日本血吸蟲病是由日本血吸蟲感染引起的人獸共患寄生蟲病,吡喹酮是目前唯一大規(guī)模使用的血吸蟲病治療藥物,但該藥主要對(duì)成蟲有效且不能解決重復(fù)感染的難題,因而研制出有效、安全的疫苗成為血吸蟲病防治的重要科技需求。血吸蟲疫苗研究取得突破要以血吸蟲感染免疫機(jī)制為基礎(chǔ)。本實(shí)驗(yàn)室前期研究表明,miR181a可能在宿主抗日本血吸蟲感染的早期免疫應(yīng)答中發(fā)揮了重要作用,本文以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和巨噬細(xì)胞作為研究對(duì)象,從體內(nèi)外對(duì)miR181a在抗日本血吸蟲感染中的調(diào)節(jié)作用作了初步的探討。鑒于巨噬細(xì)胞在宿主抗血吸蟲感染過程中和血吸蟲病發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮了作用,本文首先以RAW264.7巨噬細(xì)胞作為研究對(duì)象,探討miR181a在血吸蟲童蟲抗原SSA刺激巨噬細(xì)胞中的免疫調(diào)節(jié)作用。用日本血吸蟲童蟲抗原SSA和miR181a模擬物分別或共同刺激/轉(zhuǎn)染RAW264.7巨噬細(xì)胞,再用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)或流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞miR181a和TNF-α等細(xì)胞因子及M1型和M2型巨噬細(xì)胞標(biāo)記分子的表達(dá)變化。結(jié)果顯示日本血吸蟲童蟲抗原SSA刺激RAW264.7巨噬細(xì)胞后,miR-181a及IL-1β、IL-4、TNF-α、IL-10、IL-6等促... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.1日本血吸蟲成蟲（雌雄合抱）

2.1.2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析每個(gè)實(shí)驗(yàn)都進(jìn)行 3 次重復(fù)。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)利用 SPSS22.0 軟件進(jìn)組資料的比較采用兩獨(dú)立樣本的 t 實(shí)驗(yàn)，多組資料的比較采（One-Way AVOVA）和 LSD-t 檢驗(yàn)；p<0.05 為顯著差異，p<0作圖軟件為 Graphpad Prism7.01。2.2 結(jié)果2.2.1 SSA 刺激 RAW264.7 巨噬細(xì)胞后 miR-181a 的表與 PBS 對(duì)照組相比，不同濃度的童蟲抗原刺激 RAmicroRNA-181a 都呈上調(diào)表達(dá)（ p<0.01 ）（如圖 1 ），（0.1ug-1ug/ml）刺激細(xì)胞的表達(dá)水平明顯高于 2ug 及以上濃表達(dá)水平。

第 2 章 MiR181a 對(duì)日本血吸蟲童蟲抗原刺激巨噬細(xì)胞的免疫應(yīng)答起負(fù)調(diào)節(jié)作用 上海師范大學(xué)碩士學(xué)位論和未轉(zhuǎn)染的PBS對(duì)照組細(xì)胞相比，轉(zhuǎn)染miR-181a模擬物后，IL-1β 、TNF- 、IL三種細(xì)胞因子的表達(dá)量都有所下降，IL-10 下調(diào)表達(dá)不明顯。而轉(zhuǎn)染 miR-18抑制劑的細(xì)胞這三種細(xì)胞因子的表達(dá)量都明顯上升。而在 miR-181a 模擬物和制劑處理的細(xì)胞中，IL-4 的表達(dá)水平都有所上升，其中模擬物處理的細(xì)胞上水平明顯高于抑制劑處理細(xì)胞。無(wú)關(guān)對(duì)照 microRNA 轉(zhuǎn)染細(xì)胞各種細(xì)胞因子的達(dá)水平大多介于 PBS 對(duì)照組和模擬物或抑制劑處理細(xì)胞組之間（如圖 2）。以結(jié)果說明 miR-181a 在 RAW264.7 細(xì)胞中對(duì) T h 1 型細(xì)胞因子等的表達(dá)可能起負(fù)節(jié)作用。

【參考文獻(xiàn)】：
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博士論文
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本文編號(hào)：3332820