山羊是人類重要的經(jīng)濟(jì)家畜,主要提供肉、奶、羊絨、皮等多種產(chǎn)品。與其他山羊相比,大足黑山羊具有較高的繁殖率。大足黑山羊公羊具有性成熟早、生長(zhǎng)發(fā)育快、抗病性強(qiáng)、遺傳穩(wěn)定等特點(diǎn)。在山羊生產(chǎn)中,山羊睪丸的發(fā)育以及精子的正常發(fā)生是影響雄性繁殖性能的關(guān)鍵因素。之前的研究已經(jīng)證實(shí),lncRNAs在睪丸發(fā)育和精子發(fā)生中起著重要的調(diào)節(jié)作用。盡管lncRNAs幾乎參與基因調(diào)控的每個(gè)步驟,調(diào)控機(jī)制也很復(fù)雜多樣,但在山羊睪丸中鮮有人對(duì)其進(jìn)行測(cè)序發(fā)掘。為了探討lncRNAs在大足黑山羊睪丸中的作用,采用高通量測(cè)序方法篩選出了可能與精子發(fā)生和睪丸發(fā)育相關(guān)的lncRNA LncNONO-AS,其靶基因?yàn)镹ONO。之前有研究發(fā)現(xiàn),雄激素受體（AR）在睪丸中可能受到NONO的調(diào)控,猜想LncNONO-AS可能通過介導(dǎo)NONO的表達(dá)對(duì)AR進(jìn)行調(diào)控。為了驗(yàn)證這個(gè)猜想,本文在體外培養(yǎng)睪丸支持細(xì)胞基礎(chǔ)上,過表達(dá)、干擾、熒光定量、western blot等技術(shù)對(duì)lncRNA LncNONO-AS的功能以及可能存在的調(diào)控關(guān)系進(jìn)行驗(yàn)證,得到如下結(jié)果:1.通過測(cè)序發(fā)現(xiàn)了一條新的且組間存在差異的lncRNA LTCONS₃

【文章來源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

lncRNAs的分類Fig.1-1ClassificationoflncRNAs反義lncRNAs是由蛋白質(zhì)編碼基因的反義鏈轉(zhuǎn)錄而來，是生物體內(nèi)可以與其

第 1 章 文獻(xiàn)綜述他轉(zhuǎn)錄物序列互補(bǔ)的內(nèi)源性 lncRNAs，通過堿基配對(duì)的方式與互補(bǔ)的 RNA 形成雙鏈 RNA[19]。盡管與正義 lncRNAs 相比，反義 lncRNAs 的表達(dá)豐度更低，然而隨著測(cè)序技術(shù)的發(fā)展研究人員發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)錄物中存在著大量的反義 lncRNAs。在小鼠中發(fā)現(xiàn)有 87%的蛋白編碼基因在轉(zhuǎn)錄的同時(shí)伴隨有反義鏈的產(chǎn)生，在人類 lncRNAs 基因組中有 32%是反義 lncRNAs，表明反義 lncRNAs 在不同物種間廣泛存在[4,20]。根據(jù)作用位置的不同，反義 lncRNAs 發(fā)揮作用的方式主要分為順式調(diào)控和反式調(diào)控。在順式調(diào)控中，反義 lncRNAs 與同一 DNA 區(qū)域轉(zhuǎn)錄的基因相互作用即可以與正義鏈部分或完全重疊互補(bǔ)，從而調(diào)控正義鏈的表達(dá)。而在反式調(diào)控中，這種相互作用是與位于較遠(yuǎn)位點(diǎn)甚至是其他染色體上的基因發(fā)生的[21,22]。根據(jù)重疊的相對(duì)方向和重疊程度，發(fā)揮順式調(diào)控作用的反義 lncRNAs 又可以分為頭對(duì)頭重疊，尾對(duì)尾重疊，和完全重疊 3 種類型。頭對(duì)頭重疊：正義鏈的 5'端靠近反義鏈的 5'端并互補(bǔ)；尾對(duì)尾重疊：正義鏈的 3'端靠近反義鏈的 3'端并互補(bǔ)；完全重疊：正義鏈與反義鏈序列完全互補(bǔ)[23-25]（圖 1-2）。

西南大學(xué)碩士學(xué)位論文反義 lncRNAs 主要是在表觀遺傳層面上發(fā)揮作用。此外，反義 lncRNAs 在功能上非常多樣化[27]，幾乎在基因調(diào)控的每個(gè)層面都有作用[28]，可以作為蛋白質(zhì)編碼基因的正負(fù)調(diào)節(jié)因子[29,30]。例如，在轉(zhuǎn)錄前作為蛋白質(zhì)進(jìn)入基因組特定部分的向?qū)Вㄟ^組蛋白修飾或表觀遺傳學(xué)改變 DNA 胞嘧啶甲基化[31]；在轉(zhuǎn)錄過程中直接作為調(diào)節(jié)器控制 mRNA 的轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)[32]；以及在轉(zhuǎn)錄后通過 RNA-RNA 的相互作用改變核或質(zhì)中 mRNA 的結(jié)構(gòu)[33]（圖 1-3）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]山羊睪丸支持細(xì)胞的分離培養(yǎng)及鑒定[J]. 姜穎,潘慶杰,張欽愷,李巖,徐君君.  中國(guó)畜牧雜志. 2014(21)
[2]長(zhǎng)鏈非編碼RNA與腫瘤的關(guān)系及其臨床價(jià)值[J]. 宋皓軍,俞秀沖,夏天,郭俊明,肖丙秀.  中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào). 2012(07)
[3]天然反義轉(zhuǎn)錄物及其調(diào)控基因的表達(dá)機(jī)制[J]. 謝兆輝.  遺傳. 2010(02)

碩士論文
[1]反義鏈長(zhǎng)鏈非編碼RNA（PCNA-AS1）在原發(fā)性肝癌中的作用及分子機(jī)制研究[D]. 陶其飛.第二軍醫(yī)大學(xué) 2013
[2]腹腔鏡精索靜脈高位結(jié)扎術(shù)聯(lián)合金冷法治療精索靜脈曲張伴不育患者的療效觀察[D]. 蒙縣宗.廣西醫(yī)科大學(xué) 2010



本文編號(hào)：3282963