發(fā)布時(shí)間：2021-09-18 12:50

　　本研究旨在體外分離培養(yǎng)兔胚胎干細(xì)胞，初步研究兔胚胎干細(xì)胞對(duì)軟組織創(chuàng)面是否具有促愈作用，為兔胚胎干細(xì)胞在創(chuàng)傷修復(fù)中的應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)；探討兔胚胎干細(xì)胞分泌物在體外對(duì)動(dòng)物機(jī)體創(chuàng)面的愈合作用；探討兔胚胎干細(xì)胞分泌物在不同種屬之間是否存在特異性以及對(duì)待不同的創(chuàng)傷是否有促進(jìn)愈合的作用，為兔胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)液在創(chuàng)傷修復(fù)中的應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。試驗(yàn)方法、結(jié)果和結(jié)論如下：1.兔胚胎干細(xì)胞的分離、傳代選擇自然發(fā)情母兔與公兔自然交配，配種后90h手術(shù)沖胚。對(duì)原代培養(yǎng)采取酶消化法，對(duì)細(xì)胞形態(tài)及變化進(jìn)行觀察，取生長(zhǎng)良好的兔胚胎干細(xì)胞接種在飼養(yǎng)層上，在38°C、5%CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。2.兔胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)液的提取當(dāng)ES細(xì)胞傳代穩(wěn)定，開(kāi)始使用胰酶消化傳代法，即:吸去培養(yǎng)液。此時(shí)把吸去的培養(yǎng)液收集起來(lái)裝入到離心管里進(jìn)行離心：4000rpm*5分鐘抽取上清液。將上清液-20°C凍起來(lái)3.構(gòu)建日本大耳白兔組織缺損創(chuàng)面模型4.構(gòu)建日本大耳白兔眼部組織創(chuàng)傷模型5.構(gòu)建日本大耳白兔燒傷模型6.構(gòu)建大鼠軟組織缺損創(chuàng)面模型通過(guò)實(shí)驗(yàn)得到如下結(jié)果：1、在日本大耳白兔組織缺損創(chuàng)面模型中，注射兔胚胎干細(xì)胞的右側(cè)傷口和沒(méi)有注射兔胚胎干細(xì)胞... 

【文章來(lái)源】：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)河南省

【文章頁(yè)數(shù)】：42 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

生長(zhǎng)在培養(yǎng)皿中的兔胚胎干細(xì)胞群Fig.1-1Growninapetridishofrabbitembryonicstemcells4.2注射胚胎干細(xì)胞對(duì)大白兔創(chuàng)傷的影響

圖 2-1 手術(shù)后創(chuàng)面愈合的大體觀察 A：實(shí)驗(yàn)組 A1：對(duì)照組Fig 2-1 after operation the microscopy observation of wound healing A:Experimental group A1:Control group圖 2-2 術(shù)后 3d 創(chuàng)面愈合的大體觀察 B:實(shí)驗(yàn)組 B1:對(duì)照組Fig 2-2 six days after operation the microscopy observation of wound B:Experimental group B1:Control groupB1B

觀察，如圖(2-3)，可以很明顯的看到注射兔胚胎干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)組兔子的傷口基本痊愈，只有一個(gè)顏色很淺的疤痕，而實(shí)驗(yàn)組的兔子傷口仍有一些小的傷口未完全長(zhǎng)好。圖 2-1 手術(shù)后創(chuàng)面愈合的大體觀察 A：實(shí)驗(yàn)組 A1：對(duì)照組Fig 2-1 after operation the microscopy observation of wound healing A:Experimental group A1:Control groupAA1


本文編號(hào)：3400169