發(fā)布時間：2021-07-26 11:52

　　禽白血病是由禽白血病/肉瘤病毒群引起的以造血細胞增生為主的一類腫瘤性疾病。禽白血病病毒（Avian leukosis virus）屬于反轉(zhuǎn)錄病毒科的a-反轉(zhuǎn)錄病毒屬。根據(jù)其囊膜蛋白的不同，禽白血病在雞的體內(nèi)分為A、B、C、D、E、J六個亞群。其中，E亞群病毒為內(nèi)源性禽白血病病毒，普遍存在于雞群中，幾乎沒有致瘤性，對雞群的影響較低。A、B、J亞群是雞群中引發(fā)腫瘤的主要外源性ALV，C、D亞群的外源性ALV較為少見。其他的內(nèi)源性ALV如F、G、H、I,存在于雉、鵪鶉、鷓鴣等鳥體內(nèi)。雞是禽白血病病毒的自然宿主，而目前為止，還沒有關(guān)于鴨群中禽白血病的報道。為了解鴨群中禽白血病的流行情況，本研究采集了四川綿陽、江蘇徐州、山東煙臺、濰坊、聊城和濱州六個不同地區(qū)鴨群的鴨子組織樣品共510份，通過PCR方法用p27抗原檢測鴨子體內(nèi)禽白血病病毒核酸的攜帶情況。根據(jù)核酸序列測定分析，結(jié)果表明：11%（58/510）的鴨子體內(nèi)攜帶禽白血病病毒的核酸。另外設(shè)計引物對58份陽性樣品進行完整的env基因擴增，結(jié)果其中2份擴增出完整的env基因，長度為1857bp，另有5份擴增出缺失808bp的env基因，長度為1... 

【文章來源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

PCR擴增P27基因Fig.3-1Detectionofp27byPCR

圖 3-2 Env 基因 PCR 擴增結(jié)果Fig 3-2 PCR amplification of env geneM: DL2000 DNA Marker; 1-7：PCR products；8-9: negative controlv 基因的序列比對結(jié)7 只鴨的 env 基因 PCR 擴增產(chǎn)物進行測序，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，這 7 只鴨的 PCenv 基因的目的片段。其中 2 份擴增出完整的 env 基因，大小為 1857b部分基因缺失的 env 基因片段，大小為 1049bp，中間有 808bp 的堿基

圖 3-4 PCR 擴增四段基因的瓊脂糖凝膠電泳Fig. 3-4 The PCR products of the four genesM: DL2000 DNA Marker; 1-2：The PCR product of a; 3-4 The PCR product of b;5-6 The PCR product of c; 7-8 The PCR product of d.2 四段基因重組質(zhì)粒的 PCR 鑒定a、b、c、d 四段基因與 pET-32a（+）重組質(zhì)粒分別命名為 gp85-a、gp85-b、gp885-d。這四個重組質(zhì)粒分別用相應(yīng)的引物擴增目的片段后進行測序。測序結(jié)果顯的是正確序列的基因片段，與原始毒株同源性在 100%。.3 SDS-PAGE 凝膠分析ALV-B gp85 的四段基因的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至表達菌株中經(jīng) IPTG 誘導(dǎo)表達，10000心 1min 后收集菌體，加入適量的 PBS 重懸菌體后，再加入等體積的 2 倍 SDS 上液，混勻后沸水浴 10min，5000 rpm 離心 10min，取上清，以 12%的聚丙酰胺凝

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3303514