偽狂犬病毒GXLB-2015、GXGG-2016株gI/gE雙基因缺失并表達EGFP株的構(gòu)建及其生物學(xué)特性分析
發(fā)布時間:2021-06-17 16:47
偽狂犬病(PR)是由偽狂犬病病毒(PRV)引起的包括肉食動物、反芻動物、嚙齒動物等多種動物發(fā)病的急性傳染病,自2011年以來,由變異偽狂犬毒株導(dǎo)致的偽狂犬病的爆發(fā)給我國的生豬養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失。gl/gE基因為偽狂犬病病毒的主要毒力基因,可以通過缺失其功能降低病毒的毒力。調(diào)查發(fā)現(xiàn)廣西部分規(guī)模豬場普遍存在偽狂犬病病毒感染,本實驗室前期從廣西采集的樣品中分離得到了國內(nèi)變異株和疫苗株的重組毒株GXLB-2015和TK缺失毒株GXGG-2016。本實驗以偽狂犬病病毒GXLB-2015株和GXGG-2016株為模板分別構(gòu)建了重組質(zhì)粒pMD18T-LR,通過限制性內(nèi)切酶酶切和T4DNA連接酶連接的方法插入了EGFP的表達序列作為熒光標(biāo)記,構(gòu)建了和GXLB-2015株和GXGG-2016株相對應(yīng)的含EGFP表達序列的重組質(zhì)粒pMD18T-L-EGFP-R;通過同源重組的方法成功構(gòu)建了能夠表達EGFP的GXLB-2015株和GXGG-2016株gI/gE雙基因缺失重組毒株r GXLB-2015-Δ gl/gE-EGFP和rGXGG-2016-Δ gI/gE-EGFP。為了解GXLB-2015株...
【文章來源】:廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校
【文章頁數(shù)】:66 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1-1?PRV病毒粒子中宿主蛋白的功能分類??Figl-lFunctional?classification?of?host?proteins?in?PRV?virions??
圖2-2pMD-丨8T-L-EGFP-R的構(gòu)建示意圖??Fig.2-2?Schiiematic?of?pMD-18T-LL-EGFP-R?construction??18??
圖2-3表達EGFP的重組病毒的構(gòu)建示意圖??Fig.2-3?Schhetnatic?of?EGFP?Expressing?recombinant?virus?construction??
【參考文獻】:
期刊論文
[1]水貂源偽狂犬病毒DL14/08株的分離鑒定及生物學(xué)特性研究[J]. 李欣彤,劉昊,張蕾,朱言柱,張永國,閆喜軍. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2018(11)
[2]豬偽狂犬病毒重組疫苗研究進展[J]. 李贊,彭永剛. 畜牧獸醫(yī)科技信息. 2017(09)
[3]豬偽狂犬病疫苗研究及應(yīng)用現(xiàn)狀[J]. 任衛(wèi)科,池晶晶,李秀麗,鄢明華,張莉. 天津農(nóng)業(yè)科學(xué). 2017(08)
[4]偽狂犬病毒gE、gI和US9三基因缺失株的構(gòu)建[J]. 樊毅,李碧,郭萬柱,李萍,黃劍波,楊凡,姜子義,趙軍,許思遙,鄧益超,殷玥,毛汐語,呂雯婷,徐志文,朱玲. 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2017(04)
[5]偽狂犬病基因缺失苗研究進展[J]. 林常玉. 中國畜牧獸醫(yī)文摘. 2017(04)
[6]重組豬細(xì)小病毒VP2基因的豬偽狂犬病毒rPRV-VP2株的構(gòu)建及純化[J]. 付朋飛,喬涵,楊興武,張宇,王林青,郭曉慶,潘鑫龍,陳紅英. 中國獸醫(yī)學(xué)報. 2016(09)
[7]豬偽狂犬病毒gD蛋白抗原表位的克隆及表達[J]. 劉芳,張沖,王寅彪,趙樸,鄧瑞廣,李學(xué)伍. 河南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(04)
[8]Pathogenicity of a currently circulating Chinese variant pseudorabies virus in pigs[J]. Qing-Yuan Yang,Zhe Sun,Fei-Fei Tan,Ling-Hua Guo,Yu-Zhou Wang,Juan Wang,Zhi-Yan Wang,Li-Lin Wang,Xiang-Dong Li,Yan Xiao,Ke-Gong Tian. World Journal of Virology. 2016(01)
[9]豬偽狂犬病毒PCR檢測方法的建立及應(yīng)用[J]. 王香玲,沈詩源,焦連國,張家旺,王芳芳,吳星亮,王排軍,王貴華. 中國獸藥雜志. 2014(11)
[10]基因組編輯技術(shù)在植物中的研究進展與應(yīng)用前景[J]. 謝科,饒力群,李紅偉,安學(xué)麗,方才臣,萬向元. 中國生物工程雜志. 2013(06)
博士論文
[1]基于同源重組技術(shù)對微生物天然產(chǎn)物進行挖掘和CDI功能研究[D]. 陳漢娜.湖南師范大學(xué) 2018
[2]RecA蛋白所介導(dǎo)的同源重組機制的研究[D]. 張宇微.中國科學(xué)院大學(xué)(中國科學(xué)院物理研究所) 2017
[3]偽狂犬病病毒變異株基因工程疫苗研究[D]. 胡睿銘.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[4]偽狂犬病毒上海株P(guān)K~-缺失株及PK~-gG~-雙缺失株的構(gòu)建及免疫原性初步研究[D]. 黃偉堅.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
碩士論文
[1]豬偽狂犬病毒gE蛋白抗體快速檢測方法[D]. 張瑤.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[2]表達豬瘟E2基因重組偽狂犬病毒的構(gòu)建及其部分生物學(xué)特性分析[D]. 韓爽.中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所 2018
[3]豬偽狂犬gE蛋白的表達及特異性納米抗體的篩選[D]. 聶佳琪.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2018
[4]利用BAC克隆構(gòu)建PRV UL21缺失株及其生物學(xué)特性研究[D]. 陳毓欣.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[5]狐貍源偽狂犬病毒HB1株的分離鑒定及生物學(xué)特性分析[D]. 賈文亮.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2017
[6]豬偽狂犬病毒GXLB-2015和GXGG-2016毒株的全基因組序列分析和生物學(xué)特性研究[D]. 秦樹英.廣西大學(xué) 2017
[7]豬偽狂犬病病毒變異株的分離鑒定及gE基因缺失株的構(gòu)建[D]. 劉珍.揚州大學(xué) 2017
[8]表達PCV2-Cap蛋白的TK-/gE-/gG-重組偽狂犬病毒的構(gòu)建及其免疫原性研究[D]. 夏德利.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2017
[9]豬偽狂犬病病毒gI/gE基因缺失變異株的構(gòu)建和免疫性評價[D]. 李文慧.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[10]PRV Ea ΔUL21/EGFP毒株的構(gòu)建及其生物學(xué)特性研究[D]. 彭慧.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
本文編號:3235560
【文章來源】:廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校
【文章頁數(shù)】:66 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1-1?PRV病毒粒子中宿主蛋白的功能分類??Figl-lFunctional?classification?of?host?proteins?in?PRV?virions??
圖2-2pMD-丨8T-L-EGFP-R的構(gòu)建示意圖??Fig.2-2?Schiiematic?of?pMD-18T-LL-EGFP-R?construction??18??
圖2-3表達EGFP的重組病毒的構(gòu)建示意圖??Fig.2-3?Schhetnatic?of?EGFP?Expressing?recombinant?virus?construction??
【參考文獻】:
期刊論文
[1]水貂源偽狂犬病毒DL14/08株的分離鑒定及生物學(xué)特性研究[J]. 李欣彤,劉昊,張蕾,朱言柱,張永國,閆喜軍. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2018(11)
[2]豬偽狂犬病毒重組疫苗研究進展[J]. 李贊,彭永剛. 畜牧獸醫(yī)科技信息. 2017(09)
[3]豬偽狂犬病疫苗研究及應(yīng)用現(xiàn)狀[J]. 任衛(wèi)科,池晶晶,李秀麗,鄢明華,張莉. 天津農(nóng)業(yè)科學(xué). 2017(08)
[4]偽狂犬病毒gE、gI和US9三基因缺失株的構(gòu)建[J]. 樊毅,李碧,郭萬柱,李萍,黃劍波,楊凡,姜子義,趙軍,許思遙,鄧益超,殷玥,毛汐語,呂雯婷,徐志文,朱玲. 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2017(04)
[5]偽狂犬病基因缺失苗研究進展[J]. 林常玉. 中國畜牧獸醫(yī)文摘. 2017(04)
[6]重組豬細(xì)小病毒VP2基因的豬偽狂犬病毒rPRV-VP2株的構(gòu)建及純化[J]. 付朋飛,喬涵,楊興武,張宇,王林青,郭曉慶,潘鑫龍,陳紅英. 中國獸醫(yī)學(xué)報. 2016(09)
[7]豬偽狂犬病毒gD蛋白抗原表位的克隆及表達[J]. 劉芳,張沖,王寅彪,趙樸,鄧瑞廣,李學(xué)伍. 河南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(04)
[8]Pathogenicity of a currently circulating Chinese variant pseudorabies virus in pigs[J]. Qing-Yuan Yang,Zhe Sun,Fei-Fei Tan,Ling-Hua Guo,Yu-Zhou Wang,Juan Wang,Zhi-Yan Wang,Li-Lin Wang,Xiang-Dong Li,Yan Xiao,Ke-Gong Tian. World Journal of Virology. 2016(01)
[9]豬偽狂犬病毒PCR檢測方法的建立及應(yīng)用[J]. 王香玲,沈詩源,焦連國,張家旺,王芳芳,吳星亮,王排軍,王貴華. 中國獸藥雜志. 2014(11)
[10]基因組編輯技術(shù)在植物中的研究進展與應(yīng)用前景[J]. 謝科,饒力群,李紅偉,安學(xué)麗,方才臣,萬向元. 中國生物工程雜志. 2013(06)
博士論文
[1]基于同源重組技術(shù)對微生物天然產(chǎn)物進行挖掘和CDI功能研究[D]. 陳漢娜.湖南師范大學(xué) 2018
[2]RecA蛋白所介導(dǎo)的同源重組機制的研究[D]. 張宇微.中國科學(xué)院大學(xué)(中國科學(xué)院物理研究所) 2017
[3]偽狂犬病病毒變異株基因工程疫苗研究[D]. 胡睿銘.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[4]偽狂犬病毒上海株P(guān)K~-缺失株及PK~-gG~-雙缺失株的構(gòu)建及免疫原性初步研究[D]. 黃偉堅.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
碩士論文
[1]豬偽狂犬病毒gE蛋白抗體快速檢測方法[D]. 張瑤.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[2]表達豬瘟E2基因重組偽狂犬病毒的構(gòu)建及其部分生物學(xué)特性分析[D]. 韓爽.中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所 2018
[3]豬偽狂犬gE蛋白的表達及特異性納米抗體的篩選[D]. 聶佳琪.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2018
[4]利用BAC克隆構(gòu)建PRV UL21缺失株及其生物學(xué)特性研究[D]. 陳毓欣.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[5]狐貍源偽狂犬病毒HB1株的分離鑒定及生物學(xué)特性分析[D]. 賈文亮.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2017
[6]豬偽狂犬病毒GXLB-2015和GXGG-2016毒株的全基因組序列分析和生物學(xué)特性研究[D]. 秦樹英.廣西大學(xué) 2017
[7]豬偽狂犬病病毒變異株的分離鑒定及gE基因缺失株的構(gòu)建[D]. 劉珍.揚州大學(xué) 2017
[8]表達PCV2-Cap蛋白的TK-/gE-/gG-重組偽狂犬病毒的構(gòu)建及其免疫原性研究[D]. 夏德利.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2017
[9]豬偽狂犬病病毒gI/gE基因缺失變異株的構(gòu)建和免疫性評價[D]. 李文慧.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[10]PRV Ea ΔUL21/EGFP毒株的構(gòu)建及其生物學(xué)特性研究[D]. 彭慧.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
本文編號:3235560
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