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犬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)、生物學(xué)特性鑒定及標(biāo)記

發(fā)布時(shí)間:2021-08-06 12:32
  骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)是存在于骨髓基質(zhì)中的除造血干細(xì)胞之外,又一種成體干細(xì)胞。BMSCs自20世紀(jì)中期被發(fā)現(xiàn)以來(lái),一直備受醫(yī)學(xué)界矚目。隨著研究的深入,BMSCs的一系列生物學(xué)特性得到揭示,首先,作為成體干細(xì)胞,它與造血干細(xì)胞相比具有更廣泛的分化譜系,能夠在誘導(dǎo)劑的作用下向各胚層多種細(xì)胞分化;其次,與胚胎干細(xì)胞相比,BMSCs又具有獲取簡(jiǎn)便,容易培養(yǎng),不受法律道德約束的特殊優(yōu)勢(shì);另外,BMSCs具有神奇的免疫抑制、免疫調(diào)理功能以及歸巢和趨瘤性,在組織工程和基因治療領(lǐng)域具有極大前景。雖然目前世界各國(guó)科學(xué)家對(duì)于BMSCs的研究取得許多可喜的成果,但仍有許多基礎(chǔ)性的問(wèn)題還沒(méi)有得到解決。分離純凈的BMSCs的方法還沒(méi)有被找到,分離到的細(xì)胞也沒(méi)有統(tǒng)一的鑒定方法,體內(nèi)移植研究中高效可靠的標(biāo)記方法還有待研究。針對(duì)這些問(wèn)題,本研究通過(guò)全骨髓貼壁培養(yǎng)法對(duì)犬BMSCs進(jìn)行分離;采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)分析細(xì)胞表面標(biāo)記物的表達(dá)情況;再通過(guò)體外誘導(dǎo),將犬BMSCs向成骨細(xì)胞和心肌細(xì)胞誘導(dǎo),以期鑒定分離得到的犬BMSCs的分化潛能。將攜帶... 

【文章來(lái)源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:61 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

犬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)、生物學(xué)特性鑒定及標(biāo)記


原代及傳代后的犬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(100×)

生長(zhǎng)曲線(xiàn),骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,生長(zhǎng)曲線(xiàn),細(xì)胞


胞數(shù)量沒(méi)有明顯差別;第 10 代細(xì)胞 1~3 d 增殖速度較前兩組慢,對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期較前兩組短,平臺(tái)期細(xì)胞OD值略小于低代次細(xì)胞。圖3-2 犬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)Fig. 3-2 Growth curve of canine BMSCs

表面標(biāo)志,流式細(xì)胞儀檢測(cè),熒光抗體染色


AB圖3-3 第 3 代犬 BMSCs 表面標(biāo)志流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果A 空白對(duì)照組 B 分別為CD45、CD44、CD34 熒光抗體染色組Fig. 3-3 Positive rate of the surface markers of the third passage canine BMSCs tested by flow cytometryA Blank control B Stained with fluorescent antibody CD45, CD44 and CD34

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]中藥制劑誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌細(xì)胞的分化[J]. 王艷,王海萍,呂洋.  中國(guó)組織工程研究. 2014(01)
[2]腺病毒載體與慢病毒載體感染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的比較[J]. 徐思慧,宋春敬,潘曄.  生命科學(xué)研究. 2013(06)
[3]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植促進(jìn)糖尿病大鼠β細(xì)胞再生的機(jī)制[J]. 程愈,申晶,郝好杰,李冰,郭恩凱,韓為東,母義明.  解放軍醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2013(06)
[4]胰島素樣生長(zhǎng)因子1誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為心肌樣細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 王秀力,李春梅,呂茜,王雷,王潔,宮海濱.  中華心血管病雜志. 2013 (02)
[5]黃芪注射液預(yù)處理對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向分化的誘導(dǎo)作用研究[J]. 陳旭.  吉林中醫(yī)藥. 2012(09)
[6]堿性成纖維生長(zhǎng)因子聯(lián)合丹酚酸B誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞分化[J]. 吳志剛,張丹參,王海萍,呂洋,王浩宇,霍艷麗,高辰瑋.  中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志. 2012(03)
[7]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)缺血心肌的血管新生及增殖-凋亡的影響[J]. 鄧瑋,陳慶偉,王麗,王鵬,吳志勤,楊彥.  基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床. 2012(04)
[8]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療小鼠膠原性關(guān)節(jié)炎MMP-2及MMP-9 mRNA表達(dá)的影響[J]. 牛廣華,高玉潔,高明利,郭鶴,王柏山.  中國(guó)免疫學(xué)雜志. 2011(S1)
[9]催產(chǎn)素體外誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化[J]. 王海萍,張雷,王浩宇,呂洋,陳煒,邵素霞.  基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床. 2011(11)
[10]剪切應(yīng)力與心肌細(xì)胞裂解液聯(lián)合誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌分化的研究[J]. 黃艷,樊瑜波.  醫(yī)用生物力學(xué). 2011(03)

博士論文
[1]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在治療支氣管哮喘中的作用研究[D]. 陶雪飛.復(fù)旦大學(xué) 2012
[2]淫羊藿苷誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化心肌樣細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 謝玲玲.廣州中醫(yī)藥大學(xué) 2008

碩士論文
[1]兒童骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外對(duì)T細(xì)胞和造血干細(xì)胞的作用及移植治療造血損傷的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 盧俊.蘇州大學(xué) 2005



本文編號(hào):3325780

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