豬鏈球菌病（swine streptococosis）是由豬鏈球菌、馬鏈球菌獸疫亞種等多種群的鏈球菌引起豬群發(fā)病的傳染病,且該病為人畜共患病,其病原可經(jīng)破損的皮膚及呼吸道傳染給人,嚴(yán)重感染時(shí)可引起人的死亡。我國(guó)當(dāng)前疫苗對(duì)由多種病原引起的豬鏈球菌病保護(hù)不夠,調(diào)查當(dāng)?shù)刎i鏈球菌病流行病原種類和研制多效保護(hù)的亞單位疫苗很有必要。本研究分為兩部分,一是了解湖南部分規(guī)模豬場(chǎng)豬鏈球菌病病原種類。根據(jù)鏈球菌16SrRNA基因的保守序列,設(shè)計(jì)鏈球菌特異性引物、及能區(qū)分豬鏈球菌和馬鏈球菌獸疫亞種的鑒別引物；同時(shí),根據(jù)豬鏈球菌不同血清型的莢膜抗原的基因序列,設(shè)計(jì)用于檢測(cè)豬群中流行較廣的1或14型,2或1/2型、7型和9型豬鏈球菌的特異引物。對(duì)湖南部分規(guī)模豬場(chǎng)送檢的疑似患鏈球菌病的豬的病料進(jìn)行細(xì)菌的分離鑒定,用上述引物對(duì)分離的細(xì)菌進(jìn)行PCR檢測(cè)。結(jié)果顯示,共分離到豬鏈球菌24株、馬鏈球菌獸疫亞種1株、鏈球菌屬其它種4株及其他菌屬細(xì)菌7株。其中豬鏈球菌2型9株、9型4株和其它血清型豬鏈球菌11株。以上結(jié)果表明,不僅是多種血清型的豬鏈球菌、馬鏈球菌獸疫亞種,還有多種鏈球菌及其他屬細(xì)菌會(huì)引起豬鏈球菌病的發(fā)生。二是對(duì)... 

【文章來(lái)源】：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)湖南省

【文章頁(yè)數(shù)】：58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 豬鏈球菌病的研究概況
    1 病原學(xué)與分類
    2 流行病學(xué)
    3 毒力因子
    4 綜合防治
第二章 湖南部分規(guī)模豬場(chǎng)鏈球菌的分離鑒定與流行病學(xué)調(diào)查
    1 材料與方法
        1.1 病料樣本
        1.2 主要試劑
        1.3 細(xì)菌分離培養(yǎng)
        1.4 引物設(shè)計(jì)與合成
        1.5 疑似鏈球菌的PCR鑒定
        1.6 鏈球菌的的種屬及血清型鑒定
        1.7 序列分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 鏈球菌的分離鑒定結(jié)果
        2.2 PCP擴(kuò)增與凝膠電泳結(jié)果
        2.3 豬鏈球菌分型檢測(cè)結(jié)果
    3 討論
    4 小結(jié)
第三章 馬鏈球菌獸疫亞種znuA等蛋白基因的克隆、表達(dá)與免疫原性分析
    1 材料與方法
        1.1 質(zhì)粒與菌株
        1.2 主要耗材與試劑
        1.3 引物的設(shè)計(jì)與合成
        1.4 PCR擴(kuò)增
        1.5 pET28載體克隆與基因測(cè)序
        1.6 重組表達(dá)載體的構(gòu)建及鑒定
        1.7 重組表達(dá)菌誘導(dǎo)表達(dá)及SDS-PAGE鑒定
        1.8 目的蛋白純化
        1.9 重組蛋白Western Blot分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 基因的選擇和生物信息預(yù)測(cè)
        2.2 PCR擴(kuò)增
        2.3 重組表達(dá)菌誘導(dǎo)表達(dá)及SDS-PAGE鑒定
        2.4 目的蛋白純化
        2.5 重組蛋白的Western-blot分析結(jié)果
    3 討論
    4 小結(jié)
第四章 馬鏈球菌獸疫亞種6種蛋白對(duì)小鼠免疫保護(hù)的評(píng)價(jià)
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 主要試劑與耗材
        1.3 細(xì)菌濃度的測(cè)定和活菌計(jì)數(shù)
        1.4 小鼠半數(shù)致死濃度的測(cè)定
        1.5 疫苗的配制
        1.6 小鼠免疫試驗(yàn)一
        1.7 小鼠免疫試驗(yàn)二
        1.8 免疫組的SEZ攻毒試驗(yàn)
    2 結(jié)果與分析
        2.1 細(xì)菌濃度的測(cè)定和活菌計(jì)數(shù)
        2.2 小鼠半數(shù)致死濃度的測(cè)定
        2.3 臨床觀察與病原菌的分離鑒定
        2.4 免疫組的攻毒試驗(yàn)結(jié)果
        2.5 混合蛋白免疫組的攻毒試驗(yàn)結(jié)果
    3 討論
    4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
符號(hào)說(shuō)明
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]SLY蛋白與2型豬鏈球菌感染[D]. 賀政新.中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院 2009
[2]中國(guó)部分地區(qū)豬鏈球菌遺傳背景及進(jìn)化關(guān)系研究[D]. 蔡振鴻.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007



本文編號(hào)：3280023