發(fā)布時(shí)間：2021-08-30 11:00

　　產(chǎn)羔率低是制約優(yōu)質(zhì)高效養(yǎng)羊業(yè)發(fā)展的主要瓶頸,而從遺傳本質(zhì)上研究提高產(chǎn)羔率的育種方法是國內(nèi)外養(yǎng)羊科技工作者努力尋求破解的技術(shù)難題。以分子標(biāo)記為核心的多基因聚合育種技術(shù)能直接在DNA水平上對產(chǎn)羔性狀的基因型進(jìn)行選擇,克服了常規(guī)育種耗時(shí)長,效果差的缺點(diǎn),可快速提高育種效率�？梢�,尋找與產(chǎn)羔性狀緊密連鎖分子標(biāo)記,研究目標(biāo)基因的調(diào)控功能及表達(dá)水平,篩選調(diào)控產(chǎn)羔性狀的功能基因,是實(shí)現(xiàn)現(xiàn)代分子育種技術(shù)與常規(guī)育種技術(shù)有機(jī)結(jié)合,集成創(chuàng)新多基因聚合育種技術(shù)體系的基礎(chǔ)和前提。本研究以對動物繁殖性狀有重要調(diào)控作用的KITLG、KIT、KISS1和NGF基因?yàn)檠芯繉ο?采用PCR-RFLP和DNA測序技術(shù)研究這4個(gè)基因在布爾山羊、西農(nóng)薩能和關(guān)中奶山羊中的SNPs及其與產(chǎn)羔數(shù)的關(guān)聯(lián)性；用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)檢測這4個(gè)基因在山羊10組織中的相對表達(dá)量；克隆山羊KITLG、KIT和NGF基因的CDS區(qū),并進(jìn)行生物信息學(xué)分析；用數(shù)量遺傳學(xué)分析方法研究了KITLG、KIT和KISS1基因聚合效應(yīng)對產(chǎn)羔數(shù)的影響,為集成創(chuàng)新山羊產(chǎn)羔性狀的多基因聚合育種技術(shù)體系提供試驗(yàn)依據(jù)和理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下：1、KITLG基因的克隆、... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：128 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
目錄
文獻(xiàn)綜述
    第一章 生物技術(shù)的發(fā)展概況及在動物繁育中的應(yīng)用
        1.1 分子標(biāo)記輔助選擇在家畜育種中的應(yīng)用
            1.1.1 限制性酶切片段長度多態(tài)性(RFLP)
            1.1.2 隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA
            1.1.3 微衛(wèi)星標(biāo)記
            1.1.4 單核苷酸多態(tài)性
            1.1.5 多基因聚合育種技術(shù)
            1.1.6 全基因組選擇
        1.2 生物信息學(xué)
    第二章 影響山羊繁殖性狀的重要功能基因的研究進(jìn)展
        2.1 GnRH和GnRHR基因的研究進(jìn)展
        2.2 FSH和FSHR基因的研究進(jìn)展
        2.3 KITLG和KIT基因的研究進(jìn)展
        2.4 KISS1和GPR54在動物生殖中的作用
        2.5 NGF基因在動物生殖中的作用
        2.6 本研究的目的意義
試驗(yàn)研究
    第三章 KITLG基因的克隆、表達(dá)及其SNPs與產(chǎn)羔數(shù)的關(guān)聯(lián)分析
        3.1 引言
        3.2 材料與方法
            3.2.1 試驗(yàn)動物
            3.2.2 主要試劑
            3.2.3 溶液的配置
            3.2.4 儀器設(shè)備
            3.2.5 基因組DNA的提取及檢測
            3.2.6 RNA的提取及檢測
            3.2.7 DNA的凝膠回收
            3.2.8 DNA克隆
            3.2.9 cDNA模板的制備
            3.2.10 實(shí)時(shí)定量PCR
            3.2.11 引物設(shè)計(jì)、PCR和酶切反應(yīng)
            3.2.12 酶切產(chǎn)物檢測
            3.2.13 核酸和蛋白序列分析
            3.2.14 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
        3.3 結(jié)果與分析
            3.3.1 山羊基因組DNA的檢測
            3.3.2 山羊組織總RNA的檢測
            3.3.3 山羊KITLG基因的克隆及生物信息學(xué)分析
            3.3.4 KITLG基因的實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果
            3.3.5 KITLG基因的PCR擴(kuò)增結(jié)果
            3.3.6 山羊KITLG基因的SNPs檢測
            3.3.7 KITLG基因不同基因型的測序圖
            3.3.8 KITLG基因SNP位點(diǎn)的遺傳結(jié)構(gòu)
            3.3.9 KITLG基因與山羊產(chǎn)羔數(shù)的相關(guān)分析
            3.3.10 3'UTR突變對microRNA結(jié)合位點(diǎn)的影響
        3.4 討論
            3.4.1 Real-time PCR
            3.4.2 KITLG基因的組織表達(dá)
            3.4.3 KITLG基因突變對繁殖性能的影響
        3.5 小結(jié)
    第四章 KIT基因的克隆、表達(dá)及其SNPs與產(chǎn)羔數(shù)的關(guān)聯(lián)分析
        4.1 引言
        4.2 材料與方法
            4.2.1 引物設(shè)計(jì)、PCR和酶切反應(yīng)
        4.3 結(jié)果與分析
            4.3.1 山羊KIT基因的克隆及生物信息學(xué)分析
            4.3.2 KIT基因的實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果
            4.3.3 KIT基因的PCR擴(kuò)增結(jié)果
            4.3.4 山羊KIT基因的SNPs檢測
            4.3.5 KIT基因不同基因型的測序圖
            4.3.6 KIT基因SNP位點(diǎn)的遺傳結(jié)構(gòu)
            4.3.7 KIT基因與山羊產(chǎn)羔數(shù)的相關(guān)分析
            4.3.8 3'UTR突變對microRNA結(jié)合位點(diǎn)的影響
        4.4 討論
        4.5 小結(jié)
    第五章 KISS1基因的表達(dá)及其SNPs與產(chǎn)羔數(shù)的關(guān)聯(lián)分析
        5.1 引言
        5.2 材料與方法
            5.2.1 引物設(shè)計(jì)
        5.3 結(jié)果與分析
            5.3.1 KISS1基因的實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果
            5.3.2 KISS1基因的PCR擴(kuò)增結(jié)果
            5.3.3 山羊KISS1基因的SNPs檢測
            5.3.4 KISS1基因不同基因型的測序圖
            5.3.5 轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)的預(yù)測結(jié)果
            5.3.6 KISS1基因SNP位點(diǎn)的遺傳結(jié)構(gòu)
            5.3.7 KISS1基因與山羊產(chǎn)羔數(shù)的相關(guān)分析
        5.4 討論
        5.5 小結(jié)
    第六章 NGF基因的克隆、表達(dá)及其SNP與產(chǎn)羔數(shù)的關(guān)聯(lián)分析
        6.1 引言
        6.2 材料與方法
            6.2.1 引物設(shè)計(jì)
            6.2.2 實(shí)時(shí)定量PCR
        6.3 結(jié)果與分析
            6.3.1 山羊NGF基因的克隆及生物信息學(xué)分析
            6.3.2 NGF基因的實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果
            6.3.3 NGF基因的PCR擴(kuò)增結(jié)果
            6.3.4 山羊NGF基因的SNP檢測
            6.3.5 NGF基因不同基因型的測序圖
            6.3.6 NGF基因SNP位點(diǎn)的遺傳結(jié)構(gòu)
            6.3.7 NGF基因與山羊產(chǎn)羔數(shù)的關(guān)聯(lián)分析
        6.4 討論
        6.5 小結(jié)
    第七章 KITLG、KIT和KISS1基因聚合對山羊產(chǎn)羔數(shù)的效應(yīng)分析
        7.1 引言
        7.2 材料與方法
        7.3 結(jié)果與分析
        7.4 討論
        7.5 小結(jié)
結(jié)論
創(chuàng)新點(diǎn)
進(jìn)一步研究的問題
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡介


【參考文獻(xiàn)】：
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博士論文
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碩士論文
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[4]性發(fā)育相關(guān)基因調(diào)控區(qū)的多態(tài)性研究[D]. 甘曉紅.華中師范大學(xué) 2006



本文編號：3372654