鴨坦布蘇病毒病自2010年在我國首次爆發(fā)以來，由于其發(fā)病快、引起鴨群產(chǎn)蛋率下降顯著，給我國養(yǎng)鴨業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。目前該病已成為我國主要鴨病之一。本文對(duì)鴨坦布蘇病毒FSD1分離株的生物學(xué)特性進(jìn)行了系統(tǒng)研究，并對(duì)其基因組序列進(jìn)行了測定與進(jìn)化分析。在2012年從山東發(fā)病的鴨群中分離到一株鴨坦布蘇病毒，命名為FSD1。通過生物學(xué)特性分析，發(fā)現(xiàn)該病毒不能凝集雞、鴨、鵝、鴿和豬的紅細(xì)胞，對(duì)氯仿、酸等敏感，不耐熱。電鏡觀察：病毒粒子呈圓形或橢圓形，直徑大小約為50nm。鴨坦布蘇病毒FSD1毒株在雞胚、鴨胚上生長良好，都可出現(xiàn)病變；胚體毒盲傳三代以后在DEF細(xì)胞上可以產(chǎn)生明顯的CPE，但是在CEF細(xì)胞上不會(huì)產(chǎn)生CPE。雛鴨動(dòng)物回歸試驗(yàn)顯示，通過頸部皮下注射能復(fù)制出該病典型的癥狀和病變。全基因組序列測定顯示：FSD1毒株基因組全長均為10,990nt，其中包括一個(gè)長度142nt的5’非編碼區(qū)、長度10,230nt的開放閱讀框（ORF）和長度為618nt的3’非編碼區(qū)；ORF區(qū)域編碼3410個(gè)氨基酸，編碼的多聚蛋白包括10個(gè)蛋白，三個(gè)結(jié)構(gòu)蛋白（C、PrM、E），另外還包括七個(gè)非結(jié)構(gòu)蛋白（NS1、NS... 

【文章來源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

黃病毒基因組結(jié)構(gòu)示意圖

成了全基因組或聚蛋白基因序列分析。傅光華等對(duì)我國部分地區(qū)2010～2011年間的鴨坦布蘇流感及分子變異進(jìn)行研究，不同毒株NS5基因的同源性在98%異世，而與2010年前分離到的雞源及蚊媒DTMUV的同源性介于83.8%～85.8%之間，所有的2010年后分離到的病毒位于同一進(jìn)化分支上，這表明該病毒未發(fā)生明顯變異（傅光華等，2012）。利用DNAstar分析軟件對(duì)分離到的6株病毒的多聚蛋白進(jìn)行氨基酸序列對(duì)比發(fā)現(xiàn)同源性都在99.0%以上，幾乎沒有發(fā)生變異。又用Beast軟件對(duì)坦布蘇病毒E基因與其他幾種黃病毒進(jìn)行進(jìn)化發(fā)現(xiàn)，鴨坦布蘇病毒不同毒株可分為2個(gè)基因型，2010年分離到的4個(gè)毒株均為Ⅰ型，Ⅱ型包括2010～2012年分離株。而基因Ⅱ型的DTMUV又可細(xì)分為 Ⅱ a和 Ⅱ b兩個(gè)亞型（于可響等，2013）。

3.1 病毒分離從收集的所有疑似病料中分離到一株鴨坦布蘇病毒，隨將該分離毒株命名為該分離株背景信息為：2012 年 4 月取自山東某種鴨場發(fā)病鴨的輸卵管病料。該日齡種鴨突然出現(xiàn)明顯的產(chǎn)蛋下降，同時(shí)采食量下降，飲水明顯減少，產(chǎn)蛋率從速下降，幾乎絕產(chǎn)。一周后個(gè)別鴨伴有神經(jīng)癥狀。死亡鴨剖檢可見肝臟明顯的密布有點(diǎn)或片狀出血點(diǎn)和出血斑；脾臟壞死；胰腺出血壞死；卵巢和輸卵管有病料處理后接種 SPF 雞胚和鴨胚分離毒，傳至第 2 代后表現(xiàn)規(guī)律性的死亡間比較集中，多于 96h～144h 死亡，均能導(dǎo)致雞胚和鴨胚死亡，死亡胚體均出現(xiàn)縮，胚體出現(xiàn)水腫，絨毛尿囊膜水腫、增厚。大多數(shù)胚體肝部出血或花斑樣壞死部分嚴(yán)重的胚體全身尤其是頭頸部位有明顯的出血點(diǎn)。（鴨胚病變見圖 3-1）。血試驗(yàn)結(jié)果顯示：死亡胚尿囊液與 ND、H5AIV、H9AIV 和 EDS 陽性血清均無交

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]鴨坦布蘇病毒E基因環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增檢測方法的建立與應(yīng)用[J]. 歐全賓,刁有祥,唐熠,高緒慧,于春梅.  中國獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2013(09)
[2]鴨坦布蘇病毒實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測方法的建立及應(yīng)用[J]. 靳宇田,黃顯明,許秀梅,尹秀鳳,徐延偉,朱鵬,張小飛.  中國動(dòng)物傳染病學(xué)報(bào). 2013(04)
[3]鴨坦布蘇病毒TaqMan熒光定量PCR方法的優(yōu)化[J]. 彭珊,閆麗萍,李國新,李雪松,滕巧泱,肖亞莉,何文興,李澤君.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2013(04)
[4]鵝源坦布蘇病毒SHYG株的分離與鑒定[J]. 潘金金,鄒曉艷,李鑫,宿春虎,柴茂,姜逸,胡艷芬,趙國,王彥紅,石火英,陳素娟,彭大新.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(05)
[5]鴨坦布蘇病毒研究進(jìn)展[J]. 劉志剛,孫青松,姚蓉,劉冰心,晁行周,鄒忠,劉立峰,吳彥,鄭愛芳,趙蘇紅,金梅林.  中國動(dòng)物傳染病學(xué)報(bào). 2013(01)
[6]1株鴨坦布蘇病毒人工感染雛鴨的病理學(xué)研究[J]. 王友令,袁小遠(yuǎn),楊金興,于可響,徐懷英,張玉霞,艾武,秦卓明,李玉峰.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2013(01)
[7]鵝源坦布蘇病毒的分離及初步鑒定[J]. 施少華,傅光華,萬春和,程龍飛,陳紅梅,黃振洲,黃瑜.  中國獸醫(yī)雜志. 2012(12)
[8]鵝源黃病毒的分離和初步鑒定[J]. 袁生,李金平,王敏儒,白挨泉,蒲文珺,張濟(jì)培,彭巧麗,王輝,陳志偉,張浩吉.  中國畜牧獸醫(yī). 2012(09)
[9]鵝黃病毒JS804株的生物學(xué)特性[J]. 鈕慧敏,李銀,黃欣梅,趙東敏,劉宇卓,張敬峰,劉飛,李彤彤,周曉波,李祥瑞.  江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2012(02)
[10]蟲媒黃病毒NS5蛋白的生物學(xué)功能研究進(jìn)展[J]. 周希珍,趙慧,高嵐,秦成峰.  軍事醫(yī)學(xué). 2012(01)

碩士論文
[1]鴨坦布蘇病毒的分子生物學(xué)快速診斷與E蛋白基因變異性分析[D]. 張帥.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[2]鴨坦布蘇病毒巢式PCR檢測方式及其重組E蛋白間接ELISA診斷方法的研究[D]. 郝明飛.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[3]黃病毒通用引物RT-PCR以及Real-Time PCR方法的建立并應(yīng)用于蚊蟲檢測[D]. 周曉俊.第二軍醫(yī)大學(xué) 2007



本文編號(hào)：3249017