卵巢作為雌性動物的生殖器官，由生殖細(xì)胞和一系列體細(xì)胞構(gòu)成。它的生成、發(fā)育與功能體現(xiàn)都與干細(xì)胞有密切關(guān)系。作為卵巢中發(fā)育最快與卵母細(xì)胞發(fā)育關(guān)系最密切的顆粒細(xì)胞，它的迅速擴(kuò)增及不同功能分化導(dǎo)致卵泡發(fā)生。在兩周內(nèi)，卵泡中顆粒細(xì)胞從不到50萬迅速增殖到超過5千萬，并分化成具有不同特異功能的細(xì)胞群。這些細(xì)胞形成功能型的合胞體，既能合成類固醇激素又能給卵母細(xì)胞提供營養(yǎng)。這表明顆粒細(xì)胞具有多能性特征。但是，黃體化的顆粒細(xì)胞一直被認(rèn)為屬于終末分化細(xì)胞，直到最近一些研究揭示其具有多能特性。這些具有干性的顆粒細(xì)胞表現(xiàn)在多個方面：首先是表達(dá)干細(xì)胞因子OCT4、SOX2和NANOG；其次具有較高的端粒酶活性；第三可以分化成其他類型細(xì)胞，包括成骨細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞等。顆粒細(xì)胞還可以在體外進(jìn)行轉(zhuǎn)分化，用于研究一些卵巢病理癥狀。雖然顆粒細(xì)胞的多能特性正不斷被揭示，但也一直受到質(zhì)疑與挑戰(zhàn)。本研究通過對豬卵巢顆粒細(xì)胞的分離與培養(yǎng)、基因表達(dá)檢測、重編程與體外分化三方面的研究，得到以下結(jié)論。1.豬顆粒細(xì)胞的分離與培養(yǎng)用注射器從豬卵巢中抽取不同大小卵泡的卵泡液，在體視顯微鏡下用自制的吸胚針從卵泡液中分離顆粒細(xì)胞團(tuán)直接貼壁培養(yǎng)。結(jié)... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

不同大小卵泡中的卵丘顆粒細(xì)胞與卵母細(xì)胞復(fù)合體A小卵泡<4mmB中卵泡4-8mmC、D大卵泡>8mmA、B、C40倍D100倍Fig.3-1ThecumulusandoocytecomplexesinfolliclesofdifferentsizeAsmallfollicles<4mmBfollicles4-8mmC,Dlargefollicles>8mm.A、B、C40xD100x

圖 3-1 不同大小卵泡中的卵丘顆粒細(xì)胞與卵母細(xì)胞復(fù)合體A 小卵泡<4mm B 中卵泡 4-8mm C、D 大卵泡>8mm A、B、C 40 倍 D 100 倍Fig.3-1 The cumulus and oocyte complexes in follicles of different sizeall follicles <4mm B follicles 4-8mm C, D large follicles> 8mm. A、B、C 40x D

.3.2 不同類型顆粒細(xì)胞的貼壁培養(yǎng)為了對比卵泡液中不同類型顆粒細(xì)胞的貼壁狀態(tài)，通過在體視顯微鏡下分離出帶細(xì)胞的卵丘顆粒細(xì)胞與不帶卵母細(xì)胞的顆粒細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)兩種類型顆粒細(xì)胞貼壁并增殖，但有卵母細(xì)胞的一組增殖更快且擁有更高的貼壁率，結(jié)果見圖 3-3 與-1。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]The novel OCT4 spliced variant OCT4B1 can generate three protein isoforms by alternative splicing into OCT4B[J]. Yuan Gao a,b,1,Xia Wang a,1,Jin Han a,Zhifeng Xiao a,Bing Chen a,Guannan Su a,Jianwu Dai a,a Key Laboratory of Molecular Developmental Biology,Institute of Genetics and Developmental Biology,Chinese Academy of Sciences,Beijing 100190,China b The Graduate School,Chinese Academy of Sciences,Beijing 100190,China.  遺傳學(xué)報. 2010(07)



本文編號：3235113