布魯氏菌病（Brucellosis）由布魯氏菌（Bruce1la）侵入機(jī)體引起，以流產(chǎn)、不育和弛張熱為臨床特征的人獸共患病。該病在人畜間廣泛流行，世界170個國家和地區(qū)均有該病的發(fā)生，在我國新疆和青海兩省尤為突出，給畜牧業(yè)生產(chǎn)和人類健康帶來了嚴(yán)重的危害。布魯氏菌是典型的胞內(nèi)寄生菌，主要以細(xì)胞免疫為主，T細(xì)胞在其誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答中發(fā)揮著重要作用。CD4⁺CD25⁺T細(xì)胞（Treg）對免疫應(yīng)答具有調(diào)節(jié)功能，主要表現(xiàn)為免疫無反應(yīng)性和免疫抑制性，可以通過下調(diào)機(jī)體的免疫應(yīng)答來維持機(jī)體穩(wěn)定和免疫耐受，當(dāng)Treg細(xì)胞數(shù)量低下和功能紊亂可導(dǎo)致多種疾病的發(fā)生。Foxp3（Forkheadboxp3）是特異性表達(dá)在Treg細(xì)胞上的一類轉(zhuǎn)錄因子，F(xiàn)oxp3的活化對Treg細(xì)胞發(fā)育和轉(zhuǎn)化有較大的影響。對Treg細(xì)胞的免疫調(diào)控研究將有助于對布魯氏菌免疫機(jī)制的理解及防治新策略的制定。目前Treg細(xì)胞是否參與了綿羊?qū)Σ剪斒暇鶰5-90弱毒的免疫反應(yīng)調(diào)控尚不清楚，為了探討Treg細(xì)胞在布魯氏菌M5-90弱毒疫苗誘導(dǎo)機(jī)體免疫應(yīng)答中的作用，本項目主要開展了以下研究工作：1、外周血... 

【文章來源】：石河子大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
英文縮略語
第一章 文獻(xiàn)綜述
第二章 實驗研究
    實驗一 外周血 CD4 ~+、 CD8 ~+T 、 CD4 ~+CD25 ~+Treg 在綿羊接種布魯氏菌 M5- 90 弱毒疫苗后的動態(tài)變化
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 試劑
            1.2 實驗動物
            1.3 免疫程序的制定
            1.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測
            1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
        2 結(jié)果
            2.1 流式細(xì)胞檢測數(shù)據(jù)
            2.2 CD4 ~+T 淋巴細(xì)胞亞群的動態(tài)變化
            2.3 CD8 ~+T 淋巴細(xì)胞亞群的動態(tài)變化
            2.4 CD25~+T 淋巴細(xì)胞亞群動態(tài)變化
            2.5 CD4~+CD25 ~+Treg 的動態(tài)變化
        3 討論
    實驗二 綿羊接種布魯氏菌 M5- 90 弱毒疫苗后 IL- 1β、 IL- 6 及抗體水平檢測研究
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 菌株、主要試劑與材料
            1.2 實驗動物的檢測與 M5- 90 疫苗株的免疫程序制定
            1.3 抗體水平的測定
            1.4 小鼠抗羊 IL - 1β、兔抗羊 IL -6 、酶標(biāo)二抗最佳工作濃度的確定
            1.5 間接 ELISA操作程序
            1.6 SPSS 統(tǒng)計分析
        2 結(jié)果
            2.1 抗體水平檢測
            2.2 一抗、酶標(biāo)二抗最佳工作濃度的確定
            2.3 間接 ELISA檢測結(jié)果
        3 討論
    實驗三 綿羊接種布魯氏菌 M5- 90 后 Treg 細(xì)胞中 Foxp3 基因表達(dá)的檢測研究
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 試劑與儀器
            1.2 培養(yǎng)基
            1.3 PBMC 的獲得
            1.4 細(xì)胞計數(shù)
            1.5 PBMC 的凍存與復(fù)蘇
            1.6 提取 RNA 反轉(zhuǎn)錄
            1.7 引物設(shè)計
            1.8 RT-PCR 檢測 Foxp3 的表達(dá)
        2 結(jié)果
            2.1 淋巴細(xì)胞的分離計數(shù)
            2.2 Foxp3 的表達(dá)檢測
        3 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡介
在學(xué)校期間參與的研究課題
發(fā)表論文
附件


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]布魯氏菌BP26基因標(biāo)記疫苗株的構(gòu)建及鑒別PCR方法的建立[J]. 汪舟佳,甄清,喬鳳,王玉飛,杜昕穎,鐘志軍,趙瑾,于雅琴,黃留玉,孫巖松,陳澤良.  微生物學(xué)報. 2009(03)
[3]大腸癌中白細(xì)胞介素6與p-Stat3表達(dá)的關(guān)系[J]. 葉霖,王國斌,陶凱雄.  腹部外科. 2008(05)
[4]大腸癌患者白細(xì)胞介素-6和自身抗體的檢測及臨床意義[J]. 于高生,鄭瑞平.  中華普通外科學(xué)文獻(xiàn)(電子版). 2008(04)
[5]CD4+CD25nt/hiCD127lo調(diào)節(jié)性T細(xì)胞對HIV感染者免疫狀態(tài)及病程進(jìn)展的影響[J]. 周明奎,薛以樂,宮菊麗,周磊明,鄭曉虹,蓋晶,沈方偉,張瑋,寧鎮(zhèn),岳清,盧偉,潘啟超,康來儀,鐘平,朱文斯,王盈.  中國免疫學(xué)雜志. 2007(12)
[6]急慢性乙型肝炎患者外周血調(diào)節(jié)性T細(xì)胞鑒定與臨床意義分析[J]. 福軍亮,徐東平,趙平,陳黎明,張暉,周春保,姚金霞,榮義輝,王福生.  中華醫(yī)學(xué)雜志. 2006(22)
[7]市場經(jīng)濟(jì)下布魯氏菌病防治工作的新思路[J]. 王茂武,宮新生,尚德秋,張士義,王大力.  疾病監(jiān)測. 2004(08)
[8]乙型肝炎患者血清白細(xì)胞介素6和血小板源生長因子水平與肝纖維化關(guān)系[J]. 彭小斌,張國安,劉小朋,陳紫榕,施水蘭.  中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志. 2000(06)



本文編號：3307445