鴨傳染性漿膜炎（Duck infectious serositis）是一種由鴨疫里默氏桿菌（Riemerella anatipestifer,RA）引起的傳染病,常呈急性、敗血性,曾經(jīng)被稱為新鴨�。∟ew ducks syndrom）、鴨敗血癥（nuekseptieemia）和鴨疫綜合癥（Anatipestifer syndrome）等,家鴨、野鴨、雛鵝、火雞和野雞及多種其他鳥(niǎo)類易感。病變主要特征為纖維素性心包炎、肝周炎、纖維素性肺炎,俗稱“三包”。另外,病變中也常見(jiàn)氣囊炎、關(guān)節(jié)炎、結(jié)膜炎、腦膜炎等癥狀。目前,疫苗預(yù)防和抗菌藥治療是防治該病的主要手段。因此,對(duì)臨床收集的疑似病例進(jìn)行RA的分離鑒定、耐藥性檢測(cè)、病原血清型的分型對(duì)臨床養(yǎng)殖過(guò)程中選擇高敏感度藥物、合適疫苗等具重要指導(dǎo)意義。本研究主要分以下三個(gè)部分:一、RA單因子血清的制備該試驗(yàn)選用7株山東省主要流行血清型RA標(biāo)準(zhǔn)品制備了7種免疫原,對(duì)14只2Kg左右的雄性家兔進(jìn)行免疫后心臟采血制備抗血清。經(jīng)檢測(cè),抗血清與本血清型菌體的凝集效價(jià)結(jié)果均可達(dá)到1:4800。多次交叉吸收試驗(yàn)后,得到1型、2型、6型、7型、10型、11型、13型7種... 

【文章來(lái)源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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革蘭氏染色圖片

山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士專業(yè)學(xué)位論文27將臨床分離到的23株RA和實(shí)驗(yàn)室保存的大腸桿菌、沙門(mén)氏菌提取DNA作為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增。結(jié)果顯示：臨床分離純化的23株菌均擴(kuò)增出大小為809bp的目的片段，而大腸桿菌、沙門(mén)氏菌沒(méi)有擴(kuò)出片段（圖3-2）。圖3-2部分RA分離株的PCR擴(kuò)增圖M,DNAMarkerDL-2000;1,大腸桿菌;2,沙門(mén)氏菌;3-11.RA臨床分離株Fig.3-2PCRamplificationfromRAM,DNAMarkerDL-2000;1.E.coli;2.Salmonella;3-11,RAstrains3.4.2擴(kuò)增產(chǎn)物克隆質(zhì)粒的雙酶切結(jié)果將臨床分離的23株菌擴(kuò)增出大小為809bp的目的片段回收連接轉(zhuǎn)化，BamHI和HindIII雙酶切陽(yáng)性質(zhì)粒，得到目的條帶大小為2692bp和809bp左右，與預(yù)期相符（圖3-3）。圖3-3部分重組質(zhì)粒的酶切鑒定M:DNAMarker;1-2:陽(yáng)性質(zhì)粒/BamHI+HindIIIFig.3-3IdentificationofrecombinantplasmidbyenzymedigestionM:DNAMarker(DL5000);1-2:Positiveplasmid/BamHI+HindII3.4.3擴(kuò)增產(chǎn)物測(cè)序結(jié)果與分析

山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士專業(yè)學(xué)位論文27將臨床分離到的23株RA和實(shí)驗(yàn)室保存的大腸桿菌、沙門(mén)氏菌提取DNA作為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增。結(jié)果顯示：臨床分離純化的23株菌均擴(kuò)增出大小為809bp的目的片段，而大腸桿菌、沙門(mén)氏菌沒(méi)有擴(kuò)出片段（圖3-2）。圖3-2部分RA分離株的PCR擴(kuò)增圖M,DNAMarkerDL-2000;1,大腸桿菌;2,沙門(mén)氏菌;3-11.RA臨床分離株Fig.3-2PCRamplificationfromRAM,DNAMarkerDL-2000;1.E.coli;2.Salmonella;3-11,RAstrains3.4.2擴(kuò)增產(chǎn)物克隆質(zhì)粒的雙酶切結(jié)果將臨床分離的23株菌擴(kuò)增出大小為809bp的目的片段回收連接轉(zhuǎn)化，BamHI和HindIII雙酶切陽(yáng)性質(zhì)粒，得到目的條帶大小為2692bp和809bp左右，與預(yù)期相符（圖3-3）。圖3-3部分重組質(zhì)粒的酶切鑒定M:DNAMarker;1-2:陽(yáng)性質(zhì)粒/BamHI+HindIIIFig.3-3IdentificationofrecombinantplasmidbyenzymedigestionM:DNAMarker(DL5000);1-2:Positiveplasmid/BamHI+HindII3.4.3擴(kuò)增產(chǎn)物測(cè)序結(jié)果與分析

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]鴨疫里默氏桿菌的分離鑒定及耐藥性研究[J]. 謝永平,陳澤祥,許力干,胡帥,徐光霞,禤雄標(biāo),楊威.  廣西農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(07)
[3]氨基糖苷類藥物高水平耐藥16S rRNA甲基化酶的研究進(jìn)展[J]. 焦顯芹,肖方,劉河冰,李新生,杜向黨.  中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2009(06)
[4]Ⅰ型鴨疫里默氏桿菌的分離與鑒定[J]. 單艷菊,龔建森,施祖灝,劉學(xué)賢.  吉林畜牧獸醫(yī). 2009(02)
[5]天津地區(qū)鴨疫里默氏桿菌的分離鑒定及藥敏試驗(yàn)[J]. 李秀麗,王英珍,任衛(wèi)科,王東,張莉,韓偉.  天津農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(06)
[6]鴨疫里默氏桿菌中國(guó)分離株的外膜蛋白A基因的克隆與序列分析[J]. 魏秀麗,孫亞妮,姜世金,孔義波,張興曉.  西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2008(03)
[7]2型鴨疫里氏桿菌抗體間接ELISA檢測(cè)方法的建立與應(yīng)用[J]. 程龍飛,施少華,傅光華,李文楊,彭春香,黃瑜,陳溥言.  福建農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2006(02)
[8]利用16S rDNA建立種特異性PCR快速檢測(cè)鴨疫里默氏菌[J]. 曲豐發(fā),蔡暢,鄭獻(xiàn)進(jìn),張大丙.  微生物學(xué)報(bào). 2006(01)
[9]間接免疫組化法檢測(cè)鴨疫里默氏桿菌感染和抗原定位[J]. 劉維平,程安春,汪銘書(shū),陳孝躍,周毅,朱德康,劉菲,孟瓊?cè)A,黃誠(chéng),宋涌.  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2005(04)
[10]細(xì)菌外排泵介導(dǎo)耐藥性研究進(jìn)展[J]. 王青松,崔淑芹,張舒.  國(guó)外醫(yī)藥(抗生素分冊(cè)). 2005(03)



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