偽狂犬�。≒seudorabies, PR）又名奧耶茲氏病,是由豬皰疹病毒1型（Suid herpesvirus1, SuHV-1）亦稱偽狂犬病病毒（Pseudorabies virus, PRV）引起的豬、牛、羊等多種家畜及野生動物的一種烈性傳染病,其主要特征為奇癢、發(fā)熱、腦脊髓炎、呼吸系統(tǒng)和神經系統(tǒng)障礙。豬是其主要的宿主和傳染源。目前,免疫接種經典PRV Bartha-K61弱毒疫苗是防控偽狂犬病的有效途徑之一。然而,近年來在我國很多地區(qū)的偽狂犬病疫苗免疫豬群中接連爆發(fā)了新的偽狂犬病疫情。研究表明,現行的Bartha-K61疫苗株不能對當前流行的PRV變異株提供完全免疫保護,并且PRV變異株還在繼續(xù)流行,感染和發(fā)病豬場將進一步增多。因此,研制針對PRV變異株的疫苗十分緊迫。本研究從天津某免疫過PR疫苗豬場的發(fā)病仔豬腦組織中分離到了一株PRV變異株（命名為PRV TJ株）。經序列比對分析,該毒株與近年來分離的PRV流行毒株位于進化樹的一個獨立分支,與經典強毒株PRV Kaplan株和Becker株的親緣關系較遠,其gE基因和gI基因序列均發(fā)生了氨基酸的突變、插入與缺失。豬和綿羊免疫攻... 

【文章來源】：中國農業(yè)科學院北京市

【文章頁數】：55 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

PRV的病毒粒子結構示意圖（引自Pomeranzetal.,2005)

別擴增左右同源重組臂（L和R),然后將L、11片段通過^：00111和義^^^?1限制性酶切位點克隆pOK12載體上，再選用合適的限制性內切酶對其進行酵切鑒定，陽性質粒命名為pOK-LR (圖2)?擴增左右同源重組臂的PCR反應參數為：95°C預變性5 min, 95°C變性30 s, 61.rC退火30 s,°C延伸90 s,進行30個循環(huán)后72°C再延伸10 min。

再選用合適的限制性內切酶對其進行酵切鑒定，陽性質粒命名為pOK-LR (圖2.2)?擴增左右同源重組臂的PCR反應參數為：95°C預變性5 min, 95°C變性30 s, 61.rC退火30 s,72°C延伸90 s,進行30個循環(huán)后72°C再延伸10 min。^ ■ gD、 、 gE , Ug9 UsgPRV SC strain PRV Bartha-K61 strain圖2.1PRVBartha-K61株基因組缺失片段的位置示意圖（弓I自彭金美等，2008)Fig. 2.1 Schematic diagram of the deletion location in the genome of PRV Bartha-K61 strain(from Peng et al., 2008)12

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]變異豬偽狂犬病毒的分離鑒定及生物學特性分析[D]. 張青占.中國農業(yè)科學院 2013
[2]含GFP報告基因的偽狂犬病病毒Ea株gG基因缺失重組病毒的構建[D]. 王鑫.河南農業(yè)大學 2008
[3]偽狂犬病病毒上海株TK基因缺失株的構建及其生物學特性初步研究[D]. 蘇鑫銘.南京農業(yè)大學 2003



本文編號：3266064