本研究旨在研制一種牛血清淀粉樣蛋白A（SAA）時間分辨熒光免疫層析定量檢測試劑盒,用于牛奶中SAA含量的臨床快速檢測。采用雙抗體夾心法結合熒光免疫層析技術,在結合墊上固定熒光微球標記的抗SAA單克隆抗體及熒光微球標記的雞IgY的混合物,在硝酸纖維素膜的檢測區(qū)包被另一株抗SAA單克隆抗體,在硝酸纖維素膜的質(zhì)控區(qū)包被山羊抗雞IgY。經(jīng)抗體原料篩選及熒光微球標記抗體的工藝優(yōu)化后,繪制標準曲線并對試劑盒的空白限、精密度、穩(wěn)定性及樣本測試性能進行初步評估。結果顯示,Medix SAA-2單克隆抗體包被與YBX SAA-3單克隆抗體標記為最適抗體配對原料。熒光微球標記抗體的工藝中,熒光微球與抗體的質(zhì)量投料比為40∶1、偶聯(lián)劑與熒光微球羧基摩爾比為2∶1的條件為最優(yōu)組合。試劑盒標準曲線的四參數(shù)擬合曲線方程為y=（1.03947-0.00182）/[1+（x/12.08222）×（-0.84692）]+0.00182,線性相關系數(shù)R²=0.9997。研制的牛SAA檢測試劑盒空白限為0.052 mg/L。精密度測試結果顯示,批內(nèi)變異系數(shù)<15%,批間變異系數(shù)<20%。室... 

【文章來源】：中國畜牧獸醫(yī). 2020,47(04)北大核心

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熒光微球標記抗體的抗體用量篩選

熒光微球標記抗體的偶聯(lián)劑用量篩選

圖2 熒光微球標記抗體的偶聯(lián)劑用量篩選表2 牛SAA檢測試劑盒精密度結果Table 2 Precision of bovine SAA detection kit 濃度Concentration/(mg/L) 批內(nèi)試驗 Intra-assay 批間試驗 Inter-assay 濃度平均值±標準差Mean concentration±SD/(mg/L) CV/% 濃度平均值±標準差Mean concentration±SD/(mg/L) CV/% 2 2.17±0.21 9.8 2.13±0.23 10.7 50 51.33±6.25 12.2 52.42±8.34 15.9

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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[2]奶牛乳房炎對乳酶活性、急性期蛋白含量的影響及其作為隱性乳房炎診斷指標的研究[D]. 楊德英.四川農(nóng)業(yè)大學 2009



本文編號：3347953