(xué)特性鑒定
2.1 材料與方法
2.2 結(jié)果
2.3 討論
2.4 小結(jié)
第三章 重組腺病毒rAd5-Cap的免疫原性分析
3.1 材料與方法
3.2 結(jié)果
3.3 討論
3.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]狂犬病病毒SRV9株糖蛋白333位氨基酸變異對(duì)其免疫原性的影響[J]. 孫程龍,楊洋,王穎,宮婷,劉祥義,陳奇,王景龍,劉曄,張守峰,扈榮良. 中國(guó)生物制品學(xué)雜志. 2012(05)
[2]狂犬病病毒糖蛋白重組人腺病毒的構(gòu)建及免疫效果的初步研究[J]. 王穎,張守峰,劉曄,張菲,張錦霞,扈榮良. 病毒學(xué)報(bào). 2011(05)
[3]我國(guó)部分地區(qū)豬圓環(huán)病毒2型分離株的遺傳變異分析[J]. 郭龍軍,陸月華,危艷武,黃立平,劉長(zhǎng)明. 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2009(11)
[4]豬圓環(huán)病毒感染診斷方法研究進(jìn)展[J]. 張琦,李書華,王淑杰,蔡雪輝. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2008(06)
[5]豬圓環(huán)病毒病實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 慕澤鑫,劉珊,張社民,高英杰,劉國(guó)文,趙建增,仝利劍. 中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2008(06)
[6]腺病毒表達(dá)載體研究進(jìn)展[J]. 丁長(zhǎng)根,劉惠莉. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2007(10)
[7]豬圓環(huán)病毒2型免疫過(guò)氧化物酶單層細(xì)胞試驗(yàn)抗體檢測(cè)試劑盒的研制及應(yīng)用[J]. 劉長(zhǎng)明,張超范,危艷武,張朝霞,袁婧. 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2007(08)
[8]第三代腺病毒載體的研究進(jìn)展[J]. 徐學(xué)武,俞衛(wèi)鋒. 生物技術(shù). 2005(03)
本文編號(hào):3401688
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