發(fā)布時(shí)間：2021-07-23 14:09

　　布魯菌�。˙rucellosis）是一種由布魯菌引起的、全球范圍內(nèi)危害嚴(yán)重的人畜共患病。布魯菌外膜蛋白28（Outer Membrane Protein28,OMP28）具有較強(qiáng)的免疫原性,存在于大多數(shù)布魯菌的不同種和生物型中。隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的不斷發(fā)展,國(guó)際貿(mào)易已將酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（Enzyme linked immunosorbent assay, ELISA）作為布魯菌病的指定檢測(cè)方法,而我國(guó)現(xiàn)行規(guī)定的檢測(cè)方法有虎紅平板凝集實(shí)驗(yàn)、乳牛全乳環(huán)狀實(shí)驗(yàn)、試管凝集實(shí)驗(yàn)和補(bǔ)體結(jié)合實(shí)驗(yàn),尚未將ELISA作為指定的檢測(cè)方法。本研究通過對(duì)布魯菌OMP28基因進(jìn)行原核表達(dá)并純化,獲得高純度可溶性重組蛋白OMP28。然后將該蛋白作為包被抗原,建立布魯菌抗體檢測(cè)的間接酶聯(lián)免疫吸附（indirect ELISA, iELISA）萬法,并進(jìn)行診斷試劑盒的研制。實(shí)驗(yàn)根據(jù)GenBank中登錄的布魯菌OMP28蛋白的基因序列,設(shè)計(jì)一對(duì)特異性引物,以布魯菌全基因組DNA為模板,PCR法擴(kuò)增目的片段。將目的片段連接到表達(dá)載體pET-28（+）質(zhì)粒上,得到重組表達(dá)質(zhì)粒pET-28（+）-OMP28。將經(jīng)雙酶切鑒定和測(cè)... 

【文章來源】：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

1VIP28基因的PCR『增結(jié)果

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3299438