甲型流感病毒（Influenza A Virus,IAV）是一種嚴(yán)重危害到人類和易感動(dòng)物健康和安全的正粘科病毒。天然免疫系統(tǒng)是機(jī)體防御病原微生物入侵的第一道防線,其生物效應(yīng)依賴于復(fù)雜的信號(hào)傳導(dǎo)和動(dòng)態(tài)的基因表達(dá)調(diào)控。長(zhǎng)鏈非編碼RNA（long non-coding RNA,lncRNA）是一類不編碼蛋白質(zhì)的RNA轉(zhuǎn)錄本。病毒可以利用宿主的lncRNA來調(diào)控細(xì)胞基因的表達(dá)模式,進(jìn)而改變細(xì)胞內(nèi)的微環(huán)境,為自身的復(fù)制和增殖創(chuàng)造有利條件。研究團(tuán)隊(duì)前期lncRNA組學(xué)數(shù)據(jù)提示IAV感染可以誘導(dǎo)宿主lncRNA TSPOAP1-AS1的表達(dá)。為了探究TSPOAP1-AS1對(duì)于IAV感染的影響及其機(jī)制,我們進(jìn)行了以下研究工作。首先,檢測(cè)了不同IAV毒株以及不同感染復(fù)數(shù)（multiplicity of infection,MOI）感染A549細(xì)胞后不同時(shí)間點(diǎn)TSPOAP1-AS1、Ifnb1和IAV M基因的表達(dá),結(jié)果表明IAV感染A549細(xì)胞后宿主TSPOAP1-AS1的表達(dá)顯著上調(diào),并且其表達(dá)趨勢(shì)與Ifnb1及病毒M基因的表達(dá)趨勢(shì)一致,提示TSPOAP1-AS1的表達(dá)與IAV復(fù)制和細(xì)胞的抗病毒天然免... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：68 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

IAV感染誘導(dǎo)T

斕絋SPOAP1-AS1的PCR擴(kuò)增條帶，說明TSPOAP1-AS1是一個(gè)廣譜表達(dá)的lncRNA。雖然沒能精確定量每個(gè)細(xì)胞TSPOAP1-AS1的分子拷貝數(shù)，但是檢測(cè)靈敏度較低的普通RT-PCR即可檢出，說明TSPOAP1-AS1在細(xì)胞中的表達(dá)水平不是很低，是一個(gè)常規(guī)遍存的lncRNA。IAV感染A549、Caco-2和SH-SY5Y細(xì)胞后，TSPOAP1-AS1的表達(dá)顯著增加，表達(dá)增加的程度與IAV在該細(xì)胞內(nèi)復(fù)制的量呈明顯正相關(guān)。而A172和THP-1感染IAV后TSPOAP1-AS1的表達(dá)沒有顯著變化。由于這兩種細(xì)胞均有免疫細(xì)胞的屬性，說明TSPOAP1-AS1在免疫細(xì)胞中的功能可能與其它類型的細(xì)胞不同。圖2TSPOAP1-AS1在不同人源細(xì)胞系中的表達(dá)Figure2ExpressionofTSPOAP1-AS1indifferenthumancelllines不同細(xì)胞系感染IAV對(duì)TSPOAP1-AS1表達(dá)的影響。TheselectedhumancelllineswereexposedtoIAVinfectionfor24hours.TheexpressionofTSPOAP1-AS1wasexaminedbysemiquantitativeRT-PCR.3.3IAV感染導(dǎo)致TSPOAP1-AS1的核質(zhì)比增加LncRNA分子機(jī)制研究的切入點(diǎn)選擇與其亞細(xì)胞分布相關(guān)，所以需要明確TSPOAP1-AS1在細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)的分布情況，并掌握IAV感染后其核質(zhì)分布的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律。研究結(jié)果表明TSPOAP1-AS1是一個(gè)核、質(zhì)均有分布的lncRNA（圖3.A），沒有呈現(xiàn)出明顯的細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)的單相分布。IAV感染后，TSPOAP1-AS1在表達(dá)量增加的基礎(chǔ)之上其亞細(xì)胞分布也呈現(xiàn)動(dòng)態(tài)的變化，即核質(zhì)比進(jìn)一步的顯著增加，更多的TSPOAP1-AS1存在于細(xì)胞核中（圖3.B）。上述結(jié)果提示在TSPOAP1-AS1互作分子篩選及相關(guān)分子機(jī)制的研究中可以重點(diǎn)著

PolyI:C誘導(dǎo)TSPOAP1-AS1表達(dá)


本文編號(hào)：3347789