研究旨在篩選高效枯草芽孢菌株并建立其高密度發(fā)酵工藝。以枯草芽孢桿菌Y1為例,探求枯草芽孢桿菌的高密度發(fā)酵及菌劑生產(chǎn)工藝條件。首先通過單因素試驗(yàn)得到該菌株的最佳發(fā)酵培養(yǎng)基和條件;其次,將優(yōu)化的培養(yǎng)基配比做500 L發(fā)酵體系的放大培養(yǎng)發(fā)酵試驗(yàn),初步探索發(fā)酵工藝;最后確定菌株Y1保存的最適干燥方式。結(jié)果表明:最佳培養(yǎng)基配方為葡萄糖0.50%、豆粕粉2.50%、玉米漿粉1.50%、K₂HPO₄ 0.30%、KH₂PO₄ 0.15%、MgSO₄ 0.025%、MnSO₄ 0.001%、FeCl₃ 0.010%和CaCO₃ 0.010%;最佳發(fā)酵工藝條件為消泡劑濃度5‰、發(fā)酵溫度37℃、初始pH值7.2、轉(zhuǎn)速220 r/min、通氣量1:0.4、種子罐的接種量5%和發(fā)酵罐裝罐量70%,種子罐培養(yǎng)22 h后移罐接種到發(fā)酵罐,培養(yǎng)32 h,此時(shí)芽孢形成率達(dá)到95.90%。保存的最佳干燥方式為冷凍干燥。優(yōu)化后的菌株Y1的凍干粉活菌... 

【文章來源】：飼料研究. 2020,43(08)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

不同碳源對(duì)菌株Y1生長(zhǎng)的影響

分別采用葡萄糖、玉米漿粉、果糖和蔗糖作為培養(yǎng)基的碳源，培養(yǎng)菌株Y1 28 h。由圖1可知，碳源不同，菌株Y1的菌體數(shù)量也會(huì)不同。其中，葡萄糖和玉米漿粉為培養(yǎng)基碳源時(shí)菌株Y1菌體數(shù)量較高，OD600分別達(dá)到11.99和11.26，這是因?yàn)槠咸烟呛陀衩诐{粉極易被菌體利用，有利于芽抱產(chǎn)生，因此選取葡萄糖和玉米漿粉為菌株Y1的培養(yǎng)基碳源，并探究最佳添加濃度。由圖2a可知，在培養(yǎng)到22 h時(shí)，葡萄糖濃度為0.50%的培養(yǎng)基最適菌株Y1的生長(zhǎng)，生長(zhǎng)峰值OD600=15.75。繼續(xù)提高葡萄糖濃度至0.7%時(shí)，OD600值降低，這可能是因?yàn)楦邼舛绕咸烟翘岣吡伺囵B(yǎng)基的滲透壓，反而可能會(huì)抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)[20]。因此，通常選擇在發(fā)酵培養(yǎng)基中的葡萄糖達(dá)到一個(gè)最佳值，隨著碳源的消耗，通過補(bǔ)料方式補(bǔ)充葡萄糖。對(duì)于玉米漿粉來說，在培養(yǎng)到22 h時(shí)，菌株Y1的吸光度值最大，說明此時(shí)菌株Y1的生物量最大（見圖2b）。由此得出，玉米漿粉濃度為1.50%的培養(yǎng)基最適枯草芽孢桿菌的生長(zhǎng)，生長(zhǎng)峰值OD600=15.75。2.1.2 氮源對(duì)菌株Y1培養(yǎng)的影響（見圖3、圖4)

2.1.2 氮源對(duì)菌株Y1培養(yǎng)的影響（見圖3、圖4)分別采用蛋白胨、豆粕粉、酵母粉和牛肉膏作為培養(yǎng)基的氮源，培養(yǎng)菌株Y1 28 h。由圖3可知，菌株Y1對(duì)不同氮源的利用效果是不同的，其中效果最好的是酵母粉，OD600值為15.77，其次是牛肉膏和豆粕粉。但酵母粉和牛肉膏的價(jià)格昂貴，從經(jīng)濟(jì)方面考慮，選擇豆粕粉作為菌株Y1的培養(yǎng)基碳源最佳氮源，并探究其最佳添加濃度。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]枯草芽孢桿菌BZJN1發(fā)酵培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件的優(yōu)化[J]. 劉芳,廖先清,周榮華,饒犇,陳偉,黃大野,游景茂.  湖北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2019(20)
[2]枯草芽孢桿菌主要作用機(jī)制與應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 李怡潔,楊佐忠.  四川林業(yè)科技. 2019(04)
[3]枯草芽孢桿菌發(fā)酵新工藝的優(yōu)化研究[J]. 常曉川,韓業(yè)東,陳晨,薛德林.  飼料研究. 2019(02)
[4]枯草芽孢桿菌的應(yīng)用現(xiàn)狀概述[J]. 閆楊,劉月靜,陳芳.  生物學(xué)教學(xué). 2019(02)
[5]枯草芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基及發(fā)酵條件優(yōu)化[J]. 焉兆萍,宋士良,陸克文.  國外畜牧學(xué)(豬與禽). 2019(01)
[6]枯草芽孢桿菌出芽培養(yǎng)條件優(yōu)化[J]. 王法富,劉夢(mèng)涵,劉利利,卜慶陽,俞建良,張德國,佟毅.  當(dāng)代化工. 2018(02)
[7]一株枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件的優(yōu)化[J]. 葉碧霞,左勇,傅彬,張晶,張?chǎng)?  食品科技. 2017(01)
[8]枯草芽孢桿菌產(chǎn)芽孢發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化研究[J]. 朱曉立,俞巍蔚.  化工設(shè)計(jì)通訊. 2016(06)
[9]枯草芽孢桿菌液態(tài)發(fā)酵的研究[J]. 李情敏,何名芳,張鳳英,張超鳳,陳衛(wèi)平.  中國釀造. 2016 (02)
[10]枯草芽孢桿菌NKY1145高密度發(fā)酵工藝條件的優(yōu)化[J]. 李達(dá),牛春華,姜媛媛,王景會(huì).  中國釀造. 2015(11)

碩士論文
[1]乳酸菌高密度規(guī)模發(fā)酵工藝優(yōu)化[D]. 田良玉.揚(yáng)州大學(xué) 2018



本文編號(hào)：3324242