間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cells, MSCs）是一類具有高度增殖、自我更新和多向分化潛能的細(xì)胞。對(duì)許多物種的研究證明這類干細(xì)胞在體外可分化為多種細(xì)胞表型，是未來(lái)細(xì)胞、基因治療、組織工程的理想種子細(xì)胞之一。目前尚未見綿羊尤其是蒙古綿羊間充質(zhì)干細(xì)胞的研究報(bào)道。本研究旨在建立蒙古羊骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（Bone Marrow-derived Mesenchymal Stem Cells，BMSCs）和脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞（Adipose-derived Mesenchymal Stem Cells,ADSCs）系，了解其生物學(xué)特征，并在體外進(jìn)行成脂、成骨和軟骨誘導(dǎo)分化與鑒定，為今后利用這類間充質(zhì)干細(xì)胞作為疾病細(xì)胞、基因治療的模型，以及將其作為體細(xì)胞克隆核供體的研究奠定必要的基礎(chǔ)。本文以成年蒙古綿羊?yàn)閷?shí)驗(yàn)對(duì)象，采集股骨骨髓和腎臟外圍脂肪組織，采用密度梯度離心法和膠原酶消化法獲得骨髓和脂肪間充質(zhì)細(xì)胞，系統(tǒng)地研究了其生物學(xué)特性以及體外誘導(dǎo)分化能力。主要結(jié)果如下：1、分離得到的蒙古羊BMSCs和ADSCs形態(tài)均呈現(xiàn)長(zhǎng)梭形，易形成細(xì)胞集落。二者生長(zhǎng)曲線都表現(xiàn)為S形。經(jīng)計(jì)算其細(xì)胞倍增時(shí)... 

【文章來(lái)源】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：51 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

蒙古羊骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞形態(tài)

少量血細(xì)胞相混雜；48h后少量細(xì)胞貼壁，形態(tài)不規(guī)則。3d后貼壁細(xì)胞增多，4d后細(xì)胞集落形成，6d后細(xì)胞集落增多，細(xì)胞多呈長(zhǎng)梭形及多角形，并逐漸融合成片狀（圖1A圖2A），9d后細(xì)胞相互融合基本鋪滿孔底, 呈旋渦狀排列可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞增殖迅速，呈放射狀向周圍拓展，逐漸與鄰近集落相互匯合。P3代后的細(xì)胞形態(tài)基本一致，生長(zhǎng)細(xì)胞為均一長(zhǎng)梭形，6-7d細(xì)胞再次達(dá)80%匯合（圖1B圖2D）。

的規(guī)則的集落。2.2.2 MSCs 的倍增時(shí)間蒙古羊MSCs生長(zhǎng)曲線呈S型（圖3-4），P1、P3、P10分別為傳代培養(yǎng)第1代、第3代及第10代。三者生長(zhǎng)曲線形態(tài)基本一致，生長(zhǎng)速度差異不大，均表現(xiàn)為：1-2d為潛伏期，生長(zhǎng)較慢；3d后進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，步入快速增長(zhǎng)期；7-8d為平臺(tái)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]奶山羊胎兒成纖維細(xì)胞的分離培養(yǎng)及脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染研究[J]. 張艷麗,許丹,龐訓(xùn)勝,萬(wàn)永杰,王子玉,孟立,宋輝,王鋒.  南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2010(01)
[2]兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為軟骨組織的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 黃定強(qiáng),梁傳余,王力紅,劉世喜,李勝富.  臨床耳鼻咽喉科雜志. 2005(04)
[3]造血基質(zhì)干細(xì)胞的研究Ⅱ.異位移植骨髓的造血重建[J]. 范洪學(xué),劉及.  白求恩醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 1989(02)

博士論文
[1]骨髓與脂肪間質(zhì)干細(xì)胞分離與誘導(dǎo)分化為成骨細(xì)胞的研究[D]. 馬勇江.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2004
[2]成人MSC誘導(dǎo)分化為骨和軟骨細(xì)胞及與胎兒MSC間差異表達(dá)基因的篩選[D]. 楊莉.重慶醫(yī)科大學(xué) 2001



本文編號(hào)：3270417