犬腺病毒�。–anine adeno,CA）是由犬腺病毒（Canine adenovirus,CAV）感染引起的一種傳染性疾病,本病廣泛流行于家養(yǎng)犬、狐貍、郊狼和浣熊等動(dòng)物中。犬自然感染CAV的發(fā)病率大于50%,死亡率高達(dá)25-40%。CAV常與犬瘟熱病毒（Canine distemper virus,CDV）、犬細(xì)小病毒（Canine parvo virus,CPV）、犬副流感病毒（Canine parainfluenza virus,CPIV）等混合感染,增加了臨床癥狀的復(fù)雜性。本研究通過對(duì)武漢部分寵物醫(yī)院疑似CAV、CDV、CPV、CPIV感染的患病犬進(jìn)行病毒的分離鑒定,分離獲得4株CAV-Ⅱ毒株,1株CPV2b毒株,同時(shí)構(gòu)建了CAV-ⅡWH-27分離株的全基因組文庫,為CAV的流行病學(xué)調(diào)查及預(yù)防和控制CAV相關(guān)疾病提供參考數(shù)據(jù)。具體研究內(nèi)容如下:1、犬源病毒的分離與鑒定從武漢部分寵物醫(yī)院收集患病犬病料樣品410份,選擇85份病料樣品接種MDCK細(xì)胞,有13份接種細(xì)胞后發(fā)生明顯、穩(wěn)定的細(xì)胞病變,表現(xiàn)為細(xì)胞腫脹變圓、聚集,呈"葡萄串"狀或分散變圓的特征性病變。分別通過CAV、CDV... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

pMl).I8-TVector圖譜

Ａ：?ＷＨ－２５在ＭＤＣＫ細(xì)胞上的病變特征Ｂ：?ＷＨ－２７在ＭＤＣＫ細(xì)胞上的病變特征??Ｃ：?ＷＨ－１１６在ＭＤＣＫ細(xì)胞上的病變特征Ｄ：?ＷＨ－１１７在ＭＤＣＫ細(xì)胞上的病變特征??Ｅ：?ＷＨ－１２９在ＭＤＣＫ細(xì)胞上的病變特征Ｆ：?ＷＨ－１６２在ＭＤＣＫ細(xì)胞上的病變特征??丘ＷＨ－１８２在ＭＤＣＫ細(xì)胞上的病變特征吐ＷＨ－２０１在ＭＤＣＫ細(xì)胞上的病變特征??Ｉ：?ＷＨ－２０２在ＭＤＣＫ細(xì)胞上的病變特征Ｊ：?ＷＨ－２的在ＭＤＣＫ細(xì)胞上的病變特征??Ｋ：?ＷＨ－２０８在ＭＤＣＫ細(xì)胞上的病變特征Ｌ?ＷＨ－２０９在ＭＤＣＫ細(xì)胞上的病變特征??Ｍ：ＷＨ－２２０在ＭＤＣＫ細(xì)胞上的病變特征Ｎ：正常ＭＤＣＫ細(xì)胞對(duì)照??４．１．３細(xì)胞病變樣品核酸水平的檢測??利用ＣＡＶ和ＣＰＶ引物，通過ＰＣＲ擴(kuò)增ｎ份細(xì)胞病變樣品（ＷＨ－２５，?ＷＨ－２７，??ＷＨ－１１６，?ＷＨ－１１７，?ＷＨ－１２９，?ＷＨ－１６２，?ＷＨ－１８２，?ＷＨ－２０１，?ＷＨ－２０２，?ＷＨ－２０３，?ＷＨ－２０８，??ＷＨ－２０９，?ＷＨ－２２０）。凝膠電泳結(jié)果顯示：樣品?ＷＨ－２７、ＷＨ－１６２、ＷＨ－２０１?和?ＷＨ－２０１??均擴(kuò)增出１０３０ｂｐ的特異性片段，由于該對(duì)引物能區(qū)分ＣＡＶ－?Ｉ?（５０８ｂｐ卿ＣＡＶ－ＩＩ??（１０３０ｂｐ），所Ｗ表明?ＷＨ－２７、ＷＨ－１６２、ＷＨ－２０１、ＷＨ－２０１?屬于?ＣＡＶ－ＩＩ?（如圖?４－２??所示）。另外，ＷＨ－１８２擴(kuò)增出５７化Ｐ的特異性片段屬于ＣＰＶ?（如圖４－３所示）。??

進(jìn)而通過特異引物擴(kuò)増１３份細(xì)胞病變樣品（ＷＨ－２５，ＷＨ－２７，ＷＨ－Ｈ－１１７，?ＷＨ－１２９，?ＷＨ－１６２，?ＷＨ－１８２，?ＷＨ－２０１，?ＷＨ－２０２，?ＷＨ－２０３，?ＷＨ－２Ｈ－２０９，?ＷＨ－２２０）中是否有ＣＤＶ和ＣＰＩＶ感染。ＣＤＶ特異性引物ＲＴ－Ｐ應(yīng)得到３３化Ｐ的片段，ＣＰＩＶ特異性引物ＲＴ－ＰＣ民擴(kuò)増應(yīng)得到６６７ｂｐ的膠電泳檢測結(jié)果顯示．１３分細(xì)胞病變樣品均為陰性（如圖４－４，?４－５所１?］?３?４?５?６?７?８?９?Ｍ?１０?１１?１２?１３??Ｍ?０?★??２０００ｂｐ￣｜ＪＱＰ｜｜｜ｊｙ｜??Ａ?Ｂ??圖４－４；?ＣＤＶ引物民Ｔ－ＰＣ民擴(kuò)增凝膠化泳檢測結(jié)巧??Ｍ：?ＤＮＡ?ｍａｒｋｅｒ?ＤＬ?２０００??１：?ＷＨ－２５；?２：?ＷＨ－２７；?３：?ＷＨ－１６２；?４：?ＷＨ－１８２；?５：?ＷＨ－１１６；??６：?ＷＨ－１１７；?７：?ＷＨ－１２９；?８：?ＷＨ－２０１；?９：?ＷＨ－２０２；?１０：?ＷＨ－２０３；??１１：?ＷＨ－２０８；?１２：?ＷＨ－２０９；?１３：?ＷＨ－２２０；?０：陰性對(duì)照�！铮洪}性對(duì)照??１?２?５?４?Ｍ?５?６?了?８?９?１０?１１?１：?１３?Ｍ?★?０??


本文編號(hào)：3341662