let-7b過(guò)表達(dá)通過(guò)MAP3K1靶基因調(diào)節(jié)綿羊FGC的凋亡與增殖
發(fā)布時(shí)間:2021-09-05 19:25
MicroRNA(miRNA)在卵泡發(fā)育的每個(gè)階段中都有差異表達(dá)。許多miRNA介導(dǎo)生殖內(nèi)分泌功能,特別是卵母細(xì)胞成熟和卵泡形成過(guò)程,并通過(guò)其靶基因調(diào)節(jié)卵泡閉鎖,從而調(diào)節(jié)卵母細(xì)胞凋亡。影響綿羊綿羊卵泡顆粒細(xì)胞(Follicle Granulosa Cells,FGC)的凋亡的因素眾多,迄今為止,還不確定let-7家族是否通過(guò)MAP3K1介導(dǎo)FGC的凋亡。本研究旨在研究let-7b對(duì)FGC凋亡和發(fā)育作用及機(jī)理。收集原代綿羊FGC,分別用不同濃度胎牛血清(Fetal Bovine Serum,FBS)(0%、7%、10%、12%、15%、18%、20%),M199基礎(chǔ)培養(yǎng)基和DMEM培養(yǎng)基體外培養(yǎng)綿羊FGC,用CCK-8試劑盒檢測(cè)其對(duì)綿羊FGS增殖的影響,探究體外培養(yǎng)綿羊FGC的最適FBS濃度和最適基礎(chǔ)培養(yǎng)基;再用CCK-8試劑盒檢測(cè)探究不同濃度促卵泡激素(Follicle-Stimulating Hormone,FSH)(0、5、10、20、30、40 IU/mL)以及不同濃度褪黑素(Melatonin,MT)(0、5、10、20、30、40 ng/mL)對(duì)綿羊FGC體外增殖影響。用le...
【文章來(lái)源】:西北民族大學(xué)甘肅省
【文章頁(yè)數(shù)】:64 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
原代綿羊FGC培養(yǎng)M199培養(yǎng)液、12%胎牛血清培養(yǎng)24h后,400×;FGC貼壁生長(zhǎng),貼壁伸展不均,細(xì)胞呈三角形或梭形,立體感強(qiáng),,數(shù)量較少
西北民族大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院2020屆碩士研究生學(xué)位論文32圖2-2M199和DMED基礎(chǔ)培養(yǎng)基以及不同濃度的血清對(duì)FGC體外培養(yǎng)的影響與FBS-0M199組相比,*P<0.05,與FBS-0M199組相比,**P<0.01;與FBS-0DMEM組相比,#P<0.05,與FBS-0DMEM組相比,##P<0.01;Figure2-2EffectsofM199andDMEDbasicmediumanddifferentconcentrationsofserumoninvitrocultureoffolliculargranulecellsComparedwithFBS-0M199group,*P<0.05,comparedwithFBS-0M199group,**P<0.01;ComparedwithFBS-0DMEMgroup,#P<0.05,comparedwithFBS-0DMEMgroup,##P<0.01;FSH對(duì)FGC體外培養(yǎng)的生存率的影響圖2-3不同濃度FSH對(duì)FGC體外培養(yǎng)的影響Figure2-3EffectofdifferentconcentrationsofFSHoninvitrocultureoffolliculargranulecells對(duì)比培養(yǎng)液中含有不同濃度FSH以及不同時(shí)間對(duì)FGC的影響,24h后,隨著培養(yǎng)液中FSH的濃度升高,F(xiàn)GC的增殖活性增大,并在FSH-4時(shí)增值達(dá)到最2.3
西北民族大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院2020屆碩士研究生學(xué)位論文32圖2-2M199和DMED基礎(chǔ)培養(yǎng)基以及不同濃度的血清對(duì)FGC體外培養(yǎng)的影響與FBS-0M199組相比,*P<0.05,與FBS-0M199組相比,**P<0.01;與FBS-0DMEM組相比,#P<0.05,與FBS-0DMEM組相比,##P<0.01;Figure2-2EffectsofM199andDMEDbasicmediumanddifferentconcentrationsofserumoninvitrocultureoffolliculargranulecellsComparedwithFBS-0M199group,*P<0.05,comparedwithFBS-0M199group,**P<0.01;ComparedwithFBS-0DMEMgroup,#P<0.05,comparedwithFBS-0DMEMgroup,##P<0.01;FSH對(duì)FGC體外培養(yǎng)的生存率的影響圖2-3不同濃度FSH對(duì)FGC體外培養(yǎng)的影響Figure2-3EffectofdifferentconcentrationsofFSHoninvitrocultureoffolliculargranulecells對(duì)比培養(yǎng)液中含有不同濃度FSH以及不同時(shí)間對(duì)FGC的影響,24h后,隨著培養(yǎng)液中FSH的濃度升高,F(xiàn)GC的增殖活性增大,并在FSH-4時(shí)增值達(dá)到最2.3
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]褪黑素對(duì)HT-2毒素誘導(dǎo)的牛卵巢顆粒細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與自噬的影響[J]. 楊方曉,李蓮,趙若含,王根林. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2020(01)
[2]哺乳動(dòng)物卵巢卵泡發(fā)育調(diào)控機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 張焱,張華. 生理學(xué)報(bào). 2020(01)
[3]西藏綿羊顆粒細(xì)胞的體外培養(yǎng)[J]. 田孟芳,盧曉麗,程志鵬,任子利,孫磊,趙彥玲. 高原農(nóng)業(yè). 2019(05)
[4]卵泡發(fā)生與發(fā)育的調(diào)控[J]. 喬競(jìng)誼,徐軻,孫青原. 實(shí)用婦產(chǎn)科雜志. 2019(05)
[5]豬卵巢發(fā)育的組織學(xué)變化及卵泡閉鎖規(guī)律研究[J]. 梁學(xué)超,蔣明,羅玉茹,張為民,卿素珠. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2017(10)
[6]豬卵巢顆粒細(xì)胞分離培養(yǎng)及細(xì)胞生物學(xué)特性研究[J]. 閆益波,李文剛,焦福林,吳志娟,胡廣英,周勝花,隋朝,岳磊,任毅菲. 山西農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(06)
[7]哺乳動(dòng)物原始卵泡的形成和發(fā)育及影響因素[J]. 許蒙蒙,車龍,徐盛玉,吳德. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2015(01)
[8]哺乳動(dòng)物卵巢卵泡膜細(xì)胞功能的研究進(jìn)展[J]. 何琿,姜冬梅,康波,馬容. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2013(09)
[9]顆粒細(xì)胞對(duì)卵泡發(fā)育的影響[J]. 金艷梅. 中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2010(08)
[10]MicroRNA let-7與肺癌關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 任為正,葉鴻飛,趙健,姜安麗. 中國(guó)腫瘤生物治療雜志. 2009(04)
博士論文
[1]RBP-4通過(guò)miRNAs影響豬卵泡顆粒細(xì)胞增殖的研究[D]. 饒家輝.吉林大學(xué) 2019
[2]褪黑素在延緩昆明小鼠卵巢衰老中的作用研究[D]. 宋超.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2019
[3]褪黑素對(duì)豬卵泡發(fā)育與閉鎖的影響研究[D]. 賀亞媚.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2017
[4]FSH調(diào)控豬卵泡顆粒細(xì)胞自噬的分子機(jī)制研究[D]. 高暉.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[5]卵巢功能衰退的比較蛋白質(zhì)組學(xué)及相關(guān)蛋白差異表達(dá)的研究[D]. 張利群.吉林大學(xué) 2014
[6]褪黑素對(duì)豬腔前卵泡體外發(fā)育的影響及機(jī)制研究[D]. 蒲勇.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[7]MicroRNAs在始基卵泡募集過(guò)程中的表達(dá)模式和調(diào)控機(jī)制的研究[D]. 楊書(shū)紅.華中科技大學(xué) 2012
碩士論文
[1]E2與FSH對(duì)水牛卵泡顆粒細(xì)胞/內(nèi)膜細(xì)胞增殖和凋亡的影響[D]. 文冬梅.廣西大學(xué) 2019
[2]FRBI對(duì)卵巢及卵母細(xì)胞發(fā)育的作用和機(jī)理研究[D]. 賴露菊.西北民族大學(xué) 2019
[3]Wnt/β-catenin協(xié)同褪黑素、PI3K信號(hào)通路對(duì)豬卵巢顆粒細(xì)胞發(fā)育的影響[D]. 楊有福.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2018
[4]促卵泡刺激素通過(guò)調(diào)控顆粒細(xì)胞分泌干細(xì)胞因子促進(jìn)卵泡發(fā)育成熟的研究[D]. 鄭夢(mèng)雪.寧夏醫(yī)科大學(xué) 2017
[5]FSH及WNT信號(hào)通路對(duì)綿羊卵泡顆粒細(xì)胞功能的影響[D]. 趙妙妙.山西農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
本文編號(hào):3385942
【文章來(lái)源】:西北民族大學(xué)甘肅省
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【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
原代綿羊FGC培養(yǎng)M199培養(yǎng)液、12%胎牛血清培養(yǎng)24h后,400×;FGC貼壁生長(zhǎng),貼壁伸展不均,細(xì)胞呈三角形或梭形,立體感強(qiáng),,數(shù)量較少
西北民族大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院2020屆碩士研究生學(xué)位論文32圖2-2M199和DMED基礎(chǔ)培養(yǎng)基以及不同濃度的血清對(duì)FGC體外培養(yǎng)的影響與FBS-0M199組相比,*P<0.05,與FBS-0M199組相比,**P<0.01;與FBS-0DMEM組相比,#P<0.05,與FBS-0DMEM組相比,##P<0.01;Figure2-2EffectsofM199andDMEDbasicmediumanddifferentconcentrationsofserumoninvitrocultureoffolliculargranulecellsComparedwithFBS-0M199group,*P<0.05,comparedwithFBS-0M199group,**P<0.01;ComparedwithFBS-0DMEMgroup,#P<0.05,comparedwithFBS-0DMEMgroup,##P<0.01;FSH對(duì)FGC體外培養(yǎng)的生存率的影響圖2-3不同濃度FSH對(duì)FGC體外培養(yǎng)的影響Figure2-3EffectofdifferentconcentrationsofFSHoninvitrocultureoffolliculargranulecells對(duì)比培養(yǎng)液中含有不同濃度FSH以及不同時(shí)間對(duì)FGC的影響,24h后,隨著培養(yǎng)液中FSH的濃度升高,F(xiàn)GC的增殖活性增大,并在FSH-4時(shí)增值達(dá)到最2.3
西北民族大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院2020屆碩士研究生學(xué)位論文32圖2-2M199和DMED基礎(chǔ)培養(yǎng)基以及不同濃度的血清對(duì)FGC體外培養(yǎng)的影響與FBS-0M199組相比,*P<0.05,與FBS-0M199組相比,**P<0.01;與FBS-0DMEM組相比,#P<0.05,與FBS-0DMEM組相比,##P<0.01;Figure2-2EffectsofM199andDMEDbasicmediumanddifferentconcentrationsofserumoninvitrocultureoffolliculargranulecellsComparedwithFBS-0M199group,*P<0.05,comparedwithFBS-0M199group,**P<0.01;ComparedwithFBS-0DMEMgroup,#P<0.05,comparedwithFBS-0DMEMgroup,##P<0.01;FSH對(duì)FGC體外培養(yǎng)的生存率的影響圖2-3不同濃度FSH對(duì)FGC體外培養(yǎng)的影響Figure2-3EffectofdifferentconcentrationsofFSHoninvitrocultureoffolliculargranulecells對(duì)比培養(yǎng)液中含有不同濃度FSH以及不同時(shí)間對(duì)FGC的影響,24h后,隨著培養(yǎng)液中FSH的濃度升高,F(xiàn)GC的增殖活性增大,并在FSH-4時(shí)增值達(dá)到最2.3
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]褪黑素對(duì)HT-2毒素誘導(dǎo)的牛卵巢顆粒細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與自噬的影響[J]. 楊方曉,李蓮,趙若含,王根林. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2020(01)
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[4]卵泡發(fā)生與發(fā)育的調(diào)控[J]. 喬競(jìng)誼,徐軻,孫青原. 實(shí)用婦產(chǎn)科雜志. 2019(05)
[5]豬卵巢發(fā)育的組織學(xué)變化及卵泡閉鎖規(guī)律研究[J]. 梁學(xué)超,蔣明,羅玉茹,張為民,卿素珠. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2017(10)
[6]豬卵巢顆粒細(xì)胞分離培養(yǎng)及細(xì)胞生物學(xué)特性研究[J]. 閆益波,李文剛,焦福林,吳志娟,胡廣英,周勝花,隋朝,岳磊,任毅菲. 山西農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(06)
[7]哺乳動(dòng)物原始卵泡的形成和發(fā)育及影響因素[J]. 許蒙蒙,車龍,徐盛玉,吳德. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2015(01)
[8]哺乳動(dòng)物卵巢卵泡膜細(xì)胞功能的研究進(jìn)展[J]. 何琿,姜冬梅,康波,馬容. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2013(09)
[9]顆粒細(xì)胞對(duì)卵泡發(fā)育的影響[J]. 金艷梅. 中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2010(08)
[10]MicroRNA let-7與肺癌關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 任為正,葉鴻飛,趙健,姜安麗. 中國(guó)腫瘤生物治療雜志. 2009(04)
博士論文
[1]RBP-4通過(guò)miRNAs影響豬卵泡顆粒細(xì)胞增殖的研究[D]. 饒家輝.吉林大學(xué) 2019
[2]褪黑素在延緩昆明小鼠卵巢衰老中的作用研究[D]. 宋超.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2019
[3]褪黑素對(duì)豬卵泡發(fā)育與閉鎖的影響研究[D]. 賀亞媚.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2017
[4]FSH調(diào)控豬卵泡顆粒細(xì)胞自噬的分子機(jī)制研究[D]. 高暉.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[5]卵巢功能衰退的比較蛋白質(zhì)組學(xué)及相關(guān)蛋白差異表達(dá)的研究[D]. 張利群.吉林大學(xué) 2014
[6]褪黑素對(duì)豬腔前卵泡體外發(fā)育的影響及機(jī)制研究[D]. 蒲勇.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[7]MicroRNAs在始基卵泡募集過(guò)程中的表達(dá)模式和調(diào)控機(jī)制的研究[D]. 楊書(shū)紅.華中科技大學(xué) 2012
碩士論文
[1]E2與FSH對(duì)水牛卵泡顆粒細(xì)胞/內(nèi)膜細(xì)胞增殖和凋亡的影響[D]. 文冬梅.廣西大學(xué) 2019
[2]FRBI對(duì)卵巢及卵母細(xì)胞發(fā)育的作用和機(jī)理研究[D]. 賴露菊.西北民族大學(xué) 2019
[3]Wnt/β-catenin協(xié)同褪黑素、PI3K信號(hào)通路對(duì)豬卵巢顆粒細(xì)胞發(fā)育的影響[D]. 楊有福.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2018
[4]促卵泡刺激素通過(guò)調(diào)控顆粒細(xì)胞分泌干細(xì)胞因子促進(jìn)卵泡發(fā)育成熟的研究[D]. 鄭夢(mèng)雪.寧夏醫(yī)科大學(xué) 2017
[5]FSH及WNT信號(hào)通路對(duì)綿羊卵泡顆粒細(xì)胞功能的影響[D]. 趙妙妙.山西農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
本文編號(hào):3385942
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