木質(zhì)纖維素的主要成分有木質(zhì)素（約占總質(zhì)量18-35%）、纖維素（約占總質(zhì)量20-50%）和半纖維素（約占總質(zhì)量15-35%）,其中纖維素是由D-吡喃葡萄糖基通過β-1,4糖苷鍵連接而成的線性多聚糖,它是植物最重要的組成成分,約占植物總重量的20%-40%,是地球上最豐富的可再生聚合物,但是它在聚合物形式不能被動(dòng)物機(jī)體直接利用。但白蟻體內(nèi)存在大量可降解纖維素的微生物,能夠高效利用富含木質(zhì)纖維素的木材。。因此本研究從陜西省佛坪縣采集白蟻樣品,從白蟻體內(nèi)篩選出產(chǎn)高活性纖維素酶的菌株,再克隆出其纖維素酶基因,并使該基因在大腸桿菌中表達(dá),旨在為纖維素酶基因人工重組菌的構(gòu)建提供理論技術(shù)與基礎(chǔ)材料;之后通過構(gòu)建乳酸桿菌表達(dá)載體,使纖維素酶基因在羅伊氏乳酸桿菌上表達(dá)并分泌,最后通過發(fā)酵試驗(yàn)檢測重組菌株對粗飼料的降解效果。主要研究結(jié)果如下:1.采集得到的白蟻樣品經(jīng)過形態(tài)學(xué)和16s rRNA鑒定,最終確定其為黑胸散白蟻（Reticulitermes chinensis）。通過羧甲基纖維素鈉培養(yǎng)基篩選以及剛果紅染色的方法,從白蟻體內(nèi)篩選出了4株高產(chǎn)纖維素酶的菌株,經(jīng)鑒定其分別為枯草芽孢桿菌（Bacillus... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

PCR產(chǎn)物T16S基因片段凝膠電泳照片，M:DL5000Marker

將 T16S 基因在 NCBI 網(wǎng)站進(jìn)行 Blas線粒體基因的同源性為 99%（KM216388.1）。綜比對可斷定該白蟻為黑胸散白蟻（Reticuliterme定篩選培養(yǎng)基上經(jīng)過三次篩選和純化，最終根據(jù)菌可在固體篩選培養(yǎng)基上生長的菌落。之后再將 9 板，37 ℃培養(yǎng) 30 h 后出現(xiàn)了肉眼可見的白色菌 4 株菌周圍有明顯的水解圈，所以初步判斷這四 27f、1490R 擴(kuò)增出目的片段，經(jīng)瓊脂糖凝膠電 1500bp 左右的條帶（如圖 2-2）。對連接產(chǎn)物 pMD19-C4 分別進(jìn)行測序，將測序結(jié)果在 NCBI 網(wǎng)斷 C1、C2、C3、C4 菌株分別是阿氏腸桿菌（En桿菌（Bacillus thuringiensis strain）、解淀粉芽n）、枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis strain）。

性質(zhì)測定測定試驗(yàn)方法同 2.2.4（2）�；虻臄U(kuò)增與測序F、BaGR 和 CbsF、CbsR 擴(kuò)增出目的片段，和 Cbs 系列引物分別從 C4 菌株的基因組里右的條帶（如圖 3-1）。對連接產(chǎn)物 pet-BaG NCBI 網(wǎng)站進(jìn)行 Blast 分析，結(jié)果表明 BaG 萄糖苷酶基因（ID:CP021903.1）的相似性為孢桿菌內(nèi)切-β-1,4-葡聚糖酶基因（ID:CP021


本文編號：3313057