山羊的胎產(chǎn)羔數(shù)是山羊生產(chǎn)中重要的育種指標(biāo),提高山羊的胎產(chǎn)羔數(shù)對(duì)保障養(yǎng)羊業(yè)持續(xù)健康發(fā)展、提高養(yǎng)羊業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益和農(nóng)民積極性具有重要意義。由于產(chǎn)羔數(shù)的遺傳力低（0.1～0.15）和負(fù)的母體效應(yīng)特點(diǎn),多年來通過表型選擇直接提高母羊的胎產(chǎn)羔數(shù)的進(jìn)展緩慢。雖然人們也希望通過對(duì)影響產(chǎn)羔數(shù)的生理因素如排卵數(shù)、子宮容積等進(jìn)行選擇來加以提高,但因排卵數(shù)與胚胎存活率存在負(fù)的遺傳相關(guān),直接選擇子宮容積難度大,總體收效不大。因此,探索一個(gè)與產(chǎn)羔數(shù)呈強(qiáng)正相關(guān),且遺傳力高的性狀,如胎盤效率,來選擇種母羊和選留后備母羊,以提高山羊的產(chǎn)羔率是十分必要的。10-11異位蛋白1（Ten-Eleven Translocation 1,TET1）作為去甲基化主導(dǎo)作用的雙加氧酶成員,在哺乳動(dòng)物早期胎盤發(fā)育、胚胎著床、胎兒生長(zhǎng)、基因印記以及相關(guān)信號(hào)通路調(diào)控中具有普遍作用,是影響胎盤性狀進(jìn)而影響繁殖性能的一個(gè)重要候選基因,可以作為繁殖性狀輔助選擇的分子標(biāo)記。國內(nèi)外尚無山羊TET1基因及其與山羊胎盤性狀的關(guān)聯(lián)研究的相關(guān)報(bào)告。本論文以大足黑山羊?yàn)檠芯繉?duì)象,旨在探索TET1基因多態(tài)性及其對(duì)胎盤性狀的影響,為通過標(biāo)記輔助選擇提高山羊繁殖性能... 

【文章來源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖4-1.雙變量相關(guān)性分析熱圖

4結(jié)果與分析23可以看出，單羔、雙羔、三羔這三組產(chǎn)羔類型在胎盤重、子葉面積這兩種性狀上都是差異極顯著的，而在胎盤效率上三組數(shù)據(jù)都差異不顯著。單羔組的子葉總數(shù)極顯著地小于雙羔組和三羔組，而雙羔和三羔之間子葉總數(shù)差異不顯著。單羔組的子葉密度顯著大于三羔組，而單羔組和雙羔組差異不顯著；雙羔組和三羔組地差異也不顯著。在子葉承載效率方面，單羔組顯著大于雙羔和三羔組，但雙羔和三羔地差異不顯著。大足黑山羊不同胎次類型的胎盤性狀進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，只有子葉密度在經(jīng)產(chǎn)和初產(chǎn)母羊間差異顯著，而其他性狀差異均不顯著。表4-2以及表4-3中的結(jié)果與雙變量相關(guān)性熱圖的結(jié)果是一致的。4.2TET1基因序列的克隆4.2.1基因組DNA的檢測(cè)利用1%的瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)基因組DNA，結(jié)果如圖4-2所示。從圖中可以看出，基因組DNA較為完整，可以用于后續(xù)的分子實(shí)驗(yàn)中。同時(shí)，用紫外分光光度計(jì)檢測(cè)DNA濃度和純度，結(jié)果顯示大多數(shù)樣本的OD260/280值在1.8-2.0之間，說明提取的基因組DNA純度較好。圖4-2.瓊脂糖電泳檢測(cè)DNA質(zhì)量Figure4-1.DetectionofDNAqualitybyagaroseelectrophoresis4.2.2引物最佳退火溫度的確定設(shè)計(jì)合成21對(duì)引物，對(duì)每對(duì)引物進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)以確定其最佳的退火溫度，通過瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)PCR產(chǎn)物，結(jié)果如圖4-3所示。具體如下：引物對(duì)TET1-1的退火溫度為60℃，TET1-2的退火溫度為60℃，TET1-3的退火溫度為64℃，TET1-4的退火溫度為63℃，TET1-5的退火溫度為60℃，TET1-6的退火溫度為61℃，TET1-7的退火溫度為60℃，TET1-8的退火溫度為61℃，TET1-9的退火

西南大學(xué)碩士學(xué)位論文24溫度為65℃，TET1-10的退火溫度為65℃，TET1-11的退火溫度為63℃，TET1-12的退火溫度為59℃，TET1-13的退火溫度為65℃，TET1-14的退火溫度為65℃，TET1-15的退火溫度為61℃，TET1-16的退火溫度為65℃，TET1-17的退火溫度為63℃，TET1-18的退火溫度為63℃，TET1-19的退火溫度為59℃，TET1-20的退火溫度為64℃，TET1-21的退火溫度為64℃。確定最佳退火溫度后，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，用瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)，然后將樣品送往武漢天一輝遠(yuǎn)生物技術(shù)有限公司進(jìn)行測(cè)序。圖4-3.引物的PCR產(chǎn)物瓊脂糖電泳圖A:1泳道為Maker，2-9泳道為TET-1，11泳道為Marker，12-19泳道為TET-2；B:從左到右每?jī)蓚�(gè)條帶為一對(duì)引物。1泳道為Marker，2和3泳道為TET-3，4和5泳道為TET-4，6和7泳道為TET-5，8和9泳道為TET-6，10和11泳道為TET-7，12和13泳道為TET-8，14和15泳道為TET-9，16和17泳道為TET-10，18和19泳道為TET-11，20和21泳道為TET-12；C:從左到右每?jī)蓚�(gè)條帶為一對(duì)引物。1泳道為Marker，2和3泳道為TET-13，4和5泳道為TET-14，6和7泳道為TET-15，8和9泳道為TET-16，10和11泳道為TET-17，12和13泳道為TET-18，14和15泳道為TET-19，16和17泳道為TET-20，18和19泳道為TET-21Figure4-3.AgaroseelectrophoresisofPCRproductsofprimers

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