江蘇部分地區(qū)致初生仔豬腹瀉大腸桿菌的分離鑒定及O24 ETEC分離株人工感染試驗(yàn)
發(fā)布時(shí)間:2021-07-01 16:02
產(chǎn)腸毒素大腸桿菌(ETEC)是引起新生仔豬腹瀉的重要病原,一直是養(yǎng)豬業(yè)的困擾,給養(yǎng)豬業(yè)造成一定的經(jīng)濟(jì)損失。我們于2013-2014年在江蘇部分養(yǎng)豬地區(qū)及其周邊地區(qū),從臨診上疑似致初生仔豬腹瀉(黃、白痢)的直腸棉拭及病死豬的十二指腸、空腸和回腸共分離鑒定出397株大腸桿菌,并對(duì)其血清型、腸毒素類型及黏附素類型進(jìn)行鑒定。1江蘇部分地區(qū)及周邊地區(qū)致初生仔豬腹瀉大腸桿菌的分離鑒定本試驗(yàn)共分離出397株致初生仔豬腹瀉大腸桿菌,其中64株未定型,5株自凝,328株大腸桿菌O血清型定型,定型菌株共覆蓋了38種O血清型,其中以024、0101、0141、055、020和0149為主,共252株,占本研究定型菌株的76.83%(252/328),為本研究致初生仔豬腹瀉大腸桿菌的主要流行血清型。本研究分離鑒定出的主要血清型中的024、055和0105在以往報(bào)道的初生仔豬腹瀉大腸桿菌常見血清型中很少出現(xiàn),可見024、055和0105有成為江蘇地區(qū)致仔豬腹瀉大腸桿菌主要O血清型的趨勢(shì)。采用多重PCR對(duì)397株大腸桿菌分離株進(jìn)行五種毒素基因(sta、stb、lt、stx2e、eaeA)的檢測(cè)。結(jié)果顯示:397株...
【文章來源】:揚(yáng)州大學(xué)江蘇省
【文章頁數(shù)】:72 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
符號(hào)說明
文獻(xiàn)綜述
1 致病性大腸桿菌引起的新生仔豬腹瀉
1.1 致病性大腸桿菌引起的仔豬黃痢
1.2 致病性大腸桿菌引起的仔豬白痢
1.3. 致仔豬腹瀉大腸桿菌病的預(yù)防
1.4 ETEC疫苗
2 致初生仔豬腹瀉的大腸桿菌病原生物特性
2.1 大腸桿菌的一般特性
2.2 大腸桿菌主要抗原及血清學(xué)特性
2.3 大腸桿菌的分類及致病性
3 致新生仔豬腹瀉大腸桿菌的主要毒力因子
3.1 腸毒素(ST、LT)
3.2 大腸桿菌黏附素
3.3 其他毒力因子
第一章 江蘇部分地區(qū)致初生仔豬腹瀉大腸桿菌的分離鑒定
1 材料
1.1 病豬直腸棉拭子和病料采集
1.2 培養(yǎng)基
1.3 主要試劑
1.4 參考菌株
1.5 單克隆抗體和細(xì)胞
1.6 主要儀器
1.7 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.8 引物
2 方法
2.1 細(xì)菌的分離鑒定
2.2 染色鏡檢
2.3 生化試驗(yàn)
2.4 多重 PCR 檢測(cè)毒素基因(sta、stb、It、eaeA、stxie)
2.5 大腸桿菌O血清型的測(cè)定
2.6 黏附素的測(cè)定
2.7 大腸桿菌部分分離株毒素的檢測(cè)
3 結(jié)果
3.1 細(xì)菌分離及生化試驗(yàn)
3.2 生化試驗(yàn)
3.3 大腸桿菌O血清型的鑒定
3.4 5種毒力基因的檢測(cè)
3.5 黏附素的鑒定
3.6 O血清型、毒素基因與黏附素型的相關(guān)性
3.7 部分分離菌株致病性鑒定
4 討論
第二章 O24部分ETEC分離株人工感染試驗(yàn)
摘要
1 材料
1.1 供試菌株
1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.3 標(biāo)準(zhǔn)血清
1.4 試劑
1.5 主要儀器設(shè)備
1.6 培養(yǎng)基
2 方法
2.1 試驗(yàn)菌株處理
2.2 引物設(shè)計(jì)
2.3 仔豬飼養(yǎng)與采樣
2.4 剖檢并分離鑒定
2.5 病理學(xué)、組織病理學(xué)觀察
3 結(jié)果
3.1 分離菌對(duì)1日齡仔豬人工感染觀察
3.2 細(xì)菌學(xué)檢查
3.3 腸道分離菌計(jì)數(shù)
3.4 組織病理學(xué)
4 討論
全文小結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄:大腸桿菌樣本資料
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]華南地區(qū)致病性豬大腸桿菌的鑒定和血清型分布[J]. 王文豪,蘇丹萍,張丹琳,申翰欽,張顯浩,陳瑞愛,賀東生. 中國獸醫(yī)雜志. 2013(04)
[2]陜西仔豬致病性大腸桿菌的分離鑒定和耐藥性測(cè)定[J]. 高云英,李浩波,李琳,陳云杰,王增民,趙發(fā)苗,張景武. 中國農(nóng)學(xué)通報(bào). 2005(09)
[3]大腸桿菌VT2噬菌體的分離與溶源轉(zhuǎn)染[J]. 嚴(yán)亞賢,陸承平. 中國病毒學(xué). 2004(04)
[4]華東地區(qū)致初生仔豬腹瀉大腸桿菌的O血清型和毒力因子[J]. 陳祥,高崧,王雷,焦新安,劉秀梵. 微生物學(xué)報(bào). 2004(01)
[5]北京地區(qū)豬致病性大腸埃希氏菌的分離鑒定[J]. 張永紅,崔德鳳,沈詠舟,康凱,田嵐. 中國獸醫(yī)科技. 1999(04)
[6]我國部分地區(qū)禽病原性大腸桿菌的分離與鑒定[J]. 高崧,劉秀梵,張如寬,焦新安,文其乙,吳長新,唐一鳴,朱曉波,李琮,陳娟,崔力兵,崔洪平. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 1999(02)
[7]一株能表達(dá)987P和F41兩種粘附素的豬源性大腸桿菌的研究[J]. 高崧,劉秀梵,張如寬. 微生物學(xué)報(bào). 1994(03)
[8]抗大腸埃希氏菌粘附素單克隆抗體診斷試劑的研制及其現(xiàn)場(chǎng)初步應(yīng)用[J]. 高崧,劉秀梵. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 1993(03)
[9]貴州省仔豬黃痢病原的分離與鑒定[J]. 吳彤,李永明,何仲先,周碧君,溫俊板. 貴州農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào). 1991(01)
[10]豬大腸桿菌病病原學(xué)研究概況[J]. 李永明. 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué). 1990(04)
博士論文
[1]斷奶仔豬源大腸桿菌毒力因子的分子流行病學(xué)及F18菌毛部分特性的研究[D]. 成大榮.揚(yáng)州大學(xué) 2005
碩士論文
[1]江蘇部分地區(qū)致初生、斷奶仔豬腹瀉/水腫病大腸桿菌的O血清型、毒素型和黏附素型的流行病學(xué)調(diào)查[D]. 唐樹霄.揚(yáng)州大學(xué) 2013
本文編號(hào):3259439
【文章來源】:揚(yáng)州大學(xué)江蘇省
【文章頁數(shù)】:72 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
符號(hào)說明
文獻(xiàn)綜述
1 致病性大腸桿菌引起的新生仔豬腹瀉
1.1 致病性大腸桿菌引起的仔豬黃痢
1.2 致病性大腸桿菌引起的仔豬白痢
1.3. 致仔豬腹瀉大腸桿菌病的預(yù)防
1.4 ETEC疫苗
2 致初生仔豬腹瀉的大腸桿菌病原生物特性
2.1 大腸桿菌的一般特性
2.2 大腸桿菌主要抗原及血清學(xué)特性
2.3 大腸桿菌的分類及致病性
3 致新生仔豬腹瀉大腸桿菌的主要毒力因子
3.1 腸毒素(ST、LT)
3.2 大腸桿菌黏附素
3.3 其他毒力因子
第一章 江蘇部分地區(qū)致初生仔豬腹瀉大腸桿菌的分離鑒定
1 材料
1.1 病豬直腸棉拭子和病料采集
1.2 培養(yǎng)基
1.3 主要試劑
1.4 參考菌株
1.5 單克隆抗體和細(xì)胞
1.6 主要儀器
1.7 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.8 引物
2 方法
2.1 細(xì)菌的分離鑒定
2.2 染色鏡檢
2.3 生化試驗(yàn)
2.4 多重 PCR 檢測(cè)毒素基因(sta、stb、It、eaeA、stxie)
2.5 大腸桿菌O血清型的測(cè)定
2.6 黏附素的測(cè)定
2.7 大腸桿菌部分分離株毒素的檢測(cè)
3 結(jié)果
3.1 細(xì)菌分離及生化試驗(yàn)
3.2 生化試驗(yàn)
3.3 大腸桿菌O血清型的鑒定
3.4 5種毒力基因的檢測(cè)
3.5 黏附素的鑒定
3.6 O血清型、毒素基因與黏附素型的相關(guān)性
3.7 部分分離菌株致病性鑒定
4 討論
第二章 O24部分ETEC分離株人工感染試驗(yàn)
摘要
1 材料
1.1 供試菌株
1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.3 標(biāo)準(zhǔn)血清
1.4 試劑
1.5 主要儀器設(shè)備
1.6 培養(yǎng)基
2 方法
2.1 試驗(yàn)菌株處理
2.2 引物設(shè)計(jì)
2.3 仔豬飼養(yǎng)與采樣
2.4 剖檢并分離鑒定
2.5 病理學(xué)、組織病理學(xué)觀察
3 結(jié)果
3.1 分離菌對(duì)1日齡仔豬人工感染觀察
3.2 細(xì)菌學(xué)檢查
3.3 腸道分離菌計(jì)數(shù)
3.4 組織病理學(xué)
4 討論
全文小結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄:大腸桿菌樣本資料
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]華南地區(qū)致病性豬大腸桿菌的鑒定和血清型分布[J]. 王文豪,蘇丹萍,張丹琳,申翰欽,張顯浩,陳瑞愛,賀東生. 中國獸醫(yī)雜志. 2013(04)
[2]陜西仔豬致病性大腸桿菌的分離鑒定和耐藥性測(cè)定[J]. 高云英,李浩波,李琳,陳云杰,王增民,趙發(fā)苗,張景武. 中國農(nóng)學(xué)通報(bào). 2005(09)
[3]大腸桿菌VT2噬菌體的分離與溶源轉(zhuǎn)染[J]. 嚴(yán)亞賢,陸承平. 中國病毒學(xué). 2004(04)
[4]華東地區(qū)致初生仔豬腹瀉大腸桿菌的O血清型和毒力因子[J]. 陳祥,高崧,王雷,焦新安,劉秀梵. 微生物學(xué)報(bào). 2004(01)
[5]北京地區(qū)豬致病性大腸埃希氏菌的分離鑒定[J]. 張永紅,崔德鳳,沈詠舟,康凱,田嵐. 中國獸醫(yī)科技. 1999(04)
[6]我國部分地區(qū)禽病原性大腸桿菌的分離與鑒定[J]. 高崧,劉秀梵,張如寬,焦新安,文其乙,吳長新,唐一鳴,朱曉波,李琮,陳娟,崔力兵,崔洪平. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 1999(02)
[7]一株能表達(dá)987P和F41兩種粘附素的豬源性大腸桿菌的研究[J]. 高崧,劉秀梵,張如寬. 微生物學(xué)報(bào). 1994(03)
[8]抗大腸埃希氏菌粘附素單克隆抗體診斷試劑的研制及其現(xiàn)場(chǎng)初步應(yīng)用[J]. 高崧,劉秀梵. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 1993(03)
[9]貴州省仔豬黃痢病原的分離與鑒定[J]. 吳彤,李永明,何仲先,周碧君,溫俊板. 貴州農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào). 1991(01)
[10]豬大腸桿菌病病原學(xué)研究概況[J]. 李永明. 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué). 1990(04)
博士論文
[1]斷奶仔豬源大腸桿菌毒力因子的分子流行病學(xué)及F18菌毛部分特性的研究[D]. 成大榮.揚(yáng)州大學(xué) 2005
碩士論文
[1]江蘇部分地區(qū)致初生、斷奶仔豬腹瀉/水腫病大腸桿菌的O血清型、毒素型和黏附素型的流行病學(xué)調(diào)查[D]. 唐樹霄.揚(yáng)州大學(xué) 2013
本文編號(hào):3259439
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