旨在克隆和表達羊源多殺性巴氏桿菌的ExbD基因,并對其編碼蛋白進行生物信息學分析。試驗通過PCR成功擴增出目的基因片段,將所回收片段與pET-28a（+）載體進行連接,構建pET-28a（+）-ExbD重組質粒,將所得pET-28a（+）-ExbD重組質粒經(jīng)雙酶切鑒定后轉至大腸桿菌BL21（DE3）感受態(tài)細胞,通過自誘導表達,SDS-PAGE和Western blot鑒定表達產(chǎn)物。結果顯示:擴增出390 bp的目的基因,誘導表達得到約為19 ku的重組蛋白。經(jīng)生物信息學分析,該蛋白為疏水性酸性蛋白,屬于穩(wěn)定蛋白,分子式為C₆₅₆H₁₀₆₈N₁₆₀O₁₉₃S₃,分子質量約為14.44 ku,消光系數(shù)(L·mol^-1·cm^-1=280 nm)為6 990,理論等電點是5.16,不穩(wěn)定系數(shù)為35.28（<40）,總平均疏水性（GRAVY）為0.145,二級結構以α-螺旋和無規(guī)則卷曲為主。本試驗通過對ExbD基因的克隆、表達和分析,為進... 

【文章來源】：畜牧與獸醫(yī). 2020,52(05)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

ExbD基因PCR擴增結果

pET-28a(+)-ExbD雙酶切鑒定結果

重組蛋白SDS-PAGE分析

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3318070