卵巢作為雌性動物的生殖器官，由生殖細胞和一系列體細胞構(gòu)成。它的生成、發(fā)育與功能體現(xiàn)都與干細胞有密切關(guān)系。作為卵巢中發(fā)育最快與卵母細胞發(fā)育關(guān)系最密切的顆粒細胞，它的迅速擴增及不同功能分化導(dǎo)致卵泡發(fā)生。在兩周內(nèi)，卵泡中顆粒細胞從不到50萬迅速增殖到超過5千萬，并分化成具有不同特異功能的細胞群。這些細胞形成功能型的合胞體，既能合成類固醇激素又能給卵母細胞提供營養(yǎng)。這表明顆粒細胞具有多能性特征。但是，黃體化的顆粒細胞一直被認為屬于終末分化細胞，直到最近一些研究揭示其具有多能特性。這些具有干性的顆粒細胞表現(xiàn)在多個方面：首先是表達干細胞因子OCT4、SOX2和NANOG；其次具有較高的端粒酶活性；第三可以分化成其他類型細胞，包括成骨細胞和神經(jīng)細胞等。顆粒細胞還可以在體外進行轉(zhuǎn)分化，用于研究一些卵巢病理癥狀。雖然顆粒細胞的多能特性正不斷被揭示，但也一直受到質(zhì)疑與挑戰(zhàn)。本研究通過對豬卵巢顆粒細胞的分離與培養(yǎng)、基因表達檢測、重編程與體外分化三方面的研究，得到以下結(jié)論。1.豬顆粒細胞的分離與培養(yǎng)用注射器從豬卵巢中抽取不同大小卵泡的卵泡液，在體視顯微鏡下用自制的吸胚針從卵泡液中分離顆粒細胞團直接貼壁培養(yǎng)。結(jié)... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

不同大小卵泡中的卵丘顆粒細胞與卵母細胞復(fù)合體A小卵泡<4mmB中卵泡4-8mmC、D大卵泡>8mmA、B、C40倍D100倍Fig.3-1ThecumulusandoocytecomplexesinfolliclesofdifferentsizeAsmallfollicles<4mmBfollicles4-8mmC,Dlargefollicles>8mm.A、B、C40xD100x

圖 3-1 不同大小卵泡中的卵丘顆粒細胞與卵母細胞復(fù)合體A 小卵泡<4mm B 中卵泡 4-8mm C、D 大卵泡>8mm A、B、C 40 倍 D 100 倍Fig.3-1 The cumulus and oocyte complexes in follicles of different sizeall follicles <4mm B follicles 4-8mm C, D large follicles> 8mm. A、B、C 40x D

.3.2 不同類型顆粒細胞的貼壁培養(yǎng)為了對比卵泡液中不同類型顆粒細胞的貼壁狀態(tài)，通過在體視顯微鏡下分離出帶細胞的卵丘顆粒細胞與不帶卵母細胞的顆粒細胞進行培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)兩種類型顆粒細胞貼壁并增殖，但有卵母細胞的一組增殖更快且擁有更高的貼壁率，結(jié)果見圖 3-3 與-1。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]The novel OCT4 spliced variant OCT4B1 can generate three protein isoforms by alternative splicing into OCT4B[J]. Yuan Gao a,b,1,Xia Wang a,1,Jin Han a,Zhifeng Xiao a,Bing Chen a,Guannan Su a,Jianwu Dai a,a Key Laboratory of Molecular Developmental Biology,Institute of Genetics and Developmental Biology,Chinese Academy of Sciences,Beijing 100190,China b The Graduate School,Chinese Academy of Sciences,Beijing 100190,China.  遺傳學(xué)報. 2010(07)



本文編號：3235113