細胞異質(zhì)性在很多生命活動中普遍存在,即使細胞群體含有相同的基因型,甚至來源于同一個克隆,它們都存在異質(zhì)性,如單細胞生物中呈現(xiàn)的形態(tài)各異、高等生物存在的細胞極性分化、細胞離體培養(yǎng)常有的表型差異、生長差異和周期差異等。細胞異質(zhì)性是不同功能表型的混合細胞群體以一種動態(tài)平衡的方式存在,然后在不同狀態(tài)下經(jīng)歷表型的轉(zhuǎn)變。細胞異質(zhì)性可由內(nèi)在因素引起,如基因組轉(zhuǎn)錄和翻譯的隨機突變、基因型和表觀遺傳控制的細胞形態(tài)轉(zhuǎn)變等,也可能由外在因素引起,如環(huán)境的改變導(dǎo)致相應(yīng)的適應(yīng)性轉(zhuǎn)變。然而,無論內(nèi)在還是外在因素引起的細胞異質(zhì)性都不同程度地影響病毒感染。深入研究細胞異質(zhì)性的形成和轉(zhuǎn)變機制,對揭示病毒感染促進或制約宿主細胞異質(zhì)性形成機理,探討病毒感染的發(fā)生、發(fā)展規(guī)律具有重要的科學(xué)意義和廣泛的應(yīng)用價值。本文首先通過噬斑純化的方法純化了野生型以及形成持續(xù)感染的口蹄疫病毒株,并對其噬斑形成能力進行對比,證明持續(xù)感染病毒的噬斑形成能力比野生型口蹄疫病毒弱,進一步對這兩種病毒的全基因組開放式閱讀框序列進行測序,比對結(jié)果發(fā)現(xiàn)持續(xù)感染的口蹄疫病毒共發(fā)生了 34個氨基酸突變,其中VP1蛋白突變率最高,占總突變率的32.35%。持續(xù)感... 

【文章來源】：武漢大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：116 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１－１．?ＦＭＤＶ的基因組和病毒的結(jié)構(gòu)示意圖（Ｊａｍａｌ?ａｎｄ?Ｂｅｌｓｈａｍ，?２０１３）??

表２－１蝕斑計數(shù)表??病毒稀釋度?第一組?第二組?第三組?平均數(shù)??（ＰＦＵ）?（ＰＦＵ）?（ＰＦＵ）??１〇－３?無法計數(shù)?無法計數(shù)?無法計數(shù)?－??１０４?４１?２７?４４?４１??１０５?４?４?８?５．４??Ｎｅｇａｔｉｖｅ?０?０?０?０??同樣�。欤恚斓牟《驹哼M行ＴＣＩＤ５〇試驗，如表２－２所示，統(tǒng)計出不同稀釋度??病毒液細胞發(fā)生ＣＰＥ的陽性率，通過公式計算：??ｌｇＴＣＩＤ５０＝－５＋?（１０００／〇－５０％）?／?（１００％－２５０／〇）?ｘ?（－１）?＝－５．７??３２??

武漢大學(xué)博士學(xué)位論文??２．３．３比較持續(xù)感染及野生型口蹄疫病毒的噬斑形成能力??將純化后擴增的ＦＭＤＶ－Ｏｐ４３及ｗｔ?ＦＭＤＶ再次進行噬斑試驗驗證其噬斑形成??能力。結(jié)果顯示，病毒感染２４ｈ后，相同稀釋度的ｗｔＦＭＤＶ大、小噬斑病毒形成??的噬斑大小并無明顯差異，而挑取的持續(xù)感染病毒大噬斑和小噬斑病毒并未形成??噬斑；直至病毒感染３６ｈ，持續(xù)感染病毒的大噬斑和小噬斑病毒才產(chǎn)生明顯的噬斑，??并且大噬斑病毒形成的噬斑比小噻斑病毒形成的噬斑大，而ｗｔ?ＦＭＤＶ在該時間點??形成的噬斑則更大（圖２－３）。結(jié)果表明持續(xù)感染病毒的噬斑形成能力比野生型??ＦＭＤＶ弱，即持續(xù)感染病毒的殺細胞能力較弱。ＦＭＤＶ持續(xù)感染細胞可能是由于??ＦＭＤＶ－Ｏｐ裂解細胞能力弱，增加了細胞存活率而形成的。??－－＾＇／＇


本文編號：3272386