偽狂犬�。≒seudorabies, PR）又名奧耶茲氏病,是由豬皰疹病毒1型（Suid herpesvirus1, SuHV-1）亦稱偽狂犬病病毒（Pseudorabies virus, PRV）引起的豬、牛、羊等多種家畜及野生動(dòng)物的一種烈性傳染病,其主要特征為奇癢、發(fā)熱、腦脊髓炎、呼吸系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)障礙。豬是其主要的宿主和傳染源。目前,免疫接種經(jīng)典PRV Bartha-K61弱毒疫苗是防控偽狂犬病的有效途徑之一。然而,近年來(lái)在我國(guó)很多地區(qū)的偽狂犬病疫苗免疫豬群中接連爆發(fā)了新的偽狂犬病疫情。研究表明,現(xiàn)行的Bartha-K61疫苗株不能對(duì)當(dāng)前流行的PRV變異株提供完全免疫保護(hù),并且PRV變異株還在繼續(xù)流行,感染和發(fā)病豬場(chǎng)將進(jìn)一步增多。因此,研制針對(duì)PRV變異株的疫苗十分緊迫。本研究從天津某免疫過(guò)PR疫苗豬場(chǎng)的發(fā)病仔豬腦組織中分離到了一株P(guān)RV變異株（命名為PRV TJ株）。經(jīng)序列比對(duì)分析,該毒株與近年來(lái)分離的PRV流行毒株位于進(jìn)化樹(shù)的一個(gè)獨(dú)立分支,與經(jīng)典強(qiáng)毒株P(guān)RV Kaplan株和Becker株的親緣關(guān)系較遠(yuǎn),其gE基因和gI基因序列均發(fā)生了氨基酸的突變、插入與缺失。豬和綿羊免疫攻... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁(yè)數(shù)】：55 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

PRV的病毒粒子結(jié)構(gòu)示意圖（引自Pomeranzetal.,2005)

別擴(kuò)增左右同源重組臂（L和R),然后將L、11片段通過(guò)^：00111和義^^^?1限制性酶切位點(diǎn)克隆pOK12載體上，再選用合適的限制性內(nèi)切酶對(duì)其進(jìn)行酵切鑒定，陽(yáng)性質(zhì)粒命名為pOK-LR (圖2)?擴(kuò)增左右同源重組臂的PCR反應(yīng)參數(shù)為：95°C預(yù)變性5 min, 95°C變性30 s, 61.rC退火30 s,°C延伸90 s,進(jìn)行30個(gè)循環(huán)后72°C再延伸10 min。

再選用合適的限制性內(nèi)切酶對(duì)其進(jìn)行酵切鑒定，陽(yáng)性質(zhì)粒命名為pOK-LR (圖2.2)?擴(kuò)增左右同源重組臂的PCR反應(yīng)參數(shù)為：95°C預(yù)變性5 min, 95°C變性30 s, 61.rC退火30 s,72°C延伸90 s,進(jìn)行30個(gè)循環(huán)后72°C再延伸10 min。^ ■ gD、 、 gE , Ug9 UsgPRV SC strain PRV Bartha-K61 strain圖2.1PRVBartha-K61株基因組缺失片段的位置示意圖（弓I自彭金美等，2008)Fig. 2.1 Schematic diagram of the deletion location in the genome of PRV Bartha-K61 strain(from Peng et al., 2008)12

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]豬偽狂犬病不同佐劑滅活疫苗對(duì)兔免疫原性初探[J]. 舒銀輝,黃文輝,饒清宜,鄭良益,漆世華,王桂桂,吳玉石,祝春花,楊思誼,楊雷.  中國(guó)獸藥雜志. 2011(12)
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[6]豬偽狂犬病病毒豬圓環(huán)病毒Ⅱ型副豬嗜血桿菌和豬巴氏桿菌混合感染的診治[J]. 黃小波,曹三杰,劉伍梅,陳朝紅.  中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2009(01)
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[8]豬瘟、豬偽狂犬病和鏈球菌病混合感染的診療[J]. 劉成.  養(yǎng)豬. 2006(06)
[9]仔豬偽狂犬病與弓形體病混合感染的診斷和防制[J]. 許中山.  福建畜牧獸醫(yī). 2005(05)
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碩士論文
[1]變異豬偽狂犬病毒的分離鑒定及生物學(xué)特性分析[D]. 張青占.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2013
[2]含GFP報(bào)告基因的偽狂犬病病毒Ea株gG基因缺失重組病毒的構(gòu)建[D]. 王鑫.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[3]偽狂犬病病毒上海株TK基因缺失株的構(gòu)建及其生物學(xué)特性初步研究[D]. 蘇鑫銘.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2003



本文編號(hào)：3266064