剛地弓形蟲(chóng)（Toxoplasma gondii,T.gondii）是一種寄生于有核細(xì)胞的專(zhuān)性胞內(nèi)寄生蟲(chóng),可引起弓形蟲(chóng)病,嚴(yán)重威脅人類(lèi)及動(dòng)物健康。弓形蟲(chóng)除了危害人類(lèi)健康這一嚴(yán)重問(wèn)題,還會(huì)嚴(yán)重的影響著畜禽行業(yè)狀況,造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。貓科動(dòng)物是弓形蟲(chóng)的終末宿主也是重要的傳染源,哺乳類(lèi)、鳥(niǎo)類(lèi)都可作為弓形蟲(chóng)中間宿主。弓形蟲(chóng)對(duì)免疫功能不全者及妊娠動(dòng)物的危害嚴(yán)重。弓形蟲(chóng)能夠依賴(lài)宿主細(xì)胞表面的唾液酸受體入侵宿主細(xì)胞,因此本實(shí)驗(yàn)通過(guò)前期弓形蟲(chóng)與唾液酸結(jié)合的蛋白質(zhì)組學(xué)分析,篩選出TGME49₂39820基因,名為D-3-磷酸甘油酸脫氫酶的蛋白質(zhì),進(jìn)一步對(duì)其基因克隆表達(dá),純化蛋白質(zhì),制備多克隆抗體,純化得到IgG。通過(guò)間接免疫熒光實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞黏附實(shí)驗(yàn)確認(rèn)該蛋白質(zhì)在弓形蟲(chóng)蟲(chóng)體上的未知及可與細(xì)胞表面受體結(jié)合,進(jìn)而驗(yàn)證與唾液酸可以結(jié)合,證明與細(xì)胞表面結(jié)合的受體是唾液酸。通過(guò)體外抗體抑蟲(chóng)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)該蛋白質(zhì)在體外具有一定的抑制蟲(chóng)體入侵的能力,通過(guò)免疫小鼠后觀察小鼠死亡時(shí)間,卻發(fā)現(xiàn)在體內(nèi)沒(méi)有明顯的保護(hù)效果。 

【文章來(lái)源】：沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】：62 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

弓形蟲(chóng)生活史Fig1-1LifecycleofToxoplasmagondii弓形蟲(chóng)的生活史可以概括為兩部分：僅在終末宿主貓（貓科動(dòng)物，野生或家養(yǎng)動(dòng)物）

圖 1-2.哺乳動(dòng)物兩種主要的唾液酸：N-乙酰神經(jīng)氨酸(Neu5Ac)和 N-羥乙酰神經(jīng)氨酸(Neu5Gc)Fig 1-2.The two major sialic acid found in mammals. N-acetylneuraminic acid (Neu5Ac) andN-glycolylneuram(Neu5Gc).1.5.2 頂復(fù)門(mén)寄生蟲(chóng)通過(guò)對(duì)頂復(fù)門(mén)寄生蟲(chóng)依賴(lài)唾液酸途徑入侵宿主細(xì)胞的研究，人們發(fā)現(xiàn)了宿主面的唾液酸對(duì)流感病毒的發(fā)生和傳播起到了一定作用。在寄生蟲(chóng)病原研究中報(bào)道，宿主細(xì)胞表面的唾液酸殘基在蟲(chóng)體與宿主細(xì)胞相中發(fā)揮著一定的作用。惡性瘧原蟲(chóng)的裂殖子能識(shí)別紅細(xì)胞表面的 N-乙酰神經(jīng)氨酸依賴(lài)唾液酸途徑入侵紅細(xì)胞，克氏錐蟲(chóng)的錐鞭體能夠很好地入侵細(xì)胞表面暴露有的宿主細(xì)胞。將宿主細(xì)胞表面的唾液酸降解或阻斷后再與弓形蟲(chóng)共培養(yǎng)，結(jié)果發(fā)蟲(chóng)的感染程度顯著降低，說(shuō)明宿主細(xì)胞表面豐富的唾液酸殘基是弓形蟲(chóng)入侵宿主受體，它能啟動(dòng)弓形蟲(chóng)對(duì)宿主細(xì)胞的粘附與入侵，在弓形蟲(chóng)速殖子與宿主細(xì)胞之作用中具有重要的作用。弓形蟲(chóng)能夠在宿主細(xì)胞內(nèi)存活感染，首先要解決能夠侵入宿主細(xì)胞的問(wèn)題。蟲(chóng)能夠侵入宿主細(xì)胞的關(guān)鍵因素就是蟲(chóng)體在入侵過(guò)程中蟲(chóng)體表面蛋白及分泌蛋

信號(hào)肽分析

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3256367