WT1作為含鋅指結(jié)構(gòu)蛋白的轉(zhuǎn)錄因子,不僅在腫瘤發(fā)生過(guò)程中起重要的作用,還在維持組織穩(wěn)態(tài)、調(diào)控器官發(fā)育等方面也發(fā)揮重要作用。類(lèi)固醇激素參與了哺乳動(dòng)物卵泡發(fā)育和閉鎖的生物學(xué)過(guò)程,可以影響卵泡發(fā)育和卵母細(xì)胞的質(zhì)量。顆粒細(xì)胞和膜細(xì)胞作為卵泡內(nèi)主要的類(lèi)固醇激素分泌細(xì)胞,其分泌的雌激素、孕酮及雄激素在卵泡發(fā)育及閉鎖過(guò)程中扮演著重要的角色。據(jù)報(bào)道,WT1有兩種可變剪接體WT1（+KTS）和WT1（-KTS）,在性腺發(fā)育過(guò)程中起到不同的作用。已有人研究,WT1的下調(diào)能夠調(diào)控小鼠腔前卵泡顆粒細(xì)胞的過(guò)早分化,引起卵泡發(fā)育異常。但是目前,WT1（+KTS）和WT1（-KTS）與顆粒細(xì)胞和膜細(xì)胞類(lèi)固醇激素分泌有什么關(guān)系,這兩種變體在卵泡發(fā)育過(guò)程中表達(dá)模式如何?WT1在家畜方面如何影響卵巢卵泡發(fā)育還未見(jiàn)報(bào)道。本研究分離牛卵巢不同階段的有腔卵泡,進(jìn)行了WT1基因及類(lèi)固醇生成及相關(guān)基因在顆粒細(xì)胞和膜細(xì)胞中的表達(dá)模式研究,進(jìn)行了WT1基因在卵巢顆粒細(xì)胞以及卵泡膜細(xì)胞中調(diào)控類(lèi)固醇激素生成的作用的研究,并且進(jìn)行了PI3K/AKT信號(hào)通路和MAPK/ERK信號(hào)通路參與WT1基因調(diào)控牛卵泡顆粒細(xì)胞類(lèi)固醇激素生成的過(guò)程及其作用... 

【文章來(lái)源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

WTl在不同階段卵泡顆粒細(xì)胞及卵泡膜中的表達(dá)A:不同直徑健康卵泡顆粒細(xì)胞中WT1和其變體的mRNA的相對(duì)表達(dá);B:健康和閉鎖卵泡顆粒細(xì)胞中WT7和其變體的mRNA的相對(duì)表達(dá);C:不同直徑健康卵泡膜?

3.2.3 WT1 在卵泡顆粒細(xì)胞和膜細(xì)胞中的定位分離牛健康小卵泡顆粒細(xì)胞和膜細(xì)胞，免疫熒光鑒定結(jié)果顯示，WT1 蛋白在顆粒細(xì)胞和膜細(xì)胞細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中均有表達(dá)，但在顆粒細(xì)胞中主要在細(xì)胞核中表達(dá)（圖 3-3A），而在膜細(xì)胞中核質(zhì)均勻表達(dá)（圖 3-3B）。

論WT1 在牛不同發(fā)育階段卵泡顆粒細(xì)胞和膜細(xì)胞中差異表達(dá)T1 在性腺發(fā)育過(guò)程中扮演著重要的角色。在卵巢中，WT1 在卵泡顆面上皮中都有表達(dá)(Pelletier et al. 1991b; Hsu et al. 1995; Chun et al. 19究表明在小鼠卵巢中腔前卵泡顆粒細(xì)胞 WT1 的表達(dá)量要高于有腔卵量(Hsu et al. 1995; Chun et al. 1999; Gao et al. 2013)，然而在牛有腔階T1 的表達(dá)變化并不清楚，此外 WT1 是否在牛卵泡膜細(xì)胞中表達(dá)也所周知，在牛一次卵泡波中，通常僅僅有一個(gè)小腔卵泡能夠發(fā)育成有腔卵泡都在小腔和中腔階段發(fā)生閉鎖。因此，本試驗(yàn)首先研究了在圖 3-3 WT1 在卵泡顆粒細(xì)胞和膜細(xì)胞中的定位A: 顆粒細(xì)胞的 WT1 免疫熒光染色； B: 膜細(xì)胞的 WT1 免疫熒光染Fig. 3-3 Localization of WT1 in GCs and TCs.munofluorescence staining of GCs incubated with anti-WT1 antibody; B: ImmunoflTCs incubated with anti-WT1 antibody. GC: granulosa cells, TC: theca c

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Effect of vitamin D3 on production of progesterone in porcine granulosa cells by regulation of steroidogenic enzymes[J]. So-Hye Hong,Jae-Eon Lee,Hong Sung Kim,Young-Jin Jung,DaeYoun Hwang,Jae Ho Lee,Seung Yun Yang,Seung-Chul Kim,Seong-Keun Cho,Beum-Soo An.  The Journal of Biomedical Research. 2016(03)
[2]Apoptosis in Granulosa cells during follicular atresia: relationship with steroids and insulin-like growth factors[J]. Yuan Song YU, Hong Shu SUI, Zheng Bin HAN, Wei LI, Ming Jiu LUO, Jing He TAN Laboratory of Animal Reproduction and Embryology College of Animal Sciences and Veterinary Medicine, Shandong Agricultural University, Taian, Shandong 271018, China Present address: College of life science. University of Beijing, Beijing, China..  Cell Research. 2004(04)



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