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表達(dá)扎伊爾型埃博拉病毒囊膜糖蛋白重組水泡性口炎病毒的構(gòu)建

發(fā)布時間:2021-06-30 22:02
  埃博拉病毒(EBO V)能夠引起一種人畜共患急性出血性傳染病,即埃博拉出血熱。研制安全、有效的抗病毒疫苗具有重要意義。本研究利用水泡性口炎病毒(V SV)印第安納株反向遺傳操作系統(tǒng),構(gòu)建并拯救得到表達(dá)扎伊爾型埃博拉病毒(ZEBO V)囊膜糖蛋白G P的重組V SV(rV SV-ZEBO V-G P),通過w estern blot和免疫熒光試驗證明在重組病毒中ZEBO V G P蛋白獲得正確表達(dá);動物試驗顯示重組病毒對小鼠高度安全;中和試驗結(jié)果表明重組病毒能誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生針對ZEBO V囊膜糖蛋白G P嵌合V SV假病毒粒的特異性中和抗體。本研究表明rV SV-ZEBO V-G P作為防控ZEBO V的儲備性疫苗具有潛在的應(yīng)用價值。 

【文章來源】:中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2013,35(06)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:5 頁

【文章目錄】:
1 材料和方法
    1.1 重組質(zhì)粒、細(xì)胞、實驗動物
    1.2 主要試劑和儀器
    1.3 ZEBOV-GP基因的擴(kuò)增和序列分析
    1.4 表達(dá)GP基因的重組病毒基因組全長c DNA的構(gòu)建
    1.5 重組病毒的拯救
    1.6 重組病毒的RT-PCR鑒定
    1.7 ZEBOV GP表達(dá)的western blot檢測
    1.8 GP蛋白的表達(dá)的激光共聚焦檢測
    1.9 重組病毒的增殖動力學(xué)
    1.1 0 BALB/c小鼠安全性試驗
2 結(jié)果
    2.1 表達(dá)GP基因的重組病毒基因組全長c DNA的構(gòu)建和重組病毒的拯救
    2.2 重組病毒RT-PCR鑒定
    2.3 GP蛋白表達(dá)的western blot鑒定
    2.4 GP蛋白在重組病毒感染細(xì)胞中的表達(dá)及定位
    2.5 重組病毒的生長動力學(xué)
    2.6 重組病毒對小鼠的致病性
    2.7 重組病毒誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生GP特異性中和抗體
3 討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]表達(dá)增強綠色熒光蛋白重組水皰性口炎病毒印第安納株的構(gòu)建[J]. 溫志遠(yuǎn),葛金英,胡森,王永,步志高.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2007(12)
[2]水泡性口炎病毒印第安納株反基因操作系統(tǒng)的建立[J]. 溫志遠(yuǎn),葛金英,王永,胡森,郝永清,步志高.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2006(05)



本文編號:3258577

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