組織蛋白酶B和組織蛋白酶L是半胱氨酸蛋白酶木瓜蛋白酶樣家族的主要成員,在生物體普遍存在,并具有廣泛的生物學功能。在寄生蟲學領(lǐng)域,組織蛋白酶B和組織蛋白酶L已在復頂亞門多種原蟲報道,并證明參與了蟲體入侵、免疫逃避、移行、脫囊、攝取營養(yǎng)等多種生命過程,但在柔嫩艾美耳球蟲鮮有研究報道。本研究利用RT-PCR和RACE技術(shù)成功克隆了編碼柔嫩艾美耳球蟲（Eimeria tenella）組織蛋白酶B（Etcat B）和組織蛋白酶L（Etcat L）基因的cDNA序列。擴增獲得的EtcatB的序列長1539bp,含有完整的開放性閱讀框（ORF）,編碼512氨基酸,與弓形蟲（Toxiplasma gondii）的組織蛋白酶B（序列號：EPR63374.1）同源性最高,可達49%；Etcat L的序列全長2176bp,含1413bp的開放性閱讀框,編碼470aa,與和緩艾美耳球蟲（Eimeria acervulina）和弓形蟲cathepsin L（序列號：CDI79476和ABY58967.1）的同源性為49%和47%。利用原核表達系統(tǒng)成功克隆和純化了Etcat B和Etcat L重組蛋白,并通過明膠... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)大學北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：112 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

蛋白酉每的定義和分類(引自HollyJ.Atkinsonetal.2009，TrendsinParasitology)

圖2-4 Etcat B原核表達SDS-PAGE電泳分析28a-EtcatB質(zhì)粒轉(zhuǎn)化rosetta菌誘導Oh的融合蛋白：2，3: pET28a-EtcatB質(zhì)粒轉(zhuǎn)化rosetta菌6h的融合蛋白上清和沉淀：M:蛋白分子量marker:4,5： pET28a-EtcatB質(zhì)粒轉(zhuǎn)化rosetta菌4°C過夜誘導的融合蛋白上清和沉底Fig 2-4 Analysis of expressed proteins by SDS-PAGEE.coli transformed by pET28a-EtcatB induced with IPTG for 0 hours; M-.protein marker 2:The supeinduced with IPTG in 37°C for 6 hours, 3:The inclusion bodies induced with IPTG in 37°C for 6 h

【參考文獻】：
期刊論文
[1]巨型艾美耳球蟲配子體GAM56基因的克隆與表達[J]. 張曉燕,丁雋,劉群.  中國獸醫(yī)雜志. 2007(11)



本文編號：3302836