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高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒HuN4株GP3單克隆抗體的制備及其抗原表位的鑒定

發(fā)布時間:2021-07-12 11:38
  為制備抗高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒(H P-PRRSV)G P3株的單克隆抗體(M A b),本研究將H P-PRRSV H uN 4株免疫BA LB/c小鼠,以該病毒感染的細(xì)胞及真核表達(dá)的G P3蛋白為檢測抗原,經(jīng)間接免疫熒光(IFA)篩選獲得了一株穩(wěn)定分泌M A b的細(xì)胞株,命名為4G 5?贵w亞類鑒定重鏈類型為IgG 1,輕鏈類型為κ。該M A b細(xì)胞培養(yǎng)上清及腹水IFA效價分別為1∶256和1∶1 280。IFA結(jié)果顯示,MAb4G5能夠識別CH-1R、JXA1-R、HP-PRRSVHuN4株及其疫苗株HuN4-F112,而不識別RespPRRS M LV病毒株。Western blot結(jié)果顯示,4G5與HP-PRRSVHuN4株及原核表達(dá)的GP3蛋白均可以反應(yīng),表明其針對的抗原表位為線性表位,中和試驗結(jié)果顯示該M A b無中和活性。通過截短表達(dá)GP3蛋白鑒定該M A b抗原表位識別序列為74W CRIGHD RCS83。本研究獲得的M A b為進(jìn)一步研究HP-PRRSV GP3蛋白的結(jié)構(gòu)及功能奠定了基礎(chǔ)。 

【文章來源】:中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2013,35(06)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:5 頁

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]豬繁殖與呼吸綜合征病毒ORF3基因的表達(dá)及其單克隆抗體的制備[J]. 劉金霞,周艷君,安同慶,仇華吉,王云峰,童光志.  中國獸醫(yī)學(xué)報. 2007(05)
[2]從疑似PRRS流產(chǎn)胎兒分離PRRSV的研究[J]. 郭寶清,陳章水,劉文興,崔益洙.  中國畜禽傳染病. 1996(02)



本文編號:3279843

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