鎘（Cd）是環(huán)境中常見的蓄積性重金屬毒物,能造成機(jī)體多系統(tǒng)和多器官的損傷。大腦是Cd毒性作用的重要靶器官之一,Cd可以引起血腦屏障功能障礙,進(jìn)入腦組織引起神經(jīng)元凋亡。死亡受體通路是細(xì)胞經(jīng)典凋亡通路之一,Fas/FasL信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是主要死亡受體通路之一。有研究表明,Fas/FasL信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路可介導(dǎo)線粒體通路引起細(xì)胞凋亡。本課題組前期研究結(jié)果表明,Cd可經(jīng)線粒體通路引起細(xì)胞凋亡,但Fas/FasL信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在Cd致神經(jīng)細(xì)胞凋亡中的作用及對線粒體通路調(diào)控機(jī)制尚未闡明。本研究以原代大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)元和PC-12細(xì)胞為模型,通過體外試驗探討了Fas/FasL信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在Cd誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞凋亡中的作用及對線粒體凋亡通路的調(diào)控機(jī)制,并研究了N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）在上述過程中的保護(hù)作用。1. Fas/FasL信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在鎘致神經(jīng)細(xì)胞凋亡中的作用為研究Cd對神經(jīng)細(xì)胞Fas/FasL信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響,本試驗以原代大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)元和PC-12細(xì)胞為模型,用不同濃度（0、5、10、20μmol/L）醋酸鎘（CdAc2）處理原代大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)元和PC-12細(xì)胞不同時間（0、6、12、24... 

【文章來源】：揚(yáng)州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語
第一部分 文獻(xiàn)綜述
    第一章 鎘神經(jīng)毒性研究進(jìn)展
        1 鎘的危害
        2 鎘的神經(jīng)毒性
    第二章 Fas/FasL信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路研究進(jìn)展
        1 Fas/FasL信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路
            1.1 FasL
            1.2 Fas
            1.3 FADD
            1.4 半胱氨酸天冬酶-8
        2 Fas/FasL信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與線粒體通路
    第三章 NAC與細(xì)胞凋亡
        1 NAC的特性及抗氧化作用機(jī)制
        2 NAC對凋亡的保護(hù)效應(yīng)
    本研究的目的和意義
第二部分 試驗研究
    第一章 Fas/FasL信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在鎘致神經(jīng)細(xì)胞凋亡中的作用
        1 材料與方法
            1.1 實驗動物
            1.2 實驗細(xì)胞株
            1.3 主要試劑
            1.4 主要儀器
            1.5 主要溶液的配置
            1.6 大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)元(原代神經(jīng)細(xì)胞)的分離與培養(yǎng)
            1.7 PC-12細(xì)胞的培養(yǎng)
            1.8 流式細(xì)胞儀測定
            1.9 Hochest33258染色
            1.10 AnnexinV-FITC熒光染色
            1.11 western blot檢測
            1.12 統(tǒng)計學(xué)分析
        2 結(jié)果
            2.1 鎘處理神經(jīng)細(xì)胞不同時間對Fas/FasL信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路相關(guān)蛋白的影響
            2.2 不同濃度鎘處理神經(jīng)細(xì)胞對Fas/FasL信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路相關(guān)蛋白的影響
            2.3 鎘與Z-IETD-FMK對神經(jīng)細(xì)胞凋亡率的影響
            2.4 鎘與Anti-FasL對神經(jīng)細(xì)胞凋亡率的影響
        3 討論
    第二章 Fas/FasL信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在鎘致神經(jīng)細(xì)胞凋亡線粒體通路中的作用
        1 材料與方法
            1.1 實驗動物
            1.2 實驗細(xì)胞株
            1.3 主要試劑
            1.4 主要儀器
            1.5 大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)元(原代神經(jīng)細(xì)胞)的分離與培養(yǎng)
            1.6 PC-12細(xì)胞的培養(yǎng)
            1.7 線粒體膜電位檢測
            1.8 線粒體與胞漿蛋白的制備
            1.9 western blot檢測
        2 結(jié)果
            2.1 鎘與Z-IETD-FMK對神經(jīng)細(xì)胞BID活化的影響
            2.2 鎘與Z-IETD-FMK對神經(jīng)細(xì)胞Bax和Bcl-2蛋白表達(dá)的影響
            2.3 鎘與Z-IETD-FMK對神經(jīng)細(xì)胞線粒體膜電位的影響
            2.4 鎘與Z-IETD-FMK對神經(jīng)細(xì)胞cyt c釋放的影響
            2.5 鎘與Z-IETD-FMK對神經(jīng)細(xì)胞caspase-9、caspase-3和PARP蛋白活化的影響
            2.6 鎘與Anti-FasL對神經(jīng)細(xì)胞caspase-9、caspase-3和PARP蛋白活化的影響
        3 討論
    第三章 NAC對鎘誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞凋亡Fas/FasL信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的保護(hù)作用
        1 材料與方法
            1.1 實驗動物
            1.2 實驗細(xì)胞株
            1.3 主要試劑
            1.4 主要儀器
            1.5 主要溶液的配置
            1.6 PC-12細(xì)胞的培養(yǎng)
            1.7 流式細(xì)胞儀
            1.8 Hochest 33258染色
            1.9 western blot檢測
            1.10 統(tǒng)計學(xué)分析
        2 結(jié)果
            2.1 鎘與NAC對神經(jīng)細(xì)胞凋亡率的影響
            2.2 NAC對鎘致神經(jīng)細(xì)胞凋亡Fas/FasL信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路相關(guān)蛋白的保護(hù)作用
        3 討論
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]鎘對大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞的氧化損傷及N-乙酰半胱氨酸的保護(hù)效應(yīng)[J]. 袁燕,劉學(xué)忠,卞建春,張英,孫婭,柴文嫻,閆汶,劉宗平.  中國獸醫(yī)學(xué)報. 2011(03)
[2]鎘致大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞凋亡的機(jī)理及N-乙酰半胱氨酸的保護(hù)作用[J]. 袁燕,張英,卞建春,劉學(xué)忠,李丹,孫婭,劉宗平.  中國獸醫(yī)學(xué)報. 2010(08)
[3]鉛鎘聯(lián)合染毒對大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞的氧化損傷及NAC的保護(hù)效應(yīng)[J]. 卞建春,路浩,梅莉,達(dá)劍森,張英,劉宗平.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2008(09)
[4]母鼠妊娠期鉛鎘聯(lián)合暴露對仔鼠腦組織的氧化損傷及乙酰半胱氨酸的保護(hù)效應(yīng)[J]. 路浩,達(dá)劍森,梅莉,張英,王林,卓麗玲,劉宗平.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2008(01)
[5]N-乙酰半胱氨酸對慢性間歇缺氧大鼠海馬神經(jīng)元凋亡及氧化應(yīng)激的影響[J]. 劉輝國,張志鋒,高永平,張珍祥,牛汝楫.  中國病理生理雜志. 2008(01)
[6]N-乙酰半胱氨酸對缺氧缺血性腦病新生鼠腦細(xì)胞凋亡的干預(yù)效果[J]. 羅有同,肖昕.  武警醫(yī)學(xué). 2004(09)
[7]PC12細(xì)胞APE/ref-1cDNA的克隆和表達(dá)[J]. 謝振華,王愛民,劉長振,馬春.  中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報. 2001(05)
[8]環(huán)境鎘污染所致健康危害判定標(biāo)準(zhǔn)的研究[J]. 蔡詩文,岳麟,袁一傲,徐兆發(fā),孔慶瑚,尚琪.  環(huán)境與健康雜志. 1994(03)

博士論文
[1]鎘致大鼠神經(jīng)細(xì)胞凋亡的線粒體途徑及NAC的保護(hù)作用[D]. 江辰陽.揚(yáng)州大學(xué) 2014
[2]鎘對大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞毒性損傷的機(jī)制[D]. 袁燕.揚(yáng)州大學(xué) 2012
[3]鉛鎘聯(lián)合對新生大鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)的毒性損傷及NAC保護(hù)效應(yīng)的研究[D]. 路浩.揚(yáng)州大學(xué) 2008
[4]GSH對氧自由基介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡保護(hù)機(jī)制研究[D]. 張菁.天津醫(yī)科大學(xué) 2002

碩士論文
[1]鎘激活mTOR通路誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞凋亡及NAC的保護(hù)效應(yīng)[D]. 胡飛飛.揚(yáng)州大學(xué) 2014



本文編號：3269798