山羊是最早被人類馴化的家畜之一。在茫茫的歷史長河中,山羊的養(yǎng)殖記錄可追溯到中國的夏商時代。經(jīng)過勞動人民幾千年的精心選擇和繁育,中國已經(jīng)成為世界上山羊品種和資源最為豐富的國家之一。山羊肉不僅是一種健康的食材,同時也是一種中藥材。它不僅營養(yǎng)豐富,滋補功效出色,同時還能預(yù)防和緩解多種常見疾病。2019年,全國的豬牛羊禽肉產(chǎn)量相比上年減少了10.2%,但山羊肉的產(chǎn)量卻增長了2.6%,這些數(shù)據(jù)表明山羊肉受到越來越多中國人的青睞,人們對于山羊肉的需求量也越來越大。但由于山羊繁殖率偏低導(dǎo)致其規(guī)模化養(yǎng)殖受限。因此,增強山羊繁殖率是目前畜牧業(yè)的重要課題之一。研究發(fā)現(xiàn),胎盤是母體與胚胎之間氧氣運輸與營養(yǎng)供給的重要媒介,對于胎兒的生長發(fā)育至關(guān)重要,并且能夠直接影響到出生后胎兒的存活率,是影響動物繁殖性能的重要因素之一。PHLDA2（pleckstrin homology-like domain,family A,member 2,又稱為IPL或TSSC3）,是一個僅在胚胎或成體胚胎外母系等位基因表達的父源印跡基因,具有調(diào)節(jié)細胞信號、胞內(nèi)運輸?shù)裙δ�。研究結(jié)果顯示,在PHLDA2基因功能缺失的胚胎中,胎盤不僅會... 

【文章來源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

山羊胎盤不同妊娠時期PHLDA2基因表達量

結(jié)果與分析4.2山羊PHLDA2基因啟動子活性分析4.2.1山羊啟動子上游分析為了分析山羊PHLDA2基因啟動子5’區(qū)域?qū)ζ涞恼{(diào)控表達，通過軟件MethylPrimerExpressv1.0預(yù)測到從-631到+379bp范圍內(nèi)存在著CpG島(islandsize>100,GCPercent>50.0,Obs/Exp>0.6)，說明啟動子區(qū)域甲基化與PHLDA2基因可能存在相關(guān)性，可對此進行分析。同時通過http://jaspar.genereg.net/在線分析，發(fā)現(xiàn)在PHLDA2基因在啟動子上游+20到-1842bp范圍沒有預(yù)測到CAAT和TATA框，但檢測到nuclearfactorI-C(NIFC),thetranscriptionfactorETSproto-oncogene1(ETS1),arylhydrocarbonreceptor(AHR)andYing-yang1(YY1)等多個轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點。（圖4-3）預(yù)測到轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點用紅色斜體表示Potentialtranscriptionfactorbindingsitesareindicatedinreditalicletters.圖4-3山羊PHLDA2啟動子區(qū)域CpG島以及轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點預(yù)測Fig4-3PredicationofCpGisland(a)andtranscriptionfactorbindingsites(b)in5’flankingregionofgoatPHLDA2gene.32

結(jié)果與分析420bp到-1023bp啟動子活性顯著增加；使用在線軟件jaspar分析發(fā)現(xiàn)，在這個區(qū)域預(yù)測到可能存在的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點，分別是兩個YY1(分別命名為YY1-a和YY1-b),兩個ETS1(分別命名為ETS1-a和ETS1-b)還有NFIC和AHR。(圖4-5)圖4-5PHLDA2基因5’缺失載體啟動子雙熒光素酶活性載體活性分析Fig4-5TherelativeluciferaseactivityofPHLDA2genepromotor5’deletionseriesreconstructions4.3山羊不同妊娠時期胎盤PHLDA2基因啟動子甲基分析4.3.1PHLDA2基因啟動子亞硫酸氫測序為了研究不同妊娠時期胎盤啟動子區(qū)域CpG島甲基化變化，使用軟件MethylPrimerExpressv1.0設(shè)計亞硫酸氫鹽測序引物，擴增區(qū)域位于-574到-225bp，共包括22個CpG位點，共349bp。使用在線QUMA(http://quma.cdb.riken.jp/)軟件分析，得到不同山羊妊娠時期胎盤DNA甲基化狀態(tài)如圖4-6，統(tǒng)計得到不同妊娠時期山羊胎盤PHLDA2基因啟動子區(qū)域CpG島，不同妊娠時期甲基化如圖4-7：30天(39.3%)、45天(19.6%)、60天(18.1%%)、90天(14.7%)。在妊娠45天時，山羊胎盤組織PHLDA2啟動子區(qū)域CpG島甲基化突然降低，而后隨著妊娠時間增加緩慢下降。34

【參考文獻】：
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碩士論文
[1]大足黑山羊PHLDA2基因克隆、定位、組織表達、印記狀況和甲基化分析[D]. 蘇魯方.西南大學(xué) 2014



本文編號：3339030