趨化因子10（CXCL10）是介導(dǎo)炎癥反應(yīng)的趨化因子,與其唯一的受體趨化因子受體3（CXCR3）結(jié)合后,不僅可以調(diào)節(jié)細胞遷移、生長,分化和死亡等多種細胞功能,還可調(diào)節(jié)病毒感染、炎癥反應(yīng)、腫瘤、損傷修復(fù)、自身免疫性疾等多種病理功能。CXCL10/CXCR3軸在多種由病毒感染的肺損傷中具有重要作用,PRRSV感染豬肺組織后造成肺損傷是導(dǎo)致死亡的主要原因,而關(guān)于CXCL10/CXCR3軸參與肺損傷過程的機制還尚未清楚。本研究檢測PRRSV人工感染和臨床感染的豬肺組織中CXCL10、CXCR3的mRNA和蛋白質(zhì)的表達變化,進一步建立細胞模型,從組織和細胞水平分別檢測了趨化因子CXCL10、趨化因子受體CXCR3在PRRSV感染的肺損傷中的表達。研究內(nèi)容包括以下幾個方面:1.感染PRRSV豬肺組織中CXCL10和CXCR3的表達變化檢測利用實時熒光定量PCR（qPCR）的方法,分別檢測了人工感染PRRSV和臨床感染PRRSV豬肺組織中CXCL10和CXCR3 mRNA的表達量。人工感染的肺組織CXCL10和CXCR3 mRNA呈現(xiàn)高表達;臨床感染組中CXCL10 mRNA呈高表達,而CXCR3 ... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
中英文縮略表（Abbreviation）
1.前言
    1.1 趨化因子CXCL10和其受體CXCR3的研究進展
        1.1.1 趨化因子CXCL10的特性
        1.1.3 趨化因子受體CXCR3的特性
        1.1.4 CXCL10/CXCR3介導(dǎo)Th1型炎癥反應(yīng)
        1.1.5 CXCL10/CXCR3在肺損傷中的作用
    1.2 PRRS的國內(nèi)外研究現(xiàn)狀
        1.2.1 PRRS簡介
        1.2.2 PRRSV的特性
        1.2.3 PRRS的防治
    1.3 CXCL10/CXCR3在感染PRRSV豬肺損傷中的作用
    1.4 研究目的
2.試驗材料和方法
    2.1 試驗材料
        2.1.1 動物材料
        2.1.2 細胞系
        2.1.3 主要儀器和試劑
        2.1.4 主要試劑
        2.1.5 主要溶液的配制
        2.1.6 引物序列
    2.2 試驗方法
        2.2.1 采樣
        2.2.2 攻毒實驗
        2.2.3 總RNA提取方法
        2.2.4 電泳檢測RNA
        2.2.5 RNA的逆轉(zhuǎn)錄
        2.2.6 總蛋白提取方法
        2.2.7 總蛋白濃度的測定方法
        2.2.8 聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）
        2.2.9 實時熒光定量PCR（Real time-qPCR）
        2.2.10 PCR產(chǎn)物的電泳檢測
        2.2.11 免疫印跡試驗（Western blot）
        2.2.12 免疫印跡膜再生
        2.2.13 MTT藥物實驗
    2.3 統(tǒng)計學(xué)方法
3.結(jié)果與分析
    3.1 豬肺組織和巨噬細胞總RNA提取結(jié)果
    3.2 趨化因子CXCL10和受體CXCR3在組織中表達
        3.2.1 趨化因子CXCL10在豬肺組織中mRNA的表達水平變化
        3.2.2 CXCL10受體CXCR3在豬肺組織中mRNA的表達水平變化
        3.2.3 CXCL10受體CXCR3在豬肺組織中蛋白的表達水平變化
    3.3 趨化因子CXCL10 mRNA在細胞中表達水平變化
    3.4 趨化因子受體CXCR3在細胞中表達水平變化
        3.4.1 趨化因子受體CXCR3 mRNA在細胞中表達水平變化
        3.4.2 趨化因子受體CXCR3蛋白在細胞中表達水平變化
    3.5 活細胞分析方法（MTT法）檢測細胞的活性
4.討論
    4.1 PRRSV影響CXCL10、CXCR3在豬肺組織中表達
    4.2 不同刺激物影響CXCL10、CXCR3在巨噬細胞中的表達
5.結(jié)論
參考文獻
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Construction of infectious cDNA clones of PRRSV:Separation of coding regions for nonstructural and structural proteins[J]. YUAN ShiShan & WEI ZuZhang Department of Animal Infectious Diseases, Key Laboratory of Animal Parasitology Chinese Ministry of Agriculture, Shanghai Vet- erinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200232, China.  Science in China（Series C:Life Sciences）. 2008(03)
[2]Chemokines and Chemokine Receptors:Their Manifold Roles in Homeostasis and Disease[J]. Pablo Iribarren.  Cellular & Molecular Immunology. 2004(02)



本文編號：3292808