為了了解IGF-工基因及IGF結(jié)合蛋白在內(nèi)蒙古絨山羊皮膚毛囊中的表達(dá)調(diào)控作用及IGFBP-5基因在染色體中的定位,通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR、熒光原位雜交（FISH）技術(shù)等實(shí)驗(yàn)研究,得到以下結(jié)論：1驗(yàn)證了IGF-I基因在內(nèi)蒙古白絨山羊皮膚毛囊中的表達(dá)模式,發(fā)現(xiàn)其表達(dá)與毛囊的周期性發(fā)育相一致：2明確了在毛囊發(fā)育興盛期有兩種IGF結(jié)合蛋白即IGFBP-3和IGFBP-5高表達(dá),這與前人在人和小鼠的皮膚毛囊中的研究結(jié)果一致；3對(duì)IGFBP-3和IGFBP-5基因在皮膚毛囊發(fā)育的各個(gè)時(shí)期的表達(dá)情況進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)IGFBP-3雖然在興盛期的表達(dá)量高于IGFBP-5基因,但是其在調(diào)控毛囊發(fā)育周期中的規(guī)律性不如IGFBP-5明顯。因此,本研究推斷,在內(nèi)蒙古白絨山羊的皮膚毛囊發(fā)育中IGFBP-5基因可能發(fā)揮重要的調(diào)控作用；4對(duì)IGFBP-5基因在內(nèi)蒙古絨山羊的染色體上進(jìn)行了定位,并對(duì)FISH實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行了一些探索性研究。 

【文章來(lái)源】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：51 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
插圖和附表清單
1 引言
    1.1 絨山羊概述
    1.2 毛囊的發(fā)生與周期性變化
        1.2.1 絨山羊毛被特點(diǎn)
        1.2.2 毛囊的周期性發(fā)育變化
    1.3 胰島素樣生長(zhǎng)因子系統(tǒng)
        1.3.1 胰島素樣生長(zhǎng)因子(IGFs)的分子生物學(xué)特性
        1.3.2 IGF-I的生理功能
        1.3.3 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白(IGFBPs)
        1.3.4 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白5(IGFBP-5)在毛囊發(fā)育中的研究
    1.4 熒光原位雜交(fluorescence in situ hybrization,FISH)
        1.4.1 FISH的原理及方法
        1.4.2 FISH的研究及其應(yīng)用
    1.5 本研究的目的與意義
        1.5.1 本研究擬解決的問(wèn)題
        1.5.2 本研究的意義
2 試驗(yàn)一 IGFBPs在絨山羊皮膚中的表達(dá)量研究
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 試驗(yàn)樣品
        2.1.2 主要試劑和儀器
        2.1.3 引物合成
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 樣品RNA的提取與cDNA第一鏈的合成
        2.2.2 IGF-I基因反轉(zhuǎn)錄PCR
        2.2.3 IGF-I基因?qū)崟r(shí)定量PCR
        2.2.4 IGFBP 1-6基因?qū)崟r(shí)定量PCR
        2.2.5 IGFBP-3基因和IGFBP-5基因在皮膚中一年12月份的表達(dá)變化
    2.3 結(jié)果分析
        2.3.1 總RNA提取檢測(cè)結(jié)果
        2.3.2 IGF-I基因反轉(zhuǎn)錄PCR結(jié)果
        2.3.3 IGF-I基因?qū)崟r(shí)定量PCR結(jié)果
        2.3.4 IGFBP1-6基因?qū)崟r(shí)定量PCR結(jié)果
        2.3.5 IGFBP-3基因和IGFBP-5基因在皮膚中一年12月份的表達(dá)變化
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
3 試驗(yàn)二 IGFBP-5基因的FISH定位
    3.1 染色體標(biāo)本的制備
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    3.2 IGFBP-5基因探針制備
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    3.3 IGFBP-5基因定位
        3.3.1 主要實(shí)驗(yàn)溶液及配制方法
        3.3.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        3.3.3 實(shí)驗(yàn)方法
    3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        3.4.1 染色體標(biāo)本制備結(jié)果
        3.4.2 陽(yáng)性BAC菌體PCR鑒定
        3.4.3 克隆鑒定及測(cè)序
        3.4.4 BAC質(zhì)粒提取檢測(cè)結(jié)果
        3.4.5 IGFBP-5基因定位結(jié)果
        3.4.6 雜交信號(hào)的定位
    3.5 討論
        3.5.1 細(xì)胞培養(yǎng)條件的摸索
        3.5.2 染色體標(biāo)本制備過(guò)程中的注意事項(xiàng)
        3.5.3 質(zhì)粒提取過(guò)程中的注意事項(xiàng)
        3.5.4 雜交過(guò)程的注意事項(xiàng)
    3.6 結(jié)論
4 全文結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
作者簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]LALBA基因SNP與內(nèi)蒙古白絨山羊經(jīng)濟(jì)性狀的關(guān)聯(lián)[J]. 藍(lán)賢勇,陳宏,田智泉,劉少卿,張永斌,王昕,房興堂.  遺傳. 2008(02)
[2]光照和埋植褪黑激素對(duì)內(nèi)蒙古絨山羊氮分配和生產(chǎn)性能影響的研究[J]. 王林楓,盧德勛,孫海洲,趙秀英,珊丹.  中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2006(01)
[3]放牧條件下絨山羊絨毛季節(jié)性生長(zhǎng)變化規(guī)律的研究[J]. 牛一兵,賈志海,盧德勛,郭寶林,孔祥浩,王潤(rùn)蓮.  動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào). 2005(02)
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[5]試論21世紀(jì)初葉中國(guó)養(yǎng)羊業(yè)的持續(xù)發(fā)展問(wèn)題[J]. 趙有璋.  中國(guó)草食動(dòng)物. 2001(S1)
[6]絨山羊絨毛生長(zhǎng)調(diào)控機(jī)理研究進(jìn)展[J]. 李金泉,尹俊,周歡敏.  中國(guó)草食動(dòng)物. 2001(03)
[7]不同無(wú)機(jī)硫?qū)?nèi)蒙古白絨山羊消化代謝的影響[J]. 彭玉麟,賈志海,盧德勛,李玉榮,牛文藝,娜仁,任曉萍.  中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2001(03)

博士論文
[1]絨山羊BAC文庫(kù)的構(gòu)建與鑒定以及絨毛生長(zhǎng)發(fā)育相關(guān)基因的篩選[D]. 劉志紅.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[2]北京油雞細(xì)菌人工染色體文庫(kù)的構(gòu)建與肉質(zhì)風(fēng)味相關(guān)基因的研究[D]. 吳宏梅.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2008
[3]內(nèi)蒙古絨山羊育種方法的研究[D]. 李金泉.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005

碩士論文
[1]內(nèi)蒙古阿爾巴斯白絨山羊毛囊生長(zhǎng)周期性變化與KAP6 cDNA的特征分析[D]. 張春蘭.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2003



本文編號(hào)：3309627