發(fā)布時間：2021-07-27 17:39

　　本試驗旨在探究不同乙醇濃度提取的棗多糖（JP）協(xié)同脂多糖（LPS）對小鼠脾臟B淋巴細(xì)胞體外增殖的影響。本試驗采用水提醇沉法和分步醇沉法獲取4種JP;采用機械法無菌分離出小鼠脾臟B淋巴細(xì)胞,調(diào)節(jié)細(xì)胞濃度為5×10⁴個/mL,將細(xì)胞隨機分為18組,每組4個重復(fù),每個重復(fù)85μL細(xì)胞。試驗采用4×4雙因子試驗設(shè)計,乙醇濃度和JP濃度為2個主效應(yīng),乙醇濃度分別為60%、70%、80%和90%,JP濃度分別為25、50、100和150μg/mL,另外設(shè)置1個空白對照組（不添加JP和LPS）,1個LPS對照組（不添加JP,只添加LPS）,用四甲基偶氮唑鹽比色（MTT）法檢測各組脾臟B淋巴細(xì)胞的增殖情況,并計算其相對增殖率。結(jié)果表明:1) B淋巴細(xì)胞的相對增殖率隨著乙醇濃度的增加而增加,乙醇濃度為90%組的相對增殖率顯著高于60%、70%和80%組（P<0.05）,70%和80%組的相對增殖率顯著高于60%組（P<0.05）,且70%和80%組間沒有顯著差異（P>0.05）。2)隨著JP濃度的增加,相對增殖率先增加后降低,各試驗組均顯著高于LPS對照組和空白對... 

【文章來源】：動物營養(yǎng)學(xué)報. 2020,32(09)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

相對增殖率隨JP濃度的變化趨勢

機體正常免疫功能依賴于各種免疫細(xì)胞之間的相互作用。脾臟內(nèi)含有大量的淋巴細(xì)胞，其中T細(xì)胞約35%,B淋巴細(xì)胞約38%，分別參與細(xì)胞免疫和體液免疫[21]，淋巴細(xì)胞增殖表現(xiàn)為產(chǎn)生效應(yīng)淋巴細(xì)胞，直觀表現(xiàn)機體免疫機能[22]。伴刀豆球蛋白A(ConA）和LPS分別作為T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的致有絲分裂原，分別促進(jìn)T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的增殖[23]。不同多糖對不同免疫細(xì)胞的作用效果不同，這與多糖的結(jié)構(gòu)、細(xì)胞種類和功能相關(guān)。研究表明，壇紫菜多糖可顯著促進(jìn)T淋巴細(xì)胞的增殖，卻對B淋巴細(xì)胞的增殖有抑制作用[24]；靈芝多糖對B細(xì)胞和巨噬細(xì)胞增殖有促進(jìn)作用，但對T細(xì)胞作用效果不大[25]；商陸多糖[26]對T、B淋巴細(xì)胞的增殖均有顯著的促進(jìn)作用；金昌棗多糖[27]能夠提高RAW264.7細(xì)胞的吞噬能力，并呈一定的劑量依賴關(guān)系；拐棗多糖[18]能夠促進(jìn)小鼠T淋巴細(xì)胞增殖和巨噬細(xì)胞的吞噬；經(jīng)DEAE-52纖維柱和Sephadex G-200柱分離純化的4種不同分子質(zhì)量的JP(YP1a、YP2、YP3和YP4a）均可促進(jìn)小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖，并呈現(xiàn)量效關(guān)系[28]，即存在雙向性，只有在適宜的劑量時才具有較高的免疫調(diào)節(jié)活性[29-31]，與本試驗結(jié)果一致，這可能是JP能提高動物機體抗體效價的作用基礎(chǔ)[32]。并且本試驗結(jié)果顯示，試驗組相對增殖率顯著高于LPS對照組，提示4種濃度JP均可能是小鼠脾臟B淋巴細(xì)胞的致有絲分裂原，通過促進(jìn)B淋巴細(xì)胞增殖分化，從而增強機體的體液免疫[13]，可進(jìn)行多糖單獨刺激試驗進(jìn)行驗證。此外，在本試驗條件下RGR≥100%，對淋巴細(xì)胞無毒性，但是最大無毒濃度還需進(jìn)一步擴(kuò)大濃度范圍進(jìn)行確定。4 結(jié)論

【參考文獻(xiàn)】：
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博士論文
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碩士論文
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本文編號：3306242