豬痘病毒TK基因的缺失和表達(dá)RHDV VP60蛋白重組豬痘病毒的構(gòu)建
發(fā)布時(shí)間:2021-07-31 12:34
豬痘病毒(Swinepox virus,SWPV)屬于痘病毒科,是豬痘病毒屬中的唯一成員,在自然情況下,只感染豬,通常呈良性經(jīng)過。由于SWPV具有生物安全性和臨床安全性好、較大的插入外源基因的能力及能誘導(dǎo)宿主產(chǎn)生良好的保護(hù)性免疫保護(hù)等優(yōu)點(diǎn),故適合作為載體用于開發(fā)重組疫苗。兔病毒性出血癥(Rabbit Hemorrhagic Disease,RHD)是由兔病毒性出血癥病毒(Rabbit Hemorrhagic Disease Virus,RHDV)引起兔的一種高度接觸傳染性致死性疾病。目前國(guó)內(nèi)應(yīng)用的RHD疫苗為組織滅活疫苗,然而基因工程疫苗是未來發(fā)展的方向。豬痘病毒可通過皮內(nèi)接種和口服接種方式感染兔,能產(chǎn)生高水平的抗豬痘病毒抗體;且VP60蛋白是RHDV的主要結(jié)構(gòu)蛋白,與病毒的免疫原性和致病性密切相關(guān)。為探討豬痘病毒載體作為構(gòu)建重組RHD活載體疫苗的可行性,本研究以豬痘病毒江西分離株JX-20G為親本病毒,TK基因作為外源基因的插入位點(diǎn),以EGFP/LacZ為篩選標(biāo)記,通過同源重組技術(shù),建立了重組豬痘病毒構(gòu)建的技術(shù)平臺(tái)。在此基礎(chǔ)上,構(gòu)建了表達(dá)RHDVVP60蛋白的重組豬痘病毒,并測(cè)定了重...
【文章來源】:江西農(nóng)業(yè)大學(xué)江西省
【文章頁數(shù)】:76 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1-2?SWPV基因組的?
圖1-3?RHDV的基因結(jié)構(gòu)[46]??Fig.?1-3?The?genome?organizations?of?RHDV??Joana等系統(tǒng)闡述了?RHDV病毒的復(fù)制和裝配過程(圖1-4),RHDV病毒的外??殼由結(jié)構(gòu)蛋白組成,病毒的非結(jié)構(gòu)蛋白主要組成RHDV的復(fù)制酶,與基因組的RNA??復(fù)制有關(guān)|57]。目前,RHDV的結(jié)構(gòu)蛋白被認(rèn)為是由主要衣殼蛋白VP60和小結(jié)構(gòu)蛋??白VP10組成的。???>■?Uncoating?2??I?\?,??1?z???g(w>micRWA?,一一■一?一一?—?—?—?—?一?ani^jenomK:RNA??泰?1??I?3?I?6??I?P〇^f〇?n?iufc¥en〇fftki^A??I?-?I?COlT>0*i3nt??*?1?t?9?1??I?Ne^-stiystSa^?(JrOjeiiH?/?,?,??1?/?StructUf*?pr〇t?-ir???*?<?Assembly?—?hBBBm??^??圖1-4RHDV復(fù)制示意圖[57]??Fig.?1-4?The?replication?cycle?of?caliciviruses??VP60蛋白是RHDV的主要結(jié)構(gòu)蛋白,分子量大小約為60ku,180個(gè)VP60單??體共同組成病毒粒子的核衣殼。大量研究結(jié)果證明RHDV的衣殼蛋白與病毒的免疫??原性和致病性密切相關(guān)。Torrecuadradan等研究發(fā)現(xiàn)VP60蛋白N端的第31位酸至??第250位氨基酸殘基是RHDV的主要抗原區(qū)域
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【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]串葉松香草高效再生體系的建立與兔出血癥病毒YL株外殼蛋白基因VP60對(duì)其遺傳轉(zhuǎn)化[J]. 李傳山,張婷婷,宋書峰,李維英,孔棟,郭藹光. 生物技術(shù)通報(bào). 2007(05)
[2]兔病毒性出血癥基因工程疫苗的研究進(jìn)展[J]. 張夏蘭,王紅寧,張昌菊,向菁,徐永莉,余協(xié)中. 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2007(10)
[3]兔出血癥病毒VP60蛋白的原核表達(dá)及檢測(cè)方法初步應(yīng)用[J]. 劉懷然,胡迎東,陳洪巖,張齡,李昌文,關(guān)云濤,曲連東. 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2006(02)
[4]痘病毒載體的應(yīng)用[J]. 翟新驗(yàn),盧勝明. 中國(guó)生物工程雜志. 2005(12)
[5]兔出血癥病毒衣殼蛋白基因在畢赤酵母中的表達(dá)[J]. 嚴(yán)維巍,崔治中,王永坤. 生物工程學(xué)報(bào). 2005(01)
[6]在昆蟲細(xì)胞中表達(dá)能自聚成病毒樣顆粒的兔出血癥病毒衣殼蛋白[J]. 嚴(yán)維巍,崔治中,王永坤. 病毒學(xué)報(bào). 2004(04)
[7]中國(guó)株兔出血癥病毒衣殼蛋白VP60基因在大腸桿菌中的表達(dá)及其免疫原性鑒定[J]. 嚴(yán)維巍,崔治中,王永坤. 中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2003(05)
[8]兔病毒性出血癥(RHD)母源抗體動(dòng)態(tài)與抗病毒感染關(guān)系[J]. 佟承剛,鮑國(guó)連,韋強(qiáng),季全安. 中國(guó)養(yǎng)兔. 2001(03)
[9]兔出血癥病毒對(duì)人類紅細(xì)胞的血凝譜研究[J]. 王克領(lǐng),郎利敏,郭秀琦,王四保,魏成斌. 中國(guó)養(yǎng)兔雜志. 1999(06)
[10]兔出血癥病毒在細(xì)胞培養(yǎng)和組織中的形態(tài)發(fā)生[J]. 吉傳義,龔曉明,杜念興. 中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 1999(05)
博士論文
[1]表達(dá)豬鏈球菌2型保護(hù)性抗原重組豬痘病毒的構(gòu)建、特性分析及其小鼠免疫評(píng)估[D]. 黃冬艷.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
碩士論文
[1]ats1A啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的兔出血癥病毒外殼蛋白VP60基因的植物表達(dá)載體構(gòu)建及百脈根的轉(zhuǎn)化[D]. 王濤.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2009
本文編號(hào):3313478
【文章來源】:江西農(nóng)業(yè)大學(xué)江西省
【文章頁數(shù)】:76 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1-2?SWPV基因組的?
圖1-3?RHDV的基因結(jié)構(gòu)[46]??Fig.?1-3?The?genome?organizations?of?RHDV??Joana等系統(tǒng)闡述了?RHDV病毒的復(fù)制和裝配過程(圖1-4),RHDV病毒的外??殼由結(jié)構(gòu)蛋白組成,病毒的非結(jié)構(gòu)蛋白主要組成RHDV的復(fù)制酶,與基因組的RNA??復(fù)制有關(guān)|57]。目前,RHDV的結(jié)構(gòu)蛋白被認(rèn)為是由主要衣殼蛋白VP60和小結(jié)構(gòu)蛋??白VP10組成的。???>■?Uncoating?2??I?\?,??1?z???g(w>micRWA?,一一■一?一一?—?—?—?—?一?ani^jenomK:RNA??泰?1??I?3?I?6??I?P〇^f〇?n?iufc¥en〇fftki^A??I?-?I?COlT>0*i3nt??*?1?t?9?1??I?Ne^-stiystSa^?(JrOjeiiH?/?,?,??1?/?StructUf*?pr〇t?-ir???*?<?Assembly?—?hBBBm??^??圖1-4RHDV復(fù)制示意圖[57]??Fig.?1-4?The?replication?cycle?of?caliciviruses??VP60蛋白是RHDV的主要結(jié)構(gòu)蛋白,分子量大小約為60ku,180個(gè)VP60單??體共同組成病毒粒子的核衣殼。大量研究結(jié)果證明RHDV的衣殼蛋白與病毒的免疫??原性和致病性密切相關(guān)。Torrecuadradan等研究發(fā)現(xiàn)VP60蛋白N端的第31位酸至??第250位氨基酸殘基是RHDV的主要抗原區(qū)域
,?737¥??圖1-3?RHDV的基因結(jié)構(gòu)[46]??Fig.?1-3?The?genome?organizations?of?RHDV??Joana等系統(tǒng)闡述了?RHDV病毒的復(fù)制和裝配過程(圖1-4),RHDV病毒的外??殼由結(jié)構(gòu)蛋白組成,病毒的非結(jié)構(gòu)蛋白主要組成RHDV的復(fù)制酶,與基因組的RNA??復(fù)制有關(guān)|57]。目前,RHDV的結(jié)構(gòu)蛋白被認(rèn)為是由主要衣殼蛋白VP60和小結(jié)構(gòu)蛋??白VP10組成的。???>■?Uncoating?2??I?\?,??1?z???g(w>micRWA?,一一■一?一一?—?—?—?—?一?ani^jenomK:RNA??泰?1??I?3?I?6??I?P〇^f〇?n?iufc¥en〇fftki^A??I?-?I?COlT>0*i3nt??*?1?t?9?1??I?Ne^-stiystSa^?(JrOjeiiH?/?,?,??1?/?StructUf*?pr〇t?-ir???*?<?Assembly?—?hBBBm??^??圖1-4RHDV復(fù)制示意圖[57]??Fig.?1-4?The?replication?cycle?of?caliciviruses??VP60蛋白是RHDV的主要結(jié)構(gòu)蛋白
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]串葉松香草高效再生體系的建立與兔出血癥病毒YL株外殼蛋白基因VP60對(duì)其遺傳轉(zhuǎn)化[J]. 李傳山,張婷婷,宋書峰,李維英,孔棟,郭藹光. 生物技術(shù)通報(bào). 2007(05)
[2]兔病毒性出血癥基因工程疫苗的研究進(jìn)展[J]. 張夏蘭,王紅寧,張昌菊,向菁,徐永莉,余協(xié)中. 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2007(10)
[3]兔出血癥病毒VP60蛋白的原核表達(dá)及檢測(cè)方法初步應(yīng)用[J]. 劉懷然,胡迎東,陳洪巖,張齡,李昌文,關(guān)云濤,曲連東. 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2006(02)
[4]痘病毒載體的應(yīng)用[J]. 翟新驗(yàn),盧勝明. 中國(guó)生物工程雜志. 2005(12)
[5]兔出血癥病毒衣殼蛋白基因在畢赤酵母中的表達(dá)[J]. 嚴(yán)維巍,崔治中,王永坤. 生物工程學(xué)報(bào). 2005(01)
[6]在昆蟲細(xì)胞中表達(dá)能自聚成病毒樣顆粒的兔出血癥病毒衣殼蛋白[J]. 嚴(yán)維巍,崔治中,王永坤. 病毒學(xué)報(bào). 2004(04)
[7]中國(guó)株兔出血癥病毒衣殼蛋白VP60基因在大腸桿菌中的表達(dá)及其免疫原性鑒定[J]. 嚴(yán)維巍,崔治中,王永坤. 中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2003(05)
[8]兔病毒性出血癥(RHD)母源抗體動(dòng)態(tài)與抗病毒感染關(guān)系[J]. 佟承剛,鮑國(guó)連,韋強(qiáng),季全安. 中國(guó)養(yǎng)兔. 2001(03)
[9]兔出血癥病毒對(duì)人類紅細(xì)胞的血凝譜研究[J]. 王克領(lǐng),郎利敏,郭秀琦,王四保,魏成斌. 中國(guó)養(yǎng)兔雜志. 1999(06)
[10]兔出血癥病毒在細(xì)胞培養(yǎng)和組織中的形態(tài)發(fā)生[J]. 吉傳義,龔曉明,杜念興. 中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 1999(05)
博士論文
[1]表達(dá)豬鏈球菌2型保護(hù)性抗原重組豬痘病毒的構(gòu)建、特性分析及其小鼠免疫評(píng)估[D]. 黃冬艷.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
碩士論文
[1]ats1A啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的兔出血癥病毒外殼蛋白VP60基因的植物表達(dá)載體構(gòu)建及百脈根的轉(zhuǎn)化[D]. 王濤.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2009
本文編號(hào):3313478
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