發(fā)布時(shí)間：2021-07-06 11:14

　　肌肉生長是由許多因子共同調(diào)節(jié)的復(fù)雜生化過程，肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2C（myocyteenhancer factor2C, MEF2C）是一類在肌肉發(fā)育中發(fā)揮關(guān)鍵作用的轉(zhuǎn)錄因子。MEF2C基因可以通過同源或異源二聚體結(jié)合到肌肉特異性基因控制區(qū)域的A/T富集序列來激活肌肉基因表達(dá)，也可以通過其DNA結(jié)合域與其他因子互作來調(diào)控骨骼肌發(fā)育。MEF2C基因?qū)τ诩∪獍l(fā)育至關(guān)重要。然而，目前關(guān)于MEF2C基因的研究主要集中在人和小鼠骨骼肌和心肌的發(fā)生機(jī)制上，在畜禽中相關(guān)研究還很少。本研究通過生物信息學(xué)分析、測(cè)序和分子生物學(xué)等技術(shù)方法，對(duì)牛MEF2C基因的結(jié)構(gòu)、遺傳變異和組織表達(dá)等進(jìn)行研究。初步探究牛MEF2C基因在肌肉發(fā)生中的作用，揭示對(duì)黃牛重要生長性狀有顯著效應(yīng)的分子標(biāo)記，為進(jìn)一步改良我國黃牛品種的經(jīng)濟(jì)性狀提供理論基礎(chǔ)。本研究的主要成果如下：1.黃牛MEF2C基因遺傳變異研究本試驗(yàn)首先通過DNA池測(cè)序和限制性片段長度多態(tài)性聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（ForcedPCR-RFLP）技術(shù)鑒定和檢測(cè)了MEF2C基因在5個(gè)中國黃牛品種及其雜交群共1095頭黃牛中的遺傳變異。發(fā)現(xiàn)了4個(gè)位于內(nèi)含子中的多態(tài)位點(diǎn)，分別命名為SNP... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

�；蚪MDNA的電泳檢測(cè)Fig.2-1ElectrophoresisdetectofgenomicDNA

圖 2-1 �；蚪M DNA 的電泳檢測(cè)Fig. 2-1 Electrophoresis detect of genomic DNA2.2.2 牛 MEF2C 基因 SNP 位點(diǎn)鑒定以 DNA 池為模板，擴(kuò)增了牛 MEF2C 基因 11 個(gè)外顯子。擴(kuò)增產(chǎn)物測(cè)序后，用相關(guān)生物軟件（Chromas）將測(cè)序結(jié)果與權(quán)威數(shù)據(jù)庫中提供的 MEF2C 基因原序列比對(duì)后，發(fā)現(xiàn) 4 個(gè)較為明顯的單核苷酸突變，分別位于第 1、第 3 和第 4 內(nèi)含子中。其中，SNP 1（g.T96732C）位于第 4 內(nèi)含子，SNP 2（g.C76904T）和 SNP 3（g.G76992T）位于第 3內(nèi)含子中，SNP 4（g.A18286C）位于第 1 內(nèi)含子中（圖 2-2）。SNP 1(g.T96732C) SNP2 (g.C76904T)

圖 2-3 4 個(gè)突變位點(diǎn) PCR-RFLP 凝膠電泳類型Fig. 2-3 Electrophoresis patterns of PCR-RFLP analysis at four loci MEF2C 基因遺傳變異的群體遺傳學(xué)分析在一個(gè)群體中，保持基因的遺傳多樣性，其實(shí)質(zhì)即保持群體中所擁有的基因種類數(shù)，于品種資源的保護(hù)和育種工作的改進(jìn)非常重要。因此，為了有效評(píng)估分析群體的遺樣性，根據(jù) MEF2C 基因 4 個(gè) SNPs 位點(diǎn)基因分型結(jié)果，利用一些數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)和分析，計(jì)算出相關(guān)遺傳多樣性指數(shù)（Nei 1973），結(jié)果如表 2-6 中所示�；蛐秃偷任换蝾l率分析表明，在秦川牛和郟縣紅牛群體中，SNP 1-C-TC，SNPCC，SNP 3-G-GG，SNP 4-A-AA 分別在所屬位點(diǎn)中比其他等位基因和基因型頻率高，屬位點(diǎn)中為主導(dǎo)基因和基因型。依據(jù)多態(tài)信息含量（polymorphism informationent,PIC）等級(jí)劃分（Botstein et al. 1980），除了 SNP 3 位點(diǎn)在郟縣紅牛群體中為低度多態(tài)性（PIC<0.25）外，SNP 1、SNP 2 和 SNP 3 在秦川牛和郟縣紅牛中屬于中度性（0.25<PIC<0.50）。而 SNP 4 位點(diǎn)在兩個(gè)群體中屬于低度多態(tài)性（PIC<0.25）。根2檢驗(yàn)，4 個(gè)位點(diǎn)的基因型頻率在秦川牛和郟縣紅牛中符合哈代-溫伯格平衡0.05）。在遺傳指數(shù)分析中，4 位點(diǎn)的基因的純合度（heterozygosity,Ho）都大于 0.5，

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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[2]黃牛能量平衡調(diào)控候選基因遺傳變異及其與生長性狀相關(guān)分析[D]. 張春雷.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2007

碩士論文
[1]西雜牛PPARγ2、PGC-1α、MEF2C基因表達(dá)量及其與肌內(nèi)脂肪含量、嫩度的相關(guān)分析[D]. 李健.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[2]涼山半細(xì)毛羊Mef2A、Mef2C基因克隆與組織時(shí)空表達(dá)[D]. 吳忠海.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[3]黃牛NPM1、SREBP1c基因的克隆、SNPs檢測(cè)及其與生長性狀的關(guān)系[D]. 黃永震.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2010
[4]豬MEF2C和MEF2D基因定位及MEF2C基因的表達(dá)研究[D]. 吳俊紅.浙江大學(xué) 2009
[5]豬骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的培養(yǎng)、鑒定及豬MEF2B和MEF2C基因的初步研究[D]. 何波.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006



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