山羊是最早被人類馴化的家畜之一。在茫茫的歷史長(zhǎng)河中,山羊的養(yǎng)殖記錄可追溯到中國(guó)的夏商時(shí)代。經(jīng)過(guò)勞動(dòng)人民幾千年的精心選擇和繁育,中國(guó)已經(jīng)成為世界上山羊品種和資源最為豐富的國(guó)家之一。山羊肉不僅是一種健康的食材,同時(shí)也是一種中藥材。它不僅營(yíng)養(yǎng)豐富,滋補(bǔ)功效出色,同時(shí)還能預(yù)防和緩解多種常見疾病。2019年,全國(guó)的豬牛羊禽肉產(chǎn)量相比上年減少了10.2%,但山羊肉的產(chǎn)量卻增長(zhǎng)了2.6%,這些數(shù)據(jù)表明山羊肉受到越來(lái)越多中國(guó)人的青睞,人們對(duì)于山羊肉的需求量也越來(lái)越大。但由于山羊繁殖率偏低導(dǎo)致其規(guī)�；B(yǎng)殖受限。因此,增強(qiáng)山羊繁殖率是目前畜牧業(yè)的重要課題之一。研究發(fā)現(xiàn),胎盤是母體與胚胎之間氧氣運(yùn)輸與營(yíng)養(yǎng)供給的重要媒介,對(duì)于胎兒的生長(zhǎng)發(fā)育至關(guān)重要,并且能夠直接影響到出生后胎兒的存活率,是影響動(dòng)物繁殖性能的重要因素之一。PHLDA2（pleckstrin homology-like domain,family A,member 2,又稱為IPL或TSSC3）,是一個(gè)僅在胚胎或成體胚胎外母系等位基因表達(dá)的父源印跡基因,具有調(diào)節(jié)細(xì)胞信號(hào)、胞內(nèi)運(yùn)輸?shù)裙δ�。研究結(jié)果顯示,在PHLDA2基因功能缺失的胚胎中,胎盤不僅會(huì)... 

【文章來(lái)源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

山羊胎盤不同妊娠時(shí)期PHLDA2基因表達(dá)量

結(jié)果與分析4.2山羊PHLDA2基因啟動(dòng)子活性分析4.2.1山羊啟動(dòng)子上游分析為了分析山羊PHLDA2基因啟動(dòng)子5’區(qū)域?qū)ζ涞恼{(diào)控表達(dá)，通過(guò)軟件MethylPrimerExpressv1.0預(yù)測(cè)到從-631到+379bp范圍內(nèi)存在著CpG島(islandsize>100,GCPercent>50.0,Obs/Exp>0.6)，說(shuō)明啟動(dòng)子區(qū)域甲基化與PHLDA2基因可能存在相關(guān)性，可對(duì)此進(jìn)行分析。同時(shí)通過(guò)http://jaspar.genereg.net/在線分析，發(fā)現(xiàn)在PHLDA2基因在啟動(dòng)子上游+20到-1842bp范圍沒有預(yù)測(cè)到CAAT和TATA框，但檢測(cè)到nuclearfactorI-C(NIFC),thetranscriptionfactorETSproto-oncogene1(ETS1),arylhydrocarbonreceptor(AHR)andYing-yang1(YY1)等多個(gè)轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)。（圖4-3）預(yù)測(cè)到轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)用紅色斜體表示Potentialtranscriptionfactorbindingsitesareindicatedinreditalicletters.圖4-3山羊PHLDA2啟動(dòng)子區(qū)域CpG島以及轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)預(yù)測(cè)Fig4-3PredicationofCpGisland(a)andtranscriptionfactorbindingsites(b)in5’flankingregionofgoatPHLDA2gene.32

結(jié)果與分析420bp到-1023bp啟動(dòng)子活性顯著增加；使用在線軟件jaspar分析發(fā)現(xiàn)，在這個(gè)區(qū)域預(yù)測(cè)到可能存在的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)，分別是兩個(gè)YY1(分別命名為YY1-a和YY1-b),兩個(gè)ETS1(分別命名為ETS1-a和ETS1-b)還有NFIC和AHR。(圖4-5)圖4-5PHLDA2基因5’缺失載體啟動(dòng)子雙熒光素酶活性載體活性分析Fig4-5TherelativeluciferaseactivityofPHLDA2genepromotor5’deletionseriesreconstructions4.3山羊不同妊娠時(shí)期胎盤PHLDA2基因啟動(dòng)子甲基分析4.3.1PHLDA2基因啟動(dòng)子亞硫酸氫測(cè)序?yàn)榱搜芯坎煌焉飼r(shí)期胎盤啟動(dòng)子區(qū)域CpG島甲基化變化，使用軟件MethylPrimerExpressv1.0設(shè)計(jì)亞硫酸氫鹽測(cè)序引物，擴(kuò)增區(qū)域位于-574到-225bp，共包括22個(gè)CpG位點(diǎn)，共349bp。使用在線QUMA(http://quma.cdb.riken.jp/)軟件分析，得到不同山羊妊娠時(shí)期胎盤DNA甲基化狀態(tài)如圖4-6，統(tǒng)計(jì)得到不同妊娠時(shí)期山羊胎盤PHLDA2基因啟動(dòng)子區(qū)域CpG島，不同妊娠時(shí)期甲基化如圖4-7：30天(39.3%)、45天(19.6%)、60天(18.1%%)、90天(14.7%)。在妊娠45天時(shí)，山羊胎盤組織PHLDA2啟動(dòng)子區(qū)域CpG島甲基化突然降低，而后隨著妊娠時(shí)間增加緩慢下降。34

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]組蛋白去乙�；概c肝細(xì)胞癌的研究進(jìn)展[J]. 朱博蘭,張?jiān)?楊曉娟,呂寧芳,任瑞強(qiáng),于曉輝.  華南國(guó)防醫(yī)學(xué)雜志. 2019(12)
[2]啟動(dòng)子結(jié)構(gòu)、功能預(yù)測(cè)和驗(yàn)證方法的研究進(jìn)展[J]. 曾曉玲,趙昶靈,文國(guó)松,丁燦,張洪玲,徐率,古朝山.  分子植物育種. 2018(12)
[3]DNA甲基化檢測(cè)中亞硫酸氫鹽修飾方法的改進(jìn)與評(píng)價(jià)[J]. 葉松山,劉先娟,侯俊然,毛秉豫,邱耕.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志. 2016(02)
[4]印記基因:發(fā)育中的重要調(diào)節(jié)因子[J]. 吳瑜,馮旭,高嵐,焦保衛(wèi).  遺傳. 2016(06)
[5]大足黑山羊PHLDA2基因的克隆、組織表達(dá)與印記狀況分析[J]. 蘇魯方,彭學(xué)強(qiáng),蔣曹德.  中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2015(02)
[6]我國(guó)肉羊業(yè)現(xiàn)狀及發(fā)展對(duì)策[J]. 張莉,杜立新,李捷.  草食家畜. 2014(03)
[7]染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)的應(yīng)用和研究進(jìn)展[J]. 李玲,楊鵬躍,朱本忠,傅達(dá)奇,田慧琴,羅云波.  中國(guó)食品學(xué)報(bào). 2012(06)
[8]大足黑山羊種質(zhì)特性[J]. 趙中權(quán),張家驊,李周權(quán),王賢海,陳長(zhǎng)庚,徐恢仲.  中國(guó)畜牧雜志. 2008(15)
[9]染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)在研究DNA與蛋白質(zhì)相互作用中的應(yīng)用[J]. 王春雨,石建黨,朱彥,張琚.  遺傳. 2005(05)
[10]表觀遺傳學(xué)的相關(guān)概念和研究進(jìn)展[J]. 董玉瑋,侯進(jìn)慧,朱必才,李培青,龐永紅.  生物學(xué)雜志. 2005(01)

碩士論文
[1]大足黑山羊PHLDA2基因克隆、定位、組織表達(dá)、印記狀況和甲基化分析[D]. 蘇魯方.西南大學(xué) 2014



本文編號(hào)：3339030