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香芪湯對(duì)內(nèi)毒素血癥小鼠凝血因子的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-04-24 16:15

  本文關(guān)鍵詞:香芪湯對(duì)內(nèi)毒素血癥小鼠凝血因子的影響,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目前在獸醫(yī)臨床上,以大腸桿菌、沙門氏菌等革蘭氏陰性桿菌為病原的家畜傳染病占有相當(dāng)大的比例。革蘭氏陰性桿菌釋放的內(nèi)毒素可以進(jìn)入血液循環(huán),形成內(nèi)毒素血癥,進(jìn)而誘發(fā)動(dòng)物機(jī)體出現(xiàn)內(nèi)毒素性休克、炎癥反應(yīng)綜合征(systemic inflammatory response syndrome,SIS)、彌漫性血管內(nèi)凝血(disseminated intravascular coagulation, DIC)等病理變化,可以影響家畜生長(zhǎng)性能,進(jìn)而影響家畜的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。炎癥反應(yīng)與凝血/抗凝血反應(yīng)息息相關(guān),炎癥可促發(fā)凝血反應(yīng);凝血反應(yīng)可加重炎癥反應(yīng);抗凝血反應(yīng)也可拈抗炎癥反應(yīng)。香芪湯由香附(Rhizoma Cyperi)、黃芪(Astragalus membranaceus)、穿心蓮(Andrographis paniculata)以4:3:3為比例組成的中藥復(fù)方。前期研究表明其能減少大腸桿菌病雞血清中TNF-α、sEPCR的表達(dá),顯示該方劑具有抗炎和抗凝血的功效。本研究以內(nèi)毒素血癥小鼠為模型,進(jìn)一步研究香芪湯及其單味中藥香附、黃芪、穿心蓮對(duì)內(nèi)毒素血癥小鼠凝血因子表達(dá)的影響。主要研究方法、結(jié)果如下:1、建立內(nèi)毒素血癥小鼠模型:將無菌生理鹽水按0.1 ml/10g體重腹腔注射給空白組小鼠;將LPS (0.25mg/ml)、LPS (0.5mg/ml)、LPS (1.0mg/ml)按0.1 m1/10g體重分別腹腔注射給低劑量組、中劑量組、高劑量組小鼠。發(fā)現(xiàn)各模型組小鼠在注射后1h均出現(xiàn)蜷縮、扎堆、閉目等現(xiàn)狀,體溫下降,眼周紅、眼角濕潤(rùn),糞便稀溏等癥狀。隨著LPS濃度的增加,糞便不成形程度、皮毛松散程度增加,24 h后低劑量、中劑量小鼠恢復(fù)正常,36h后高劑量組小鼠恢復(fù)正常。各模型組小鼠IL-6、ICAM-1、 VCAM-1的表達(dá)量升高,EPCR的表達(dá)量顯著減少。LPS濃度越高,EPCR的表達(dá)量越少。通過比較IL-6、ICAM-1、VCAM-1、EPCR的表達(dá),確定內(nèi)毒素血癥小鼠模型所需LPS溶液的濃度為0.5 mg/ml。2、香芪湯及其單味中藥對(duì)內(nèi)毒素血癥小鼠精神狀態(tài)的觀察:將無菌蒸餾水按0.1mm1/10g體重灌服給空白組、內(nèi)毒素模型組,1次/d,連用7 d。將香附(0.1 g/m1)、黃芪(0.075 g/m1)、穿心蓮(0.075 g/m1)、香芪湯(0.25 g/m1)按0.1 m1/10g體重分別灌服給香附組、黃芪組、穿心蓮組、香芪湯組,1次/d,連用7 d。將無菌蒸餾水按0.1 mml/log體重灌服給地塞米松組,連用4 d,第5 d,換用醋酸地塞米松溶液(0.2mg/ml)灌服,連用3 d。第8 d,按0.1 ml/10g體重給空白組腹腔注射無菌生理鹽水,其余各組按0.1 ml/10g體重均注射0.5 mg/ml LPS溶液。發(fā)現(xiàn)內(nèi)毒素模型組小鼠在注射LPS1h后出現(xiàn)蜷縮、扎堆、閉目等現(xiàn)狀,體溫下降,眼周紅、濕潤(rùn),糞便稀溏等情況,24 h后恢復(fù)正常。用藥各組小鼠在注射LPS溶液12h內(nèi)出現(xiàn)蜷縮、扎堆,糞便濕潤(rùn)但有形等情況,12h后恢復(fù)正常。香附、黃芪、穿心蓮及香芪湯能使內(nèi)毒素血癥小鼠體溫在正常范圍內(nèi)。3、香芪湯及其單味中藥對(duì)內(nèi)毒素血癥小鼠凝血因子影響的研究:Western Blot法檢測(cè)可知,內(nèi)毒素血癥小鼠sAPP、TF、sEPCR的表達(dá)量明顯升高,tPA的表達(dá)量明顯降低。用香附、黃芪、穿心蓮及香芪湯進(jìn)行干預(yù),均能不同程度降低sAPP、TF、 sEPCR的表達(dá),不降低tPA的表達(dá),起到保護(hù)血管內(nèi)皮、保護(hù)PC抗凝途徑、保護(hù)纖溶系統(tǒng)的作用。4、香芪湯及其單味中藥對(duì)內(nèi)毒素血癥小鼠作用機(jī)理的初探:Western Blot法檢測(cè)可知,內(nèi)毒素血癥小鼠AD AM17、MAPKs、PKC delta的表達(dá)量顯著升高。用香附、黃芪、穿心蓮及香芪湯進(jìn)行干預(yù),均能不同程度降低AD AM17、MAPKs、PKC delta的表達(dá)。結(jié)果表明,香芪湯及其單味中藥能減少血管上MAPKs、PKC delta的表達(dá),使ADAM17的活化受到抑制,進(jìn)而使EPCR的脫落減少,起到保護(hù)血管內(nèi)皮、增強(qiáng)機(jī)體抗凝的作用。
【關(guān)鍵詞】:小鼠 內(nèi)毒素血癥 炎癥 凝血 香芪湯
【學(xué)位授予單位】:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:S853.7
【目錄】:
  • 摘要5-7
  • Abstract7-10
  • 縮寫詞表10-13
  • 第一篇 選題背景與文獻(xiàn)綜述13-23
  • 第一章 選題背景13-14
  • 第二章 文獻(xiàn)綜述14-23
  • 1 內(nèi)毒素血癥的研究進(jìn)展14-18
  • 1.1 內(nèi)毒素血癥的分類14-15
  • 1.2 內(nèi)毒素的作用機(jī)制15-16
  • 1.3 內(nèi)毒素血癥的治療方法16-18
  • 2 凝血反應(yīng)的研究進(jìn)展18-21
  • 2.1 炎癥反應(yīng)促發(fā)凝血反應(yīng)18-21
  • 2.2 凝血反應(yīng)加重炎癥反應(yīng)21
  • 2.3 抗凝血反應(yīng)拮抗炎癥反應(yīng)21
  • 3 香芪湯及組成其單味中藥的研究近況21-23
  • 3.1 香附21-22
  • 3.2 黃芪22
  • 3.3 穿心蓮22-23
  • 第二篇 研究?jī)?nèi)容23-53
  • 第一章 內(nèi)毒素血癥模型的建立23-35
  • 1 材料與方法23-29
  • 1.1 試驗(yàn)動(dòng)物23
  • 1.2 主要儀器23-24
  • 1.3 主要試劑24
  • 1.4 試驗(yàn)方法24-29
  • 2 試驗(yàn)結(jié)果29-33
  • 2.1 小鼠一般情況29
  • 2.2 LPS對(duì)小鼠直腸體溫的影響29
  • 2.3 LPS對(duì)小鼠臟器指數(shù)的影響29-31
  • 2.4 LPS對(duì)小鼠炎性因子表達(dá)的影響31-32
  • 2.5 LPS對(duì)小鼠胸主動(dòng)脈EPCR表達(dá)的影響32-33
  • 3 分析與討論33-34
  • 小結(jié)34-35
  • 第二章 香芪湯及其單味中藥對(duì)內(nèi)毒素血癥小鼠凝血因子的影響35-45
  • 1 材料與方法35-39
  • 1.1 試驗(yàn)動(dòng)物35
  • 1.2 主要試劑與藥品35-36
  • 1.3 試驗(yàn)方法36-39
  • 2 試驗(yàn)結(jié)果39-42
  • 2.1 小鼠一般情況39
  • 2.2 香芪湯及其單味中藥對(duì)內(nèi)毒素血癥小鼠直腸體溫的影響39-40
  • 2.3 香芪湯及其單味中藥對(duì)內(nèi)毒素血癥小鼠sAPP表達(dá)的影響40
  • 2.4 香芪湯及其單味中藥對(duì)內(nèi)毒素血癥小鼠TF、sEPCR、tPA表達(dá)的影響40-42
  • 3 分析與討論42-44
  • 小結(jié)44-45
  • 第三章 香芪湯及其單味中藥對(duì)內(nèi)毒素血癥小鼠作用機(jī)理初探45-53
  • 1 材料與方法45-46
  • 1.1 試驗(yàn)動(dòng)物45
  • 1.2 主要試劑45
  • 1.3 試驗(yàn)方法45-46
  • 2 試驗(yàn)結(jié)果46-50
  • 2.1 香芪湯及其單味中藥對(duì)內(nèi)毒素血癥小鼠ADAM17表達(dá)的影響46-47
  • 2.2 香芪湯及其單味中藥對(duì)內(nèi)毒素血癥小鼠MAPKs表達(dá)的影響47-49
  • 2.3 香芪湯及其單味中藥對(duì)內(nèi)毒素血癥小鼠PKC delta表達(dá)的影響49-50
  • 3 分析與討論50-52
  • 小結(jié)52-53
  • 第三篇 結(jié)論與創(chuàng)新性53-54
  • 參考文獻(xiàn)54-64
  • 致謝64-65
  • 附圖65-74

【相似文獻(xiàn)】

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